설치류 하부 정맥 Cava 정맥 성형술 풍선 모델

요약

이 프로토콜은 비혈전성, 혈전성 및 혈전 후 심부 정맥에서 정맥 성형 풍선(VB) 중재를 테스트하기 위한 생존 설치류 모델을 제시합니다.

초록

풍선 정맥 성형술은 외상, 선천성 해부학적 이상, 급성 심부 정맥 혈전증(DVT) 또는 스텐트 시술의 결과로 심부 정맥 협착 및 폐색을 치료하는 데 일반적으로 사용되는 임상 기술입니다. 만성 심부 정맥 폐쇄는 조직 병리학적으로 혈전증, 섬유증 또는 둘 다를 특징으로 합니다. 현재로서는 이러한 병리학적 과정을 표적으로 삼을 수 있는 직접적인 치료법은 없습니다. 따라서 새로운 중재를 테스트하기 위한 신뢰할 수 있는 in vivo 동물 모델이 필요합니다. 설치류 생존 하대정맥(IVC) 정맥 성형 풍선 모델(VBM)을 사용하면 여러 시점에 걸쳐 비혈전성 및 혈전 후 조건에서 풍선 정맥 성형술을 연구할 수 있습니다. 코팅된 정맥 성형술 풍선과 코팅되지 않은 정맥 성형술 풍선의 국소 및 전신 효과는 실시간 중합효소 연쇄 반응(RT-PCR), 웨스턴 블롯, 효소 결합 면역 흡착 분석(ELISA), 자이모그래피, 정맥벽 및 혈전 세포 분석, 전혈 및 혈장 분석, 조직학적 분석과 같은 조직, 혈전 및 혈액 분석을 통해 정량화할 수 있습니다. VBM은 재현성이 있고, 인간의 외과적 개입을 복제하며, 국소 정맥벽 혈전 단백질 변화를 식별할 수 있고, 동일한 샘플에서 여러 분석을 수행할 수 있어 그룹당 필요한 동물 수를 줄일 수 있습니다.

서문

해결되지 않은 혈전으로 인한 심부 정맥 폐색은 심부 정맥 혈전증(DVT)의 흔한 결과이며 혈전 후 증후군(PTS)의 원인 중 하나이며 수십억 달러의 의료 비용이 발생하고 삶의 질에 상당한 영향을 미칩니다 ^1,2,3. PTS는 소동물 DVT 모델 ^5,6,7에서 완전히^{포착되지 않은} 결과적인 정맥벽 섬유증4을 동반하는 독특한 염증성 병리학이며, 더 중요한 것은 이전 모델에서는 치료적 개입에 대한 반응을 평가할 수 없다는 것이다. 혈전성 정맥 폐색은 종종 스텐트 삽입술과 풍선 정맥 성형술로 치료한다 ^8,9; 이러한 중재는 재협착 및 폐색으로 인한 높은 재중재율로 인해 방해를 받는다^10,11,12

프로토콜

다음 프로토콜은 University of Michigan (UMICH) Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) 정책 및 지침, 테스트, 연구 및 교육에 사용되는 척추 동물의 활용 및 관리에 대한 미국 정부 원칙 및 ARRIVE 지침 2.0을 따릅니다. UMICH 동물 복지 보증 계약은 OLAW 및 USDA를 준수하며 AAALAC International의 완전한 인증을 받았습니다. 이 프로토콜은 ID 번호 PRO00010841로 승인되었습니다. 찰스 리버 연구소(Charles River Laboratories)의 수컷 외래종 스프라그 돌리(Sprague Dawley) 쥐를 사용했는데, 체중은 450g이고 생후 15주령이었다.

1. 쥐 마취

1. 동물을 케이지에서 꺼내 5% 이소플루란과 100% 산소로 0.8-1L/min(기화기 제어)의 유속으로 마취 수술 전 유도 가스실에 넣어 전신 마취를 유도합니다.
2. 마취 유도 챔버에서 쥐를 진정시키고 챔버에서 제거하고 무게를 측정하고 멸균 안과 연고로 눈을 윤활한 다음 따뜻한 물 순환 가열 장치에 등쪽 누운 곳에 놓습니다. 페달 반사(확고한 발가락 꼬집기)를 사용하여 적절한 마취 깊이를 확인합....

토론

VBM은 2.5-3.5mm 범위의 풍선을 사용하여 250g ≥ 쥐에 대해 수행할 수 있습니다. 750g을 초과하는 쥐의 경우, IVC 직경의 변화보다는 복강 내 지방 조직과 장기 크기의 양이 더 많아 이 기술이 제한됩니다. 우리의 경험에 비추어 볼 때, 정맥벽 단백질 분석 또는 활성 분석 및 조직학을 위해 그룹 간의 통계적 유의성을 얻기 위해 그룹당 10마리 이상의 동물이 필요하다는 것을 발견했습니다. 수술 중 주기적?.......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-0 DemeCRYL	DemeTech	G183019F4P	12 per box
5-0 DemeCRYL	DemeTech	G285017B0P	12 per box
7-0 DemeLENE	DemeTech	PM197011F13M	12 per box
8-0 DemeLON	DemeTech	NL868007C7P	12 per box
Angled Clip Applier	SCANLAN	3795-01A	7-1/4″ (18.5 cm)
Baxter 0.9% Sodium Chloride Irrigation Bottle	Baxter	SKU: 195-7124	1000mL Bottle
Bovie Cautery Low Temperature Fine Tip	Symmetry Surgical Inc	AA00	10/bx
Buprenorphine	Fidelis Animal Health	SKU- 099114	1.3mg/mL, 3mL
CD (Sprague Dawley) Rats	Charles River	Strain Code 001	Male, 400 gm
Clip-It Traceable Timer	TRACEABLE PRODUCTS	Cat. No. 5046
Cotton-Tip Applicator 3"	Dukal Corporation	922-00037BX100	1000/BOX
Enzymatic Surgical Instrument Detergent and Presoak	Medline	MDS88000B9	1 Gal
Eye Lube	Optixcare	SKU-065441	20gm
Gaymar T/Pump Stryker Localized Warming/Cooling Therapy System	Stryker	TP700
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-20	Straight
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-28	Curved
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-14	Straight
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-18	Curved
Inflation device	Merit Medical	IN4130	BasixCOMPAK with Analog Display
Isoflurane	MFR VETONE	SKU-501017	100mL, Liquid for Inhalation
Microsurgery kit containing tweezers and forceps	Customized
Oxygen, E-tank	Medline	MDM1630
Sharpened Guidewire	Customized
Sterile Glad Press-n-Seal	Glad	SKU # PSS-140	ETO Exposed
Sterile Nonwoven Gauze Sponges 2s 4ply 4x4	Medline	SKU PRM21444H	100Ct
Surgical microscope	Zeiss	S100 / OPMI pico
Surgical Scrub & Handwash	Vetoquinol	NDC: 17030-003-16	16 oz
Ultrasound Gel	Medline	CTR001305	8.5 oz, 12/CS
Ultrasound system	Siemens	ACUSON Antares	3-D, Color, Continuous wave (CW), Pulsed wave (PW), Power CW/CW Spectral
Venoplasty Balloon	Customized