تصوير ATG9A ، وهو بروتين غشائي متعدد الامتدادات

في مختبرنا ، نحن مهتمون بفهم الدهون وآلات البروتين التي تشارك في الاتجار بحويصلة ATG9A. ATG9A أمر بالغ الأهمية في مسار الالتهام الذاتي لتشكيل البلعمة والنضج. ومع ذلك، فقد درسنا مؤخرا تأثير ATG9A في الاتزان الداخلي للعضيات.

التحدي الأكبر هو الكشف عن التفاصيل الجزيئية لكيفية عمل البروتينات وآلات البروتين. توفر تقنيات مثل هندسة البروتين ، القائمة على AlphaFold و cryo-EM عالي الدقة في الموقع ، حاليا أكبر قدر من التقدم. لقد أسس عمل مختبري نظرة ثاقبة أساسية حول كيفية تكوين البلعمة الذاتية.

تم دعم هذه الأفكار من خلال تقنيات بيولوجيا الخلية الجزيئية المتقدمة مثل تلك الموصوفة هنا. نصف بعض عيوب استخدام علامات بروتين معينة وكيف يمكن أن يتغير سلوك ATG9A اعتمادا على توطين العلامة. لذلك ، إما N أو C-terminus.

نقترح أيضا طرقا لاكتشاف هذه العيوب وكيفية تجنبها. إلى جانب ذلك ، نقدم أيضا سير عمل لقياس تشتت ATG9A بطريقة قابلة للتكرار. هنا ، نقدم سير عمل من التألق المناعي والتصوير الحي إلى الحصول على الصور وتحليلها لتحليل تشتت ATG9 بين المقصورات الخلوية المختلفة.

ونعتقد أن توحيد خطوط الأنابيب لتحليل الصور هو أولوية لعلماء الأحياء الخلوية ليكونوا قادرين على زيادة موثوقية نتائجنا وإمكانية استنساخها.