Сбор крови через прокол субклавской вены у мышей. Сбор образцов крови у мышей имеет важное значение в большинстве исследовательских лабораторий. Традиционными подходами к сбору крови у мышей является резка хвоста, когда требуется менее 100 образцов микролитров.
Однако, если в нетерминной точке времени требуется более 100 микролитров крови, ретро-орбитальные, субмандибулярные кровотечения или подментальный сбор крови являются наиболее часто используемыми методами. В некоторых местах в качестве альтернативных методов были приняты разрез яремной вены или катетеризация. Тем не менее, вышеперечисленные методы вредят мышам.
На основе наших официальных исследований мы представляем новую экономичную и нежную стратегию сбора крови из субклавской вены у мышей. Безопасность и осуществимость, и полученный объем крови с помощью этой техники, представлены и обсуждены. После общей анестезии, лежать мыши в положении лежа.
Очистите инфраклавикулярное пространство 75%этанолом. Подтвердите ключицу и супрастерна фоссы перед проколом. Определите место прокола в середине ключицы.
Перемести иглы выше и вверх к надповерхонное fossae, только задний к ключице. После перемещения от трех до четырех миллиметров вперед, держать отрицательное давление в шприце, и медленно отступить иглы. Кровь будет стекать в шприц во время снятия.
После сбора крови, нажмите прокол сайт мягко в течение одной-двух минут, чтобы остановить кровотечение. Подготовка необходимых материалов, в том числе 75% этанола, клейкой лентой, эпилятором, трубками, 1,0 миллилитровым шприцем, соединенным с иглой, электронной шкалой, гепарином и солевым раствором. После удовлетворительной общей анестезии, поместите мышь на операционный стол в положении лежа, и два-четыре сантиметра от края стола, чтобы облегчить прокол вены.
Исправьте конечности в удобном положении, как показано на рисунке 2. Во всей процедуре не требуется никакой инотубации или механической вентиляции легких. Нанесите эпилятивный агент вокруг инфраклавикулярного пространства с помощью ватного тампона.
Три минуты спустя, мыть эпилятивный агент с мокрым ватным тампоном, чтобы удалить мех и любую видимую грязь. Стерилизовать инфраклавикулярное пространство с 75% этанола, а затем высушить чистой марлей. Определите расположение ключицы кости и надстернальных ямок одним пальцем.
Найдите место прокола, близко к середине ключицы кости, и поймали на него. Положите левый указательный палец боковой к месту прокола, чтобы исправить кожу и подкожной ткани. Перемести иглу вверх в черепной лежал к надстерналь fossae.
Как только игла входит в подкожные ткани, безымянный палец правой руки должен двигаться назад, чтобы сформировать отрицательное давление. Двигайтесь вперед шприц в течение трех-четырех миллиметров, но остановитесь, если нет утечки крови в шприц. Затем медленно отрисуйте шприц и держите в нем негативное давление.
В большинстве случаев кровь будет входить в шприц во время отывания. После того, как кровь входит в шприц, исправить шприц, и держать отрицательное давление, пока не требуется объем крови, собранной в шприц. После сбора крови, снять прокол иглы, и нажмите прокол сайт с ватным тампоном немного в течение одной-двух минут, чтобы остановить кровотечение, а затем отправить мышей обратно в клетки.
Перенесите образец крови в нашу гепариновую трубку. Мы повторили эту процедуру у 10 мышей куими. Девять процедур удалось в правой стороне.
Один случай потерпел неудачу в течение трех попыток в правой стороне, и сбор крови удалось в левой стороне. Курс времени колебался от 35 до 126 секунд. Объем сбора крови составил около 200 микролитров.
Сбор крови удалось с одной до четырех попыток. Анализ крови удался с первой попытки у двух мышей, и при четырех попытках в одной мыши, при двух-трех попытках у других мышей. Все данные были проиллюстрированы в таблице 1.
Все животные выжили и выздоровели в течение 30 минут после взятия проб крови. Существенной разницы между полом по всем наблюдаемым параметрам не было. В заключение, пункция субклавских вен является безопасным и эффективным методом сбора крови у мышей.
Помимо резки хвостовых вен и ретро-орбитального сбора крови, этот метод осуществим и подходит для наблюдательных исследований в нескольких точках времени у мышей.
