쥐에서 서브 클라비아 정맥 구멍을 통해 혈액 수집. 마우스에서 혈액 샘플 수집은 대부분의 연구 실험실에서 필수적이다. 마우스의 혈액 수집을 위한 전통적인 접근은 100 마이크로리터 견본이 필요한 때 꼬리 절단입니다.
그러나, 비단말 시점에서 100개 이상의 마이크로리터가 필요한 경우, 레트로 궤도, 형량 출혈 또는 과형 혈액 수집이 가장 일반적으로 고려되는 기술이다. 일부 위치에서경정맥 절개 또는 카테터화는 대체 방법으로 채택되었다. 그럼에도 불구하고, 위의 방법은 마우스에게 상처를 줍니다.
우리의 공식적인 연구에 기초하여, 여기에서 우리는 마우스에 있는 subclavian 정맥에서 혈액 수집을 위한 새로운 경제적이고 온화한 전략을 소개합니다. 안전성과 타당성, 그리고 이 기술로 혈액량을 획득하여 제시되고 논의된다. 전신 마취 후, 마우스를 supine 위치에 놓습니다.
75%에탄올로 적외선 공간을 청소하십시오. 천자 전에 쇄골과 상골 포사를 확인합니다. 쇄골 중간에 있는 천자 부위를 식별합니다.
바늘을 우월하고 위쪽으로 위로 움직인다. 3~4밀리미터 앞으로 이동한 후 주사기에 음압을 유지하고 천천히 바늘을 다시 그립니다. 혈액은 철수하는 동안 주사기로 배출됩니다.
혈액 수집 후, 출혈을 중지하려면 1 ~ 2 분 동안 부드럽게 펑크 사이트를 누릅니다. 바늘, 전자 스케일, 헤파린 및 식염수와 연결된 75%에탄올, 접착 테이프, 상피 제, 튜브, 1.0 밀리리터 주사기를 포함한 필수 재료를 준비합니다. 만족스러운 전신 마취 후, 마우스를 수술대에 올려놓고 테이블 가장자리에서 2~4센티미터 떨어진 곳에 배치하여 정맥 구멍을 용이하게 합니다.
그림 2와 같이 팔다리를 편안한 자세로 고정합니다. 전체 절차에서 삽관이나 기계적 환기가 필요하지 않았습니다. 면 봉면으로 적외선 공간 주변에 상피 제를 적용하십시오.
3 분 후, 젖은 면봉으로 에필링 제를 씻고 털과 눈에 보이는 먼지를 제거합니다. 75%에탄올로 적외선 공간을 살균한 다음 깨끗한 거즈로 건조시다. 한 손가락으로 쇄골 뼈와 상골 포세의 위치를 식별합니다.
천자 부위를 쇄골 뼈 의 중간에 가깝게 찾아 서 그것에 붙잡혔다. 왼쪽 검지 손가락을 천공 부위에 넣어 피부와 피하 조직을 고치게 합니다. 두개골에 바늘을 위로 이동 하여 수프라스네 알 포사쪽으로 누른다.
바늘이 피하 조직에 들어가면 오른손의 링 핑거가 뒤로 움직여야 음압을 형성해야 합니다. 주사기를 3~4밀리미터 앞으로 이동하지만 주사기에 혈액 배출이 없다면 멈춥니까. 그런 다음 주사기를 천천히 다시 끌어내고 부정적인 압력을 유지합니다.
대부분의 경우 혈액은 다시 그리는 과정에서 주사기에 들어갑니다. 혈액이 주사기에 들어가면 주사기를 고정하고 주사기에서 필요한 양의 혈액이 수집 될 때까지 음압을 유지하십시오. 혈액 수집 후, 펑크 바늘을 철회하고, 출혈을 중지하기 위해 1 ~ 2 분 동안 약간 면봉으로 펑크 부위를 누릅니다.
혈액 샘플을 헤파린 튜브로 옮기습니다. 우리는 10 퀴미 마우스에서이 절차를 반복했다. 9개의 절차가 오른쪽에 성공했습니다.
한 번은 오른쪽에서 세 번의 시도에서 실패했고, 혈액 수집은 왼쪽에서 성공했다. 시간 과정은 35초에서 126초 사이입니다. 혈액 수집 량은 약 200 마이크로 리터로 설정되었습니다.
혈액 수집은 1 ~ 4 번의 시도로 성공했습니다. 혈액 샘플링은 2개의 마우스에 있는 첫번째 시도에서, 및 다른 마우스에 있는 2- 3시도에서 1개의 마우스에 있는 4개의 시도에서 성공했습니다. 모든 데이터는 표 1에 설명되었습니다.
모든 동물은 살아남았고, 혈액 샘플링 후 30 분 이내에 회복되었습니다. 관찰된 모든 매개 변수에 대한 섹스 사이에는 큰 차이가 없었습니다. 결론적으로, 서브클라비아 정맥 천자는 마우스에서 혈액 수집을 위한 안전하고 효과적인 방법입니다.
꼬리 정맥 절단 및 복고풍 궤도 신경총 혈액 수집 외에,이 방법은 마우스의 여러 시점에서 관측 연구에 적합하고 가능합니다.