يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول آليات الشفاء من أنستوموز القولونية، وقد توفر نموذجا للحد من معدلات تسرب anastomotic وعواقبها المدمرة المحتملة. تقدم تقنيتنا طريقة بسيطة نسبيا وقابلة للاستنساخ لأداء القولون الكولوني أو كولو المستقيم في نموذج حيواني مع معدلات تسرب سريرية مماثلة للمرضى البشريين. تبدأ عن طريق تأمين أطراف الماوس تخدير إلى السطح الجراحي، وتطهير البطن المكشوفة مع الكلورهيكسيدين.
مكان المقبل ستائر معقمة على الحيوان، وجعل شق الجلد على طول خط الوسط من أسفل البطن إلى xiphoid. استخدام ملقط لرفع خط الوسط من جدار البطن، والحرص على عدم إصابة هياكل داخل البطن incise طول اللفافة البطنية منتصف. عندما تتعرض الأمعاء، وتحديد موقع الأمعاء والأمعاء الدقيقة، وتدوير في الجانب الأيسر الحشوة medially لفضح القولون التنازلي والسيني.
ثم تغطية الأحشاء مع شاش رطبة ومعقمة. معطف تلميح مسبار حاد مع هلام التشحيم، وتقدم بعناية التحقيق في المستقيم للمساعدة في تحديد القولون السيني التنازلي. بمجرد تحديد القولون ، اسحب جزئيًا المسبار ، واستخدم ملقطًا أتيناتية لفهم القولون السيني المتفوق على مدخل الحوض برفق.
باستخدام مقص صغير حاد، وجعل قطع على طول القولون السيني، عمودي على أنسجة الأمعاء، وتمتد 80 إلى 90٪ عبر عرض القولون. إذا أصيب الأوعية الدموية المساريق خلال دورة الحشوية، أو الكولوتي، بلطف الضغط على مرأى من الإصابة لمدة تصل إلى دقيقتين. لإصلاح القولون السيني، استخدم سائق إبرة كاستروفيجو وخمسة إلى ستة قطعت ثمانية غرز البولي بروبلين غير قابلة للامتصاص O لإصلاح فغر القولون.
أداء anastomosis في الحدود mesentery والعمل طريقك ثنائيا إلى الحدود المضادة للميentery يساعد على ضمان براءة اختراع وعدم تضيق الاستئصال. كما تقدم الإصلاح، تقدم عبر الشرج، حادة تلميح تشريح التحقيق لتمتد الإصلاح قبل يتم وضع الغرز الأولية للمساعدة في منع إصلاح ضيقة جدا، وخفض معدلات تضيق anastomotic. عندما تم وضع جميع الغرز ، استخدم حقنة 10 ملليلتر مليئة بالملح المعقم الدافئ لري البطن عدة مرات.
خلال الري النهائي ملء البطن مع المالحة العقيمة، وتقدم بعناية مشحم، 18 gage أنجيوكاثيتر في المستقيم لتضخيم القولون مع 5 إلى سنتيمتر مكعب واحد من الهواء، لتحديد تسرب داخل anastomosis. ثم ضع خياطة إضافية للإصلاح، وتضخيم القولون مرة أخرى للتأكد من عدم وجود تسرب. فرغ القولون مع angiocatheter قبل إزالتها، والعودة بلطف الأحشاء المُمَسَن إلى موضعه التشريحي الطبيعي.
استخدم أربع خياطة مضفرة قابلة للامتصاص لإغلاق شق البطن ، مع خياطة جارية على طول الطبقة العضلية لجدار البطن ، تبدأ من أعلى الشق ، وتنتهي في الجانب السفلي من الشق. ثم استخدم خياطة o monofilament أربعة لإغلاق الجلد، ومراقبة الماوس حتى تعافى تماما من التخدير. عند نقطة النهاية التجريبية المناسبة، تعقيم البطن مع الكلورهيكسيدين و 70٪ الإيثانول، واستخدام مقص حاد لإعادة شق خط الوسط الأصلي.
استخدام مقص لقطع في طبقة العضلات، وبعناية تنفيذ دوران الحشوي الأيسر لفضح القولون السيني إصلاحها. تحديد البصر إصلاح عن طريق تحديد موقع ذيول من خياطة البولي بروبلين المستخدمة في الإصلاح. بلطف وبفظاء تشريح أي الالتصاق الأمعاء إلى الأمعاء بعيدا عن مرأى من إصلاح، مع الحرص على عدم تعطيل مرض الاستئصال.
استخدام قلم وضع علامات لتعيين الحدود التي تكون في وقت من النقطتين، قبل إزالة جزء القولون. بعد ذلك ، استخدم المقص لعرض عرضية عبر القولون التنازلي ، سنتيمتر واحد من الزوج ، حتى سنتيمتر واحد من رؤية الورم. الأنسجة المنطوقة وظيفة تميل إلى أن تكون هشة للغاية والحلقات الجراحية وكذلك التعامل لطيف ودقيق للأنسجة، وتساعد على ضمان ضد اضطراب في جراحية osistomosis.
استخدام مقص غرامة لتشريح حاد القولون من mesentery المرفقة على طول الحدود الخلفية للقولون لإزالة الجزء السيني. وقطع على طول الحدود المساريقية بطريقة طولية، لإنشاء مقطع مستطيل من القولون من عينة أسطواني إزالتها سابقا. وجعل قطع طولي على طول القولون، مقابل وضع العلامات.
ثم إصلاح، مُمَكَّنَ، وقطع الأنسجة العينة حسب الضرورة لعلم الأنسجة أو الكبت المناعي. تحليل الأنسجة، بعد سبعة أيام من الإصابة، ويكشف عن استجابة الشفاء الليفية، بوساطة العضلات الملساء ألفا أكت في الأرومية الميوفيbrosts إيجابية. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر إجراء اختبار عدم التوف مع الورم المغرق تحت المالحة العادية ، لتأكيد صبغة الورم ، ولضمان عدم وجود تسرب.
يمكن إجراء هذا الإجراء على الفئران المعدلة وراثيا، أو المسببة للأمراض مع اضطرابات التئام الجروح، مثل الفئران المثبطة السكري أو المثبطة مناعية، للإجابة على أسئلة إضافية حول العوامل التي تسهم في تسرب anastomotic. بعد هذا الإجراء، يمكن إجراء علم الكيمياء المناعية والخلايا من الأنسجة العنائية التي يتم حصادها في نقاط زمنية محددة بعد الجراحة، لتوفير فهم أفضل للخلايا المعنية، وأدوارها في عملية الشفاء التحسسي. لا تنس أن العمل مع Isoflurane يمكن أن يكون خطيرا للغاية، وأن الاحتياطات، مثل استخدام أغطية الترشيح الكربون والتهوية ينبغي دائما أن تتخذ أثناء تنفيذ هذا الإجراء.
