Önceki çalışmalar, fotorefraktif keratektomi veya transepitelyal PRK'nın, kornea iyileşmesinin ve ayrıca epitel korneanın histopatolojik debridmanı ile ilişkili değişikliklerin incelenmesi için en iyi hayvan modellerinden biri olduğunu göstermektedir. Moğol gerbilleri ile hayvan modeli olarak çalışmanın diğer kemirgenlere göre birçok avantajı vardır. İlk olarak, kornea insan korneası ile aynı histolojik tabakalara sahiptir.
İkincisi, göz anatomik olarak diğer kemirgenlerin gözünden daha büyüktür ve daha kolay manipülasyona izin verir. Tüm bu araştırmalar, Universidad Catolica De Cordoba İmmünoloji ve Bulaşıcı Hastalıklar Araştırma ve Geliştirme Merkezi'nin tesislerinde gerçekleştirildi. İlk adım, laminer akış kabininin çalışma yüzeyini dezenfekte etmekti.
Bu amaçla %70 alkol kullanıldı. Kullanılacak cerrahi aletler. Çalışma alanına iğne ve şırınga gibi tek kullanımlık malzemeler ve kemirgenleri uyuşturmak için ilaçlar yerleştirildi.
Gerekirse sekresyonları ve kemirgen kıllarını içerecek şekilde tek kullanımlık bir cerrahi alan da yerleştirilmelidir. Deneyde benzer büyüklükte ve ağırlıkta üç adet altı aylık erkek Moğol gerbili, yaklaşık 90 gram kullanılmıştır. Daha sonra yapılacak işlemler sadece sağ gözlerde yapıldı.
Kemirgen içeren kafes alınır ve laminer akış kabininin içine yerleştirilir. Kutuyu açmaya, gerbillerin her birini tanımlamaya ve terazide tartmaya devam ediyoruz. Zararsız ama narin hayvanlardır.
Tek kullanımlık eldivenler her zaman giyilmelidir. Doğru kullanım için, operatör vasıfsız elini kuyruğundan sıkıca tutmak için kullanmalı ve yetenekli elle, hayvanı tutmak için kulakların arkasında bir baş parmak ve işaret parmağı ile hafifçe bastırmalı ve serçe parmağıyla kuyruğu tutmalıdır. Hayvanın ağırlığına bağlı olarak, gerbillerin her biri için gereken anestezi miktarı hesaplanır.
Bir mililitrelik bir şırınga, ketamin, kilogram başına 100 miligramın üzerinde 50 ve kilogram başına iki miligram olan ksilazin ile doldurulmalıdır. Optik koherens tomografi yapılmadan önce, ekipmanı sekresyonlardan veya hayvan kıllarından korumak için steril cerrahi örtüler yerleştirildi. Operatörlerden biri hayvanı tutarken, başka bir operatör yakalamaları almalıdır.
Göz mikroskobik olarak fotoğraflandı ve kemirgenin iç segmentinden çok sayıda dilim yapıldı. Ön kamaraya çıkıntı yapan tüm kornea, ön oda, iris, iridokorneal açı ve lens gözlenebilir. Ayrıca santral ve periferik kornea kalınlığı ölçümleri yapılarak 160 mikrometrelik merkezi kalınlık gösterilerek periferde yaklaşık 110 mikrometreye düşülmüştür.
Excimer lazer PTK uygulamadan önce, ekipmanı sekresyonlardan veya hayvan kıllarından korumak için steril cerrahi örtüler yerleştirildi. 60 ila 62 mikrometre arasında kornea kalınlığı üç milimetre çapında ablatlandı. Kornea acil morfolojik değişiklikleri değerlendirmek için fotoğraflandı.
Bu fotoğrafta gerbil sağ gözünün göz küresi görülmektedir. A, normal göz küresinin düzensiz yüzeyi gözlenir. B, PTK yapıldıktan beş dakika sonra çekilen fotoğraf, kornea yüzeyinde düzensizlikler olduğunu göstermiştir.
Floresein ile boyanmış kornea ülserinin kanıtlarına bakınız. OCT'de, sağ ok merkezde detritusun biriktiği alanı işaretler ve sol ok kornea ülserinin kenarını işaretler. Bu deneyde kullanılan kurban yöntemi, bir karbondioksit odasının kullanılmasıydı.
Farklı zaman aralıklarında kurban edildiler ve kornea iyileşmesini gözlemlemek için ameliyat sonrası 24 ve 96 saat içinde normal göz küresi ve ameliyat sonrası göz kürelerinin enükleasyonu yapıldı. Her enüklee göz küresi formaldehit içine yerleştirildi ve bir patolog tarafından işlendi. Çok sayıda kesit, ölçü ve fotoğraf çekildi.
Histolojik olarak, kornea kalınlığı OKT ile elde edilenden oluşur ve çevreye doğru ilerleyici bir incelme vardır. Bunun nedeni, epitel ve stromal lif katmanlarının çevrede azalmasıdır. Moğol gerbil korneası, korneanın toplam kalınlığının% 28'ini temsil eden dört ila altı hücre katmanı ile katmanlı ön epitel ile aynı insan katmanlarına sahiptir.
Bowman tabakası, stroma toplam kalınlığın% 66'sını temsil eder. Bu çimentolar membran ve endotel. Ameliyattan 24 saat sonra, okun işaretlendiği yerde kornea ülseri görülebilir.
Ayrıca epitelyal akantoliz ve izole diskeratozis, akut subepitelyal inflamatuar infiltrasyon, stromal düzeyde ödem gibi çok sayıda yama gözlendi. PTK'dan 96 saat sonra ameliyat edilen gerbilde gözlenen değişiklikler, artmış ödem varlığı, stromal liflerin ve hücrelerin ayrışmasıdır ve iç epitelin zaten tamamen yenilendiği ve inflamatuar infiltrasyon göstermediği belirtilmelidir. Bu çalışma, gerbillerdeki mevcut hayvan modelinin olumlu sonucunu göstermekte ve kornea yarasının iyileşmesinde yeni bir araştırma seçeneği olarak doğrulamaktadır.
Bugüne kadar, Moğol gerbil korneasının anatomisini ve histolojisini ayrıntılı olarak analiz eden hiçbir yayın yoktur. Bu nedenle, bu hayvan modelinin gelecekteki bilimsel araştırmaların temeli olacağını umuyoruz.
