以前の研究は、フォトリフラクティブ角膜切除術または経上皮PRKが、角膜治癒の研究、および上皮角膜の組織病理学的創面切除に関連する変化のための最良の動物モデルの1つであることを示しています。動物モデルとしてモンゴルのスナネズミを扱うことは、他のげっ歯類に比べていくつかの利点があります。第一に、角膜はヒトの角膜と同じ組織層を有する。
第二に、目は他のげっ歯類の目よりも解剖学的に大きく、操作が容易になります。この研究はすべて、コルドバ大学の免疫学および感染症研究開発センターの施設で実施されました。最初のステップは、層流キャビネットの作業面を消毒することでした。
この目的のために、70%アルコールが使用されました。使用する手術器具。針や注射器などの使い捨て材料、およびげっ歯類を麻酔するための薬物が作業エリアに配置されました。
必要に応じて、使い捨ての手術野も分泌物やげっ歯類の毛を含むように配置する必要があります。同様のサイズと体重の3つの6ヶ月齢のオスのモンゴルスナネズミ、約90グラムを実験に使用しました。後で行う手順は右目のみで行われました。
げっ歯類の入ったケージを取り出し、層流キャビネット内に配置します。箱を開け、スナネズミのそれぞれを識別し、体重計で計量します。彼らは無害ですが繊細な動物です。
使い捨て手袋は常に着用する必要があります。それを正しく取り扱うために、オペレーターは熟練していない手で尾をしっかりと保持し、熟練した手で耳の後ろの親指と人差し指でそっと押し下げて動物を保持し、小指で尾を持ちます。動物の体重に基づいて、各スナネズミに必要な麻酔の量が計算されます。
1ミリリットルの注射器には、1キログラムあたり100ミリグラムを超えるケタミンが50個、1キログラムあたり2ミリグラムのキシラジンが充填されます。光干渉断層撮影を行う前に、分泌物または獣毛から機器を保護するために滅菌外科用ドレープを配置した。オペレーターの1人が動物を保持している間、別のオペレーターが捕獲する必要があります。
眼は顕微鏡で撮影され、げっ歯類の内部セグメントから複数のスライスが作られました。角膜全体、前房、虹彩、虹彩角膜角および前房に突出する水晶体が観察される。さらに、中心および末梢の角膜の厚さの測定が行われ、160マイクロメートルの中心の厚さが周辺で約110マイクロメートルに減少することを示しました。
エキシマレーザーPTKを行う前に、無菌の外科用ドレープを、分泌物または獣毛から機器を保護するために配置した。60〜62マイクロメートルの角膜の厚さを直径3ミリメートルで切除した。角膜は、即時の形態学的変化を評価するために撮影されました。
この写真では、スナネズミの右目の眼球を見ることができます。A、正常眼球の不規則な表面が観察される。Bは、PTKが行われた5分後に撮影した写真で、角膜表面に凹凸があることを示す。
フルオレセインで染色された角膜潰瘍の証拠を参照してください。OCTでは、右矢印は中央に残骸が蓄積した領域を示し、左矢印は角膜潰瘍の縁を示します。この実験で使用された犠牲の方法は、二酸化炭素室の使用によるものでした。
それらは異なる時間間隔で屠殺され、正常な眼球の摘出が行われ、術後眼球は角膜治癒を観察するために術後24時間および96時間に行われました。除核された各眼球をホルムアルデヒドに入れ、病理学者によって処理した。複数のセクション、測定、写真が撮影されました。
組織学的には、角膜の厚さはOCTによって得られたものからなり、末梢に向かって漸進的な菲薄化があります。これは、上皮および間質線維の層が末梢で減少するためです。モンゴルスナネズミの角膜は、ヒトと同じ層状の前上皮を持ち、角膜の全厚さの28%を占める4〜6層の細胞があります。
ボーマン層、間質は総厚の66%を表す。これは膜と内皮を固めます。術後24時間で、角膜潰瘍が矢印のマークされた場所に見られます。
また、上皮性アカントリシスおよび孤立した角化異常症、急性上皮下炎症浸潤、間質レベルでの浮腫の複数のパッチが観察された。PTK後96時間で手術されたスナネズミにおいて観察された変化は、浮腫の増加の存在、間質線維および細胞の脱凝集、ならびに内部上皮がすでに完全に再生され、炎症性浸潤を示さなかったことに留意すべきである。本研究は、スナネズミにおける現在の動物モデルの肯定的な結果を示し、角膜創傷治癒における新しい研究オプションとしてそれを確認しました。
今日まで、モンゴルのスナネズミ角膜の解剖学と組織学を詳細に分析した出版物はありません。したがって、この動物モデルが将来の科学的調査の基礎となることを願っています。
