이전 연구에 따르면 광 굴절 각막 절제술 또는 경상 피 PRK는 각막 치유 및 상피 각막의 조직 병리학 적 괴사조직 제거와 관련된 변화에 대한 연구를위한 최고의 동물 모델 중 하나입니다. 동물 모델로 몽골 저빌과 함께 일하는 것은 다른 설치류에 비해 몇 가지 장점이 있습니다. 첫째, 각막은 인간 각막과 동일한 조직 학적 층을 가지고 있습니다.
둘째, 눈은 다른 설치류의 눈보다 해부학적으로 커서 조작이 더 쉽습니다. 이 모든 연구는 카톨리카 데 코르도바 대학교의 면역학 및 전염병 연구 개발 센터의 시설에서 수행되었습니다. 첫 번째 단계는 층류 캐비닛의 작업 표면을 소독하는 것이 었습니다.
이를 위해 70 % 알코올을 사용했습니다. 사용할 수술 도구. 바늘과 주사기와 같은 일회용 재료와 설치류를 마취시키는 약물을 작업 영역에 배치했습니다.
필요한 경우 분비물과 설치류 모발을 포함하도록 일회용 수술 필드도 배치해야합니다. 비슷한 크기와 무게, 약 90 그램의 6 개월 된 수컷 몽골 저빌 3 개를 실험에 사용했습니다. 나중에 수행 할 절차는 오른쪽 눈에서만 수행되었습니다.
설치류가있는 케이지를 가져 와서 층류 캐비닛 안에 넣습니다. 우리는 상자를 열고 각 저빌을 식별하고 저울에서 무게를 잰다. 그들은 무해하지만 섬세한 동물입니다.
일회용 장갑은 항상 착용해야 합니다. 올바른 취급을 위해 작업자는 숙련되지 않은 손을 사용하여 꼬리를 단단히 잡고 숙련 된 손으로 귀 뒤에서 엄지와 검지로 부드럽게 눌러 동물을 잡고 새끼 손가락으로 꼬리를 잡아야합니다. 동물의 무게에 따라 각 저빌에 필요한 마취량이 계산됩니다.
1 밀리리터 주사기는 킬로그램 당 100 밀리그램 이상의 케타민 50과 킬로그램 당 2 밀리그램의 자일 라진으로 채워야합니다. 광학 간섭 단층 촬영을 수행하기 전에 분비물이나 동물의 머리카락으로부터 장비를 보호하기 위해 멸균 수술 용 드레이프를 배치했습니다. 오퍼레이터 중 한 명이 동물을 잡는 동안 다른 오퍼레이터가 포획해야 합니다.
눈은 현미경으로 촬영되었고 설치류의 내부 부분을 여러 조각으로 만들었습니다. 전체 각막, 전방, 홍채, 홍채 각막 각도 및 렌즈가 전방으로 돌출되어 관찰 될 수 있습니다. 또한, 중심 및 말초 각막 두께 측정은 160 마이크로미터의 중심 두께가 주변에서 대략 110 마이크로미터로 감소하는 것을 보여주었다.
엑시머 레이저 PTK를 수행하기 전에 분비물이나 동물의 털로부터 장비를 보호하기 위해 멸균 수술 용 드레이프를 배치했습니다. 60 내지 62 마이크로미터의 각막 두께를 직경 3 밀리미터에서 절제하였다. 즉각적인 형태학적 변화를 평가하기 위해 각막을 촬영했습니다.
이 사진에서는 저빌 오른쪽 눈의 눈 안구를 볼 수 있습니다. A, 정상적인 안구의 불규칙한 표면이 관찰됩니다. B, PTK 수행 5분 후에 촬영한 사진은 각막 표면에 요철이 있음을 보여준다.
플루오레세인으로 염색된 각막 궤양의 증거를 참조하십시오. OCT에서 오른쪽 화살표는 중앙에 찌꺼기가 축적 된 영역을 표시하고 왼쪽 화살표는 각막 궤양의 가장자리를 표시합니다. 본 실험에 사용된 희생 방법은 이산화탄소 챔버를 이용하는 것이었다.
그들은 다른 시간 간격으로 희생되었고 각막 치유를 관찰하기 위해 수술 후 24 시간과 96 시간에 정상적인 안구와 수술 후 안구의 핵 제거가 수행되었습니다. 핵이 제거된 각 안구를 포름알데히드에 넣고 병리학자에 의해 처리했습니다. 여러 섹션, 측정 및 사진이 촬영되었습니다.
조직 학적으로 각막 두께는 OCT에 의해 얻어진 두께로 구성되며 주변부로 갈수록 점진적으로 얇아집니다. 이것은 상피와 기질 섬유의 층이 주변에서 감소하기 때문입니다. 몽골 저빌 각막은 인간의 층상 전방 상피와 같은 층을 가지고 있으며 4-6 개의 세포 층이 각막 전체 두께의 28 %를 차지합니다.
Bowman의 층, 전체 두께의 66 %를 차지하는 간질. 이것은 막과 내피를 시멘트로 만듭니다. 수술 후 24 시간이 지나면 화살표가 표시된 곳에서 각막 궤양을 볼 수 있습니다.
또한 상피 achantholysis 및 고립 된 각막 이완증, 급성 상피 하 염증성 침윤, 기질 수준의 부종의 여러 패치가 관찰되었습니다. PTK 후 96 시간에 수술 된 저빌에서 관찰 된 변화는 부종 증가, 기질 섬유 및 세포의 분해의 존재이며, 내부 상피는 이미 완전히 재생되었으며 염증성 침윤을 나타내지 않았다는 점에 유의해야합니다. 본 연구는 저빌에서 현재 동물 모델의 긍정적 인 결과를 보여 주며이를 각막 상처 치유의 새로운 연구 옵션으로 확인합니다.
현재까지 몽골 저빌 각막의 해부학 및 조직학을 자세히 분석 한 출판물은 없습니다. 따라서이 동물 모델이 미래의 과학적 조사의 기초가되기를 바랍니다.
