この方法は、コロコロニック・アナストモーゼの治癒メカニズムに関する重要な質問に答えるのに役立ち、解剖学的リーク率とその潜在的に壊滅的な結果を減らすためのモデルを提供する可能性があります。我々の技術は、ヒト患者と同様の臨床リーク率を有する動物モデルにおいて、コロ大腸性または直腸吻合を行うための比較的簡単で再現可能な方法を提供する。麻酔をしたマウスの手足を外科用表面に固定し、露出した腹部をクロルヘキシジンで消毒することから始めます。
次に、動物の上に無菌のドレープを配置し、下腹部の正中線に沿ってxiphoidに皮膚切開を行います。鉗子を使用して腹壁の正中線を持ち上げ、腹腔内構造を傷めないように注意して、正中腹部筋膜の長さを切り傷まないようにします。腸が露出したら、盲腸と小腸を見つけ、左側の内臓内側を回転させて下降およびシグモイド結腸を露出させる。
その後、湿った滅菌ガーゼで内臓を覆います。鈍いプローブチップに潤滑ゼリーをコーティングし、プローブを直腸に慎重に進め、下降シグモイド結腸の同定を支援します。結腸が特定されたら、プローブを部分的に引き出し、外傷性鉗子を使用して骨盤入口よりも優れたシグモイド結腸を優しく把握する。
鋭利なマイクロハサミを使用して、シグモイド結腸に沿って切り取り、腸組織に垂直に、結腸の幅全体で80〜90%延長する。内臓回転や人工肛門の過程で腸間膜血管が損傷した場合は、最大2分間、損傷を見て静かに圧力をかける。シグモイド人工肛門を修復するには、カストロビエホニードルドライバーと5〜6回の簡単な中断8 O非吸収性ポリプロピレンステッチを使用して人工肛門を修復します。
腸間間関係の国境で吻合を行い、反腸間間国境に二国間で働くことは、特許および非狭窄吻合を確実にするのに役立ちます。修復が進むにつれて、トランス肛門、鈍い先端解剖プローブを進め、最初の縫合糸が配置される前に修復を行い、修復が狭くなりすぎるのを防ぎ、解禁狭率を低下させる。すべての縫合糸が置かれたら、温めた滅菌生理食塩水で満たされた10ミリリットルの注射器を使用して腹部を数回灌漑する。
最後の灌漑の間に無菌生理食塩水で腹部を満たし、注意深く麻酔内の漏れの識別のために、空気の5〜1立方センチメートルで結腸を膨らませるために直腸に潤滑、18ゲージアンジオカテーテルを進めます。その後、修理のために追加の縫合糸を配置し、漏れがないことを確認するために再び結腸を膨らまします。除去する前に血管カテーテルで結腸を収縮させ、媒化内臓を正常な解剖学的位置にそっと戻す。
4つのO吸収性編組縫合糸を使用して腹部切開を閉じ、腹壁の筋肉層に沿って縫合を行い、切開の最上部から始まり、切開部の下面で仕上げる。次に、4つのOモノフィラメント縫合糸を使用して皮膚を閉じ、麻酔から完全に回復するまでマウスを監視します。適切な実験終点で、クロルヘキシジンと70%エタノールで腹部を殺菌し、鋭利なはさみを使用して元の中線切開を再切開する。
はさみを使用して筋肉層に切り込み、修復したシグモイド結腸を露出させるために慎重に左内側内側内膜回転を行います。修理に使用されるポリプロピレン縫合糸の尾部を見つけることによって修理の視力を識別する。解剖学を妨げないように注意して、修復の光景から離れて腸の癒着に穏やかに、ぶっきらぼうに解剖する。
コロンセグメントを除去する前に、マーキングペンを使用してコロンのアンテンタイム境界を区切ります。次に、はさみを使用して、ペアから1センチメートル離れた下降結腸を横方向に横断し、吻合の視力から最大1センチメートル遠位にする。術後組織は、非常に脆弱で外科的ループである傾向があり、組織の穏やかで細心の注意を払った取り扱いも、外科的吻合の中断に対して確実に役立ちます。
細かいはさみを使用して、結腸の後部境界に沿って付着した腸間腸から結腸を鋭く解剖し、シグモイドセグメントを取り除きます。そして、縦方向に腸間膜の境界の長さに沿って切断し、以前に除去された円筒形の標本から結腸の長方形の部分を作成する。そして、マーキングの向かいに、結腸の長さに沿って縦切りを行います。
次いで、組織学および免疫染色のために必要に応じて試料組織を固定、浸透、切断する。組織学的分析は、傷害の7日後に、筋線維芽細胞の平滑筋αアクチンによって媒介される線維性治癒応答を明らかにする。この手順を試みる間、正常な生理液線下で沈んだ吻合で鼻炎検査を行い、吻合の開口を確認し、漏れがないことを確認することが重要です。
この手順は、糖尿病または免疫抑制マウスなどの創傷治癒障害を有する病原性マウスに対して、解剖学的漏れに寄与する要因に関する追加の質問に答えるために、遺伝子組み換え、または病原性マウスに対して行うことができる。この手順に従って、免疫組織化学および細胞培養は、手術後の特定の時点で採取された解力組織から、関与する細胞のより良い理解を提供し、そしてそれらの役割を麻酔学的治癒プロセスに提供することができる。Isofluraneでの作業は非常に危険であり、この手順を実行する間は、カーボンろ過や換気フードの使用などの予防措置を常に行う必要があることを忘れないでください。
