מחקרים קודמים מראים כי כריתת קרטקטומיה פוטו-שבירה או PRK טרנס-אפיתליאלי, היא אחד המודלים החייתיים הטובים ביותר לחקר ריפוי הקרנית, וגם, השינויים הקשורים להיסטופתולוגיה של הקרנית האפיתל. לעבודה עם גרבילים מונגולים כמודל בעלי חיים יש מספר יתרונות על פני מכרסמים אחרים. ראשית, לקרנית יש את אותן שכבות היסטולוגיות כמו הקרנית האנושית.
שנית, העין גדולה יותר מבחינה אנטומית מהעין של מכרסמים אחרים, מה שמאפשר מניפולציה קלה יותר. כל המחקר הזה בוצע במתקנים של המרכז למחקר ופיתוח באימונולוגיה ומחלות זיהומיות של אוניברסיטת קטוליקה דה קורדובה. הצעד הראשון היה לחטא את משטח העבודה של ארון הזרימה הלמינרית.
לשם כך נעשה שימוש ב-70% אלכוהול. כלי ניתוח לשימוש. באזור העבודה הונחו חומרים חד פעמיים כמו מחטים ומזרקים, ותרופות להרדמת המכרסם.
יש למקם גם שדה כירורגי חד פעמי שיכיל הפרשות ושיער מכרסם במידת הצורך. בניסוי נעשה שימוש בשלושה גרבילים מונגולים זכרים בני שישה חודשים בעלי גודל ומשקל דומים, כ-90 גרם. ההליכים שיש לבצע מאוחר יותר בוצעו בעיניים הימניות בלבד.
הכלוב עם המכרסם נלקח ומונח בתוך ארון הזרימה הלמינרית. אנו ממשיכים לפתוח את הקופסה, לזהות כל אחד מהגרבילים ולשקול אותם על הסקאלה. הם בעלי חיים לא מזיקים אך עדינים.
יש ללבוש כפפות חד פעמיות בכל עת. לצורך טיפול נכון, על המפעיל להשתמש בידו הלא מיומנת כדי להחזיק אותה בחוזקה בזנב, וביד מיומנת, ללחוץ בעדינות למטה עם אגודל ואצבע מורה מאחורי האוזניים כדי להחזיק את החיה ועם האצבע הקטנה, להחזיק את הזנב. בהתבסס על משקל החיה, מחושבת כמות ההרדמה הדרושה לכל אחד מהגרבילים.
מזרק של מיליליטר אחד צריך להיות מלא בקטמין, 50 מעל 100 מיליגרם לקילוגרם, וקסילזין, שני מיליגרם לקילוגרם. לפני ביצוע טומוגרפיה קוהרנטית אופטית, וילונות כירורגיים סטריליים הוצבו כדי להגן על הציוד מפני הפרשות או שיער בעלי חיים. בזמן שאחד המפעילים מחזיק את החיה, מפעיל אחר חייב לקחת את הלכידות.
העין צולמה באופן מיקרוסקופי ופרוסות מרובות נעשו מהחלק הפנימי של המכרסם. ניתן לראות את הקרנית כולה, החדר הקדמי, הקשתית, הזווית האירידוקורנית והעדשה, הבולטת לתוך החדר הקדמי. בנוסף, נלקחו מדידות עובי קרנית מרכזיות והיקפיות שהראו כי עובי מרכזי של 160 מיקרומטר יורד לכ-110 מיקרומטר בפריפריה.
לפני ביצוע לייזר excimer PTK, וילונות כירורגיים סטריליים הוצבו כדי להגן על הציוד מפני הפרשות או שיער בעלי חיים. בין 60 ל-62 מיקרומטר של עובי הקרנית הוחרבו בקוטר של שלושה מילימטרים. הקרנית צולמה כדי להעריך שינויים מורפולוגיים מיידיים.
בתצלום זה ניתן לראות, את גלגל העין של עין ימין גרביל. A, משטח לא סדיר של גלגל העין הרגיל הוא ציין. B, תמונה שצולמה חמש דקות לאחר ביצוע PTK מראה כי פני הקרנית מציגים אי סדרים.
ראה עדות לכיב הקרנית המוכתם בפלואורסצין. ב- OCT, החץ הימני מסמן את האזור שבו הצטבר דטריטוס במרכז והחץ השמאלי מסמן את קצה כיב הקרנית. שיטת ההקרבה ששימשה בניסוי זה הייתה באמצעות שימוש בתא פחמן דו חמצני.
הם הוקרבו במרווחי זמן שונים ואנוקליזציה של גלגל העין הרגיל וגלגלי העיניים שלאחר הניתוח בוצעו ב 24 ו 96 שעות לאחר הניתוח כדי לבחון ריפוי הקרנית. כל גלגל עיניים מרוכז הונח בפורמלדהיד ועובד על ידי פתולוג. מספר קטעים, מדידות ותצלומים צולמו.
מבחינה היסטולוגית, עובי הקרנית מורכב מזה המתקבל על ידי OCT, ויש דילול מתקדם לכיוון הפריפריה. הסיבה לכך היא ששכבות האפיתל והסיבים הסטרומליים יורדות בפריפריה. לקרנית הגרביל המונגולית יש את אותן שכבות כמו לאפיתל הקדמי האנושי, מרובד, עם ארבע עד שש שכבות של תאים המייצגות 28% מהעובי הכולל של הקרנית.
שכבת באומן, סטרומה המייצגת 66% מהעובי הכולל. זה מלט קרום אנדותל. ב 24 שעות לאחר הניתוח, כיב הקרנית ניתן לראות היכן החץ מסומן.
כמו כן נצפו כתמים מרובים של אפיתל achantholysis ו dyskeratocis מבודד, דלקת תת-אפיתל חריפה חדירה, בצקת ברמה stromal. השינויים שנצפו בגרביל המופעל בשעה 96 שעות לאחר PTK הם, נוכחות של בצקת מוגברת, פירוק של סיבים סטרומליים ותאים, ויש לציין כי האפיתל הפנימי כבר התחדש לחלוטין ולא הציג חדירה דלקתית. המחקר הנוכחי מראה את התוצאה החיובית של מודל בעלי החיים הנוכחי בגרבילים ומאשר אותו כאפשרות מחקרית חדשה בריפוי פצעים בקרנית.
עד כה, אין פרסומים המנתחים בפירוט את האנטומיה וההיסטולוגיה של קרנית הגרביל המונגולית. לכן, אנו מקווים שמודל בעלי חיים זה יהיה הבסיס למחקרים מדעיים עתידיים.
