يوضح بروتوكولنا كيفية صيانة جهاز LFPI بشكل صحيح. يسلط الضوء على أهمية التنظيف والمراقبة الروتينية لتجنب خلل في الجهاز في الإصابات غير المتسقة. لذا فإن LFPI هو نموذج إصابة يستخدم لتقييم إصابات الدماغ الرضية في الجسم الحي.
إنه يستنسخ عن كثب الأمراض المرتبطة بإصابات الدماغ الرضية البشرية ، مما يجعلها واحدة من أكثر الطرق المحددة جيدا لإصابات الدماغ الرضية التجريبية. بالنظر إلى أن LFPI يستخدم لإعادة إنتاج أعراض TBI البشرية ، فإنه يسمح لنا بإعداد تجارب تحقق في جوانب مختلفة من إصابات الدماغ المؤلمة على أمل العثور على تدابير علاجية. يصعب إزالة فقاعات الهواء في منفذ التعبئة أو محول الطاقة بشكل خاص بسبب الرؤية المحدودة في تلك المناطق.
عند ملء هذه المناطق ، كن صبورا وبطيئا وحريصا على عدم إدخال الهواء. للبدء ، افصل بعناية المحاقن المتصلة بمبيت محول الطاقة ومنفذ التعبئة والكابل المتصل بمحول الضغط. قم بفك مقابض اليد الموجودة في الجزء الخلفي من الجهاز من مشابك الأسطوانة لتحرير الأسطوانة.
قم بإزالة المكبس الموجود في نهاية الأسطوانة ، ومحول الطاقة ، ومبيت محول الطاقة ، وحلقات O المكبس. صفي السوائل من الأسطوانة ، وأضيفي منظفا معتدلا مثل منظف غسل الأطباق إلى الأسطوانة ، وافركيها برفق باستخدام فرشاة الأطباق أو الزجاجات. لضمان شطف كل المنظف تماما ، املأ الأسطوانة بالماء واشطفها جيدا.
ضع طبقة رقيقة من الفازلين على مكبس المكبس وأرفق مكبس المكبس بمكبس بارز حوالي 32 ملم من الأسطوانة. ضع طبقة رقيقة من الفازلين على الحلقات O الأخرى أيضا وقم بتوصيلها بالأسطوانة باستثناء الحلقة O الموجودة في منفذ التعبئة. لف شريط تفلون مرتين حول خيوط المحول.
قم بتوصيل حقنة سعة 10 ملليلتر مملوءة بسائل منزوع الغازات وخالية من فقاعات الهواء بمحور قفل Luer الموجود على مبيت محول الطاقة. أمسك محول الطاقة مع توجيه الطرف الملولب لأعلى واملأ البئر بالكامل داخل المنطقة الملولبة لمحول الطاقة بالسائل المفرغ. الهدف هنا هو ملء محول الطاقة جيدا دون إدخال أي فقاعات هواء.
احرص على عدم إتلاف الغشاء الرقيق في قاع البئر. مع وضع الأسطوانة بزاوية لمنع الهواء من الدخول مرة أخرى إلى غلاف محول الطاقة ، قم بتوصيل مبيت محول الطاقة بالأسطوانة واستخدم مفتاح ربط لتشديده بإحكام. قم بإزالة الغطاء من منفذ التعبئة والأسطوانة بمجرد وصول السائل الذي تم تفريغه إلى ما يقرب من ثلثي سعة الأسطوانة.
ضع الأسطوانة أفقيا وانتهي من ملء الأسطوانة بسائل منزوع الغاز. استبدل الغطاء في منفذ التعبئة وأغلق جميع المحبس. تعامل مع الأسطوانة لتشغيل أي فقاعات هواء في منفذ التعبئة.
افتح المحبس الموجود على منفذ التعبئة وقم بحقن السوائل باستخدام المحقنة الموجودة على غلاف محول الطاقة لإجبار أي فقاعات هواء على الخروج من المنفذ. افحص الجهاز بالكامل وتأكد من عدم وجود فقاعات هواء. أضف حقنة سعة 10 ملليلتر مملوءة بسائل منزوع الغازات إلى محور قفل Luer على غطاء التعبئة وأعد توصيل الأسطوانة بالقاعدة باستخدام البراغي اليدوية.
تأكد من أن الأسطوانة أفقية ومصطفة مع مركز المطرقة المرجحة على البندول. تظهر صورة شكل موجة الضغط الناتج عن جهاز LFPI الذي تم تنظيفه وتشغيله بشكل صحيح في هذا الشكل. عند إجراء إصابة أو اختبار جهاز LFPI ، يجب أن يظهر شكل موجة الضغط ذروة حادة واحدة.
سيؤدي وجود فقاعات الهواء في الجهاز إلى شكل موجي بعدة قمم قصيرة. تظهر هنا مخرجات راسم الذبذبات لغير الملوثة، و5 ملليلتر من حقن الهواء، و10 ملليلتر من حقن الهواء، و15 ملليلتر من حقن الهواء. تقلل التقنيات الموضحة في هذا الفيديو من احتمالية إدخال الغازات إلى الجهاز وتساعد في إزالة أي جيوب صغيرة من الغاز قد تلوث السائل.
لذلك ، تعد إزالة فقاعات الهواء أهم خطوة يجب تذكرها عند استخدام جهاز LFPI. لذلك بعد هذا الإجراء ، يكون مختبرنا قادرا على إحداث إصابات في الفئران واستخدام شرائح الدماغ الحية من أجل تسجيل النشاط العصبي. يمكنك بالفعل العثور على أحد مقاطع الفيديو الخاصة بنا على هذا على موقع JoVE الإلكتروني.
لقد غير هذا الجهاز قواعد اللعبة في عالم TBI. إنها حاليا الطريقة الأكثر استخداما للحث على الإصابة في النماذج الحيوانية وقد مهدت الطريق لإيجاد علاجات أفضل لإصابات الدماغ الرضية البشرية.
