啮齿动物下腔静脉成形术球囊模型

摘要

该方案提出了一个存活啮齿动物模型，用于测试静脉成形球囊 （VB） 干预在非血栓形成、血栓形成和血栓形成后深静脉中的应用。

摘要

球囊静脉成形术是一种常用的临床技术，用于治疗因外伤、先天性解剖异常、急性深静脉血栓形成 （DVT） 或支架置入术而导致的深静脉狭窄和闭塞。慢性深静脉阻塞的组织病理学特征为血栓形成、纤维化或两者兼而有之。目前，没有针对这些病理过程的直接治疗方法。因此，需要一个可靠的 体内 动物模型来测试新的干预措施。啮齿动物存活下腔静脉 （IVC） 静脉成形术球囊模型 （VBM） 允许在多个时间点研究非血栓形成和血栓形成后条件下的球囊静脉成形术。涂层和非涂层静脉成形术球囊的局部和全身效应可以通过组织、血栓和血液测定进行量化，例如实时聚合酶链反应 （RT-PCR）、蛋白质印迹、酶联免疫吸附测定 （ELISA）、酶谱、静脉壁和血栓细胞分析、全血和血浆测定以及组织学分析。VBM 是可重复的，可复制手术人工干预，可以识别局部静脉壁血栓蛋白变化，并允许对同一样品进行多次分析，从而减少每组所需的动物数量。

引言

未解决的血栓引起的深静脉阻塞是深静脉血栓形成 （DVT） 的常见后果，是血栓形成后综合征 （PTS） 的原因之一，花费数十亿美元的医疗保健费用并显着影响生活质量 ^1,2,3。PTS 是一种独特的炎症病理学，随之而来的静脉壁纤维化⁴ 在小动物 DVT 模型中未完全捕获 ^5,6,7，更重要的是，以前的模型无法评估对治疗干预的反应。血栓性静脉阻塞通常通过支架置入术和球囊静脉成形术来治疗 ^8,9;由于再狭窄和闭塞，这种干预受到高再干预率的阻碍 10,11,12。

尽管有药物涂层球囊可以解决动脉特异性狭窄/闭塞，但不存在用于深静脉的球囊。静脉再狭窄背后的分子机制知之甚少....

研究方案

以下协议遵循密歇根大学 （UMICH） 机构动物护理和使用委员会 （IACUC） 政策和指南、美国政府用于测试、研究和培训的脊椎动物利用和护理原则以及 ARRIVE 指南 2.0。UMICH 动物福利保证协议符合 OLAW 和 USDA，并获得了 AAALAC International 的全面认可。该实验方案的 ID 号为 PRO00010841。使用来自 Charles River Laboratories 的雄性远交 Sprague Dawley 大鼠，体重 450 克，年龄为 15 周龄。

1. 大鼠麻醉

1. 将动物从笼子中取出，以 5% 异氟烷和 100% 氧气以 0.8 至 1 L/min（蒸发器控制）的流速将它们放入麻醉术前诱导气室中，以诱导全身麻醉。
2. 在麻醉诱导室中镇静大鼠，将其从腔室中取出，称重，用无菌眼药膏润滑它们的眼睛，然后将它们背卧在温水循环加热装置上。使用踏板反射（用力捏住脚趾）确认足够的麻醉深度。
3. 用电动剪刀剃掉腹侧腹部。以 2.5% 异氟醚和 100% 氧气以 0.8 至 1 L/min 的速度维持全身麻醉，并通过鼻锥进行非再呼吸回路。

2. 大鼠超声扫描

1. 在成像过程中监测生理评估，包括呼吸频率、心率和体温。
2. 对于下腔....

讨论

可以使用 2.5-3.5 mm 范围内的球囊对 250 g ≥大鼠进行 VBM。对于超过 750 g 的大鼠，该技术受到腹腔中脂肪组织数量和器官大小的限制，而不是 IVC 直径的变化。根据我们的经验，我们发现每组需要 10 只或更多动物才能获得组间的统计学显着性，以进行静脉壁蛋白分析或活性测定和组织学。手术干预期间的定期温度控制和呼吸频率监测对于保证手术成功以及勤奋的术后管理非常重要。

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-0 DemeCRYL	DemeTech	G183019F4P	12 per box
5-0 DemeCRYL	DemeTech	G285017B0P	12 per box
7-0 DemeLENE	DemeTech	PM197011F13M	12 per box
8-0 DemeLON	DemeTech	NL868007C7P	12 per box
Angled Clip Applier	SCANLAN	3795-01A	7-1/4″ (18.5 cm)
Baxter 0.9% Sodium Chloride Irrigation Bottle	Baxter	SKU: 195-7124	1000mL Bottle
Bovie Cautery Low Temperature Fine Tip	Symmetry Surgical Inc	AA00	10/bx
Buprenorphine	Fidelis Animal Health	SKU- 099114	1.3mg/mL, 3mL
CD (Sprague Dawley) Rats	Charles River	Strain Code 001	Male, 400 gm
Clip-It Traceable Timer	TRACEABLE PRODUCTS	Cat. No. 5046
Cotton-Tip Applicator 3"	Dukal Corporation	922-00037BX100	1000/BOX
Enzymatic Surgical Instrument Detergent and Presoak	Medline	MDS88000B9	1 Gal
Eye Lube	Optixcare	SKU-065441	20gm
Gaymar T/Pump Stryker Localized Warming/Cooling Therapy System	Stryker	TP700
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-20	Straight
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-28	Curved
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-14	Straight
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-18	Curved
Inflation device	Merit Medical	IN4130	BasixCOMPAK with Analog Display
Isoflurane	MFR VETONE	SKU-501017	100mL, Liquid for Inhalation
Microsurgery kit containing tweezers and forceps	Customized
Oxygen, E-tank	Medline	MDM1630
Sharpened Guidewire	Customized
Sterile Glad Press-n-Seal	Glad	SKU # PSS-140	ETO Exposed
Sterile Nonwoven Gauze Sponges 2s 4ply 4x4	Medline	SKU PRM21444H	100Ct
Surgical microscope	Zeiss	S100 / OPMI pico
Surgical Scrub & Handwash	Vetoquinol	NDC: 17030-003-16	16 oz
Ultrasound Gel	Medline	CTR001305	8.5 oz, 12/CS
Ultrasound system	Siemens	ACUSON Antares	3-D, Color, Continuous wave (CW), Pulsed wave (PW), Power CW/CW Spectral
Venoplasty Balloon	Customized