שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח על מנגנוני הריפוי של anastomoses קולו-המעי הגס, ועשוי לספק מודל להפחתת שיעורי דליפה anastomotic ואת ההשלכות ההרסניות שלהם. הטכניקה שלנו מציעה שיטה פשוטה יחסית לשחזור לביצוע אנסטומוזיס קולו-קולוני או קולו-רקטלי במודל של בעלי חיים עם שיעורי דליפה קליניים דומים לחולים אנושיים. התחל על ידי הבטחת הגפיים של עכבר הרדמה על פני השטח הכירורגיים, וחיטוי הבטן החשופה עם כלורקסידין.
לאחר מכן מניחים וילון סטרילי מעל החיה, ולעשות חתך בעור לאורך קו האמצע של הבטן התחתונה כדי xiphoid. השתמש ממטרות כדי להרים את קו האמצע של דופן הבטן, ולדאוג לא לפגוע מבנים תוך בטן לשרוף את אורך fascia הבטן קו האמצע. כאשר המעיים נחשפים, לאתר את cecum ומעיים קטנים, ולסובב את הקרביים בצד שמאל מתווך כדי לחשוף את המעי הגס יורד סיגמואיד.
ואז לכסות את הקרביים עם גזה לחה, סטרילית. מצפים קצה בדיקה קהה עם ג'לי סיכה, בזהירות לקדם את החללית לתוך פי הטבעת כדי לסייע בזיהוי של המעי הגס סיגמואיד יורד. לאחר המעי הגס זוהה, חלקית למשוך את החללית, ולהשתמש מטחנים אטראומטיים לתפוס בעדינות את המעי הגס סיגמואיד מעולה על התוך האגן.
באמצעות מספריים מיקרו חדים, לעשות חתך לאורך המעי הגס סיגמואיד, בניצב לרקמת המעי, ולהרחיב 80 עד 90% לרוחב המעי הגס. אם כלי דם mesenteric נפצע במהלך הסיבוב הקרביים, או קולוטומיה, בעדינות להפעיל לחץ על המראה של הפציעה עד שתי דקות. כדי לתקן את קולוטומיית סיגמואיד, השתמש נהג מחט castroviejo וחמישה עד שישה פשוט קטע שמונה O תפרים פוליפרופילן לא נספג כדי לתקן את הקולוסטמיה.
ביצוע האנטומיה בגבול mesentery ולעבוד בדרך שלך דו צדדית לגבול נגד mesentery מסייע להבטיח אנסטומוזיס פטנט ולא התעצמות. ככל שהתיקון מתקדם, לקדם את בדיקה trans-anal, קהה קצה ניתוח כדי לאורך התיקון לפני התפרים הראשוניים ממוקמים כדי לסייע במניעת תיקון צר מדי, כדי להקטין את שיעורי ההחמרה anastomotic. כאשר כל התפרים הונחו, להשתמש מזרק 10 מיליליטר מלא מלוחים סטריליים מחוממים להשקות את הבטן מספר פעמים.
במהלך ההשקיה הסופית למלא את הבטן עם מלוחים סטריליים, בזהירות לקדם סיכה, 18 gage אנגיוקטטר לתוך פי הטבעת כדי לנפח את המעי הגס עם 5 עד סנטימטר מעוקב של אוויר, לזיהוי של דליפות בתוך anastomosis. לאחר מכן מניחים תפר נוסף לתיקון, ומנפחים את המעי הגס שוב כדי לוודא שאין דליפות. לנפח את המעי הגס עם אנגיוקטטר לפני ההסרה, בעדינות להחזיר את הקרביים המדיליים למיקום האנטומי הרגיל שלה.
השתמש ארבעה תפרים קלועים נספג O כדי לסגור את החתך בבטן, עם תפר פועל לאורך השכבה השרירית של דופן הבטן, החל בחלק העליון של החתך, וגימור בהיבט הנחות של החתך. לאחר מכן השתמש בתפר monofilament ארבעה O כדי לסגור את העור, ולפקח על העכבר עד שהוא התאושש לחלוטין מן ההרדמה. בנקודת הקצה הניסיונית המתאימה, יש לעקר את הבטן באמצעות כלורקסידין ו-70% אתנול, ולהשתמש במספריים חדים כדי להצביע מחדש על החתך המקורי בקו האמצע.
השתמש במספריים כדי לחתוך לתוך השכבה השרירית, ולבצע בזהירות סיבוב הקרביים המדיאלי השמאלי כדי לחשוף את המעי הגס סיגמואיד מתוקן. זהה את מראה התיקון על ידי איתור הזנבות של תפר הפוליפרופילן המשמש לתיקון. בעדינות ובבוטות לנתח כל מעי להידביקויות המעי הרחק ממראות התיקון, דואג לא לשבש את anastomosis.
השתמש בעט סימון כדי לסמן את הגבול האן-סטימרני של המעי הגס, לפני הסרת מקטע המעי הגס. לאחר מכן, השתמש במספריים כדי לעבור דרך המעי הגס היורד, סנטימטר אחד מהזוג, עד סנטימטר אחד דיסטלי מהמראה של anastomosis. הרקמות שלאחר הניתוח נוטות להיות לולאות שבריריות וניתוחיות ביותר, כמו גם טיפול עדין ומוקפד של רקמות, לעזור להבטיח נגד ההפרעה של anastomosis כירורגית.
השתמש במספריים עדינים כדי לנתח בחדות את המעי הגס מן mesentery המצורפת לאורך הגבול האחורי של המעי הגס כדי להסיר את קטע סיגמואידל. וחותכים לאורך הגבול הקסנטי בצורה אורך, כדי ליצור קטע מלבני של המעי הגס מהדגימה הגלילית שהוסרה בעבר. ולעשות חתך אורך לאורך המעי הגס, מול הסימון.
לאחר מכן לתקן, imbed, לחתוך את רקמת המדגם לפי הצורך עבור היסטולוגיה או immunostaining. ניתוח היסטולוגי, שבעה ימים לאחר פציעה, חושף תגובת ריפוי פיברוטית, מתווך על ידי שריר חלק אלפא actin מיופיברובלסטים חיוביים. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לבצע בדיקת אי-התפלה עם anastomosis שקוע תחת מלוחים רגילים, כדי לאשר את הפטרונות של anastomosis, ולהבטיח כי אין דליפה קיימת.
הליך זה יכול להתבצע על מהונדסים גנטית, או עכברים פתוגניים עם הפרעות ריפוי פצעים, כגון עכברים סוכרתיים או מדכאי חיסון, כדי לענות על שאלות נוספות על הגורמים התורמים לדליפה anastomotic. בעקבות הליך זה, אימונוהיסטוכימיה ותרבות התאים יכולים להתבצע מרקמה anastomotic שנקטפו בנקודות זמן ספציפיות לאחר הניתוח, כדי לספק הבנה טובה יותר של התאים המעורבים, ואת תפקידם בתהליך הריפוי anastomotic. אל תשכח כי עבודה עם Isoflurane יכול להיות מסוכן מאוד, כי אמצעי זהירות, כגון שימוש סינון פחמן ברדסים אוורור תמיד צריך להילקח בעת ביצוע הליך זה.
