تظهر الدراسات السابقة أن استئصال القرنية الانكساري الضوئي أو PRK عبر الظهارة ، هو واحد من أفضل النماذج الحيوانية لدراسة شفاء القرنية ، وكذلك التغييرات المرتبطة بالتنضير النسيجي المرضي للقرنية الظهارية. العمل مع الجربوع المنغولية كنموذج حيواني له العديد من المزايا على القوارض الأخرى. أولا ، تحتوي القرنية على نفس الطبقات النسيجية مثل القرنية البشرية.
ثانيا ، العين أكبر تشريحيا من عين القوارض الأخرى ، مما يسمح بمعالجة أسهل. تم إجراء كل هذا البحث في مرافق مركز البحث والتطوير في علم المناعة والأمراض المعدية بجامعة كاتوليكا دي قرطبة. كانت الخطوة الأولى هي تطهير سطح العمل لخزانة التدفق الصفحي.
لهذا الغرض ، تم استخدام 70 ٪ من الكحول. الأدوات الجراحية التي سيتم استخدامها. تم وضع مواد يمكن التخلص منها مثل الإبر والمحاقن والأدوية لتخدير القوارض في منطقة العمل.
يجب أيضا وضع حقل جراحي يمكن التخلص منه لاحتواء الإفرازات وشعر القوارض إذا لزم الأمر. تم استخدام ثلاثة جربوع منغولية ذكور عمرها ستة أشهر من نفس الحجم والوزن ، حوالي 90 جراما في التجربة. تم تنفيذ الإجراءات التي سيتم تنفيذها لاحقا على العين اليمنى فقط.
يتم أخذ القفص مع القوارض ووضعه داخل خزانة التدفق الصفحي. ننتقل إلى فتح الصندوق ، وتحديد كل من الجربوع ، ووزنها على الميزان. إنها غير ضارة ولكنها حساسة.
يجب ارتداء القفازات التي تستخدم لمرة واحدة في جميع الأوقات. من أجل التعامل الصحيح ، يجب على المشغل استخدام يده غير الماهرة لتثبيتها بقوة من الذيل ، وباليد الماهرة ، اضغط برفق لأسفل بإصبع الإبهام والسبابة خلف الأذنين لعقد الحيوان وبالإصبع الصغير ، أمسك الذيل. بناء على وزن الحيوان ، يتم حساب كمية التخدير اللازمة لكل من الجربوع.
يجب ملء حقنة ملليلتر واحد بالكيتامين ، 50 على 100 ملليغرام لكل كيلوغرام ، وزيلازين ، 2 ملليغرام لكل كيلوغرام. قبل إجراء التصوير المقطعي للتماسك البصري ، تم وضع ستائر جراحية معقمة لحماية المعدات من الإفرازات أو شعر الحيوانات. بينما يحمل أحد المشغلين الحيوان ، يجب على مشغل آخر التقاط الصور.
تم تصوير العين مجهريا وتم عمل شرائح متعددة من الجزء الداخلي من القوارض. يمكن ملاحظة القرنية بأكملها ، الغرفة الأمامية ، القزحية ، زاوية القزحية القرنية والعدسة ، التي تبرز في الغرفة الأمامية. بالإضافة إلى ذلك ، تم أخذ قياسات سمك القرنية المركزية والمحيطية التي أظهرت سمكا مركزيا يبلغ 160 ميكرومترا يتناقص إلى حوالي 110 ميكرومتر في الأطراف.
قبل إجراء ليزر excimer PTK ، تم وضع ستائر جراحية معقمة لحماية المعدات من الإفرازات أو شعر الحيوانات. تم استئصال ما بين 60 و 62 ميكرومتر من سمك القرنية بقطر ثلاثة ملليمترات. تم تصوير القرنية لتقييم التغيرات المورفولوجية الفورية.
في هذه الصورة ، يمكن رؤيته ، مقلة العين للعين اليمنى الجربوع. أ ، لوحظ سطح غير منتظم لمقلة العين الطبيعية. ب ، صورة التقطت بعد خمس دقائق من إجراء PTK توضح أن سطح القرنية به مخالفات.
انظر الأدلة على قرحة القرنية ملطخة بالفلوريسين. في OCT ، يشير السهم الأيمن إلى المنطقة التي تراكمت فيها المخلفات في الوسط والسهم الأيسر يشير إلى حافة قرحة القرنية. كانت طريقة التضحية المستخدمة في هذه التجربة من خلال استخدام غرفة ثاني أكسيد الكربون.
تم التضحية بهم على فترات زمنية مختلفة وتم إجراء استئصال مقلة العين الطبيعية ومقل العين بعد الجراحة في 24 و 96 ساعة بعد الجراحة لمراقبة التئام القرنية. تم وضع كل مقلة عين منزوعة النواة في الفورمالديهايد ومعالجتها من قبل أخصائي علم الأمراض. تم أخذ أقسام وقياسات وصور متعددة.
من الناحية النسيجية ، يتكون سمك القرنية من سمك تم الحصول عليه بواسطة OCT ، وهناك ترقق تدريجي نحو المحيط. وذلك لأن طبقات الظهارة والألياف اللحمية تنخفض في المحيط. تحتوي قرنية الجربوع المنغولية على نفس طبقات الظهارة الأمامية الطبقية البشرية مع أربع إلى ست طبقات من الخلايا تمثل 28٪ من السماكة الكلية للقرنية.
طبقة بومان ، سدى تمثل 66 ٪ من سمك الكلي. هذا يعزز الغشاء والبطانة. بعد 24 ساعة من الجراحة ، يمكن رؤية قرحة القرنية حيث يتم تمييز السهم.
لوحظ أيضا بقع متعددة من انحلال الظهارة وخلل التقرن المعزول ، تسلل التهابي حاد تحت الظهارة ، وذمة على مستوى اللحمية. التغييرات التي لوحظت في الجربوع الذي تم تشغيله بعد 96 ساعة من PTK هي ، وجود زيادة في الوذمة ، وتصنيف الألياف والخلايا اللحمية ، وتجدر الإشارة إلى أن الظهارة الداخلية قد تم تجديدها بالكامل بالفعل ولم تقدم تسلل التهابي. تظهر الدراسة الحالية النتيجة الإيجابية للنموذج الحيواني الحالي في الجربوع وتأكيده كخيار بحثي جديد في التئام جروح القرنية.
حتى الآن ، لا توجد منشورات تحلل بالتفصيل تشريح وأنسجة القرنية المنغولية. لذلك ، نأمل أن يكون هذا النموذج الحيواني أساسا للتحقيقات العلمية المستقبلية.
