Modelo de globo de vena cava inferior de roedores

Resumen

El protocolo presenta un modelo de supervivencia en roedores para probar intervenciones con balón de venoplastia (VB) en venas profundas no trombóticas, trombóticas y postrombóticas.

Resumen

La venoplastia con balón es una técnica clínica comúnmente utilizada para tratar la estenosis venosa profunda y la oclusión como consecuencia de un traumatismo, anomalías anatómicas congénitas, trombosis venosa profunda aguda (TVP) o colocación de stents. La obstrucción venosa profunda crónica se caracteriza histopatológicamente por trombosis, fibrosis o ambas. En la actualidad, no existe un tratamiento directo que se dirija a estos procesos patológicos. Por lo tanto, es necesario un modelo animal in vivo fiable para probar nuevas intervenciones. El modelo de balón de venoplastia (VBM) de venoplastia de supervivencia en roedores permite el estudio de la venoplastia con balón en condiciones no trombóticas y postrombóticas en múltiples puntos temporales. El efecto local y sistémico de los balones de venoplastia recubiertos y no recubiertos se puede cuantificar mediante ensayos de tejidos, trombos y sangre, como la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR), Western blot, ensayo de inmunoadsorción enzimática (ELISA), zimografía, análisis de la pared de las venas y de las células de los trombos, ensayos de sangre total y plasma, y análisis histológico. El VBM es reproducible, replica las intervenciones quirúrgicas humanas, puede identificar cambios locales en las proteínas de los trombos de la pared venosa y permite múltiples análisis a partir de la misma muestra, disminuyendo el número de animales necesarios por grupo.

Introducción

Las obstrucciones venosas profundas por trombos no resueltos son una consecuencia común de la trombosis venosa profunda (TVP) y son una de las causas del síndrome postrombótico (SPT), que cuesta miles de millones de dólares en atención médica e impacta significativamente en la calidad de vida ^1,2,3. El SPT es una patología inflamatoria única con la consiguiente fibrosis de la pared venosa⁴ que no se capta completamente en modelos de TVP en animales pequeños ^5,6,7 y, lo que es más imp....

Protocolo

El siguiente protocolo sigue las políticas y pautas del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Michigan (UMICH), los Principios del Gobierno de los EE. UU. para la Utilización y el Cuidado de Animales Vertebrados Utilizados en Pruebas, Investigación y Capacitación, y las pautas ARRIVE 2.0. El acuerdo de Aseguramiento de Bienestar Animal de UMICH cumple con OLAW y USDA y está totalmente acreditado por AAALAC International. Este protocolo fue aprobado con el número de identificación PRO00010841. Se utilizaron ratas macho Sprague Dawley de Charles River Laboratories, de 450 g de peso y 15 semanas de edad.

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Discusión

El VBM se puede realizar en ratas ≥ 250 g utilizando globos en el rango de 2,5-3,5 mm. Para las ratas que superan los 750 g, la técnica está limitada por una mayor cantidad de tejido adiposo en la cavidad abdominal y el tamaño del órgano, en lugar de cambios en el diámetro de la VCI. A partir de nuestra experiencia, hemos encontrado que se necesitan 10 o más animales por grupo para obtener significación estadística entre los grupos para el análisis de proteínas de la pared venosa o ensayos de actividad e hist.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-0 DemeCRYL	DemeTech	G183019F4P	12 per box
5-0 DemeCRYL	DemeTech	G285017B0P	12 per box
7-0 DemeLENE	DemeTech	PM197011F13M	12 per box
8-0 DemeLON	DemeTech	NL868007C7P	12 per box
Angled Clip Applier	SCANLAN	3795-01A	7-1/4″ (18.5 cm)
Baxter 0.9% Sodium Chloride Irrigation Bottle	Baxter	SKU: 195-7124	1000mL Bottle
Bovie Cautery Low Temperature Fine Tip	Symmetry Surgical Inc	AA00	10/bx
Buprenorphine	Fidelis Animal Health	SKU- 099114	1.3mg/mL, 3mL
CD (Sprague Dawley) Rats	Charles River	Strain Code 001	Male, 400 gm
Clip-It Traceable Timer	TRACEABLE PRODUCTS	Cat. No. 5046
Cotton-Tip Applicator 3"	Dukal Corporation	922-00037BX100	1000/BOX
Enzymatic Surgical Instrument Detergent and Presoak	Medline	MDS88000B9	1 Gal
Eye Lube	Optixcare	SKU-065441	20gm
Gaymar T/Pump Stryker Localized Warming/Cooling Therapy System	Stryker	TP700
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-20	Straight
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-28	Curved
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-14	Straight
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-18	Curved
Inflation device	Merit Medical	IN4130	BasixCOMPAK with Analog Display
Isoflurane	MFR VETONE	SKU-501017	100mL, Liquid for Inhalation
Microsurgery kit containing tweezers and forceps	Customized
Oxygen, E-tank	Medline	MDM1630
Sharpened Guidewire	Customized
Sterile Glad Press-n-Seal	Glad	SKU # PSS-140	ETO Exposed
Sterile Nonwoven Gauze Sponges 2s 4ply 4x4	Medline	SKU PRM21444H	100Ct
Surgical microscope	Zeiss	S100 / OPMI pico
Surgical Scrub & Handwash	Vetoquinol	NDC: 17030-003-16	16 oz
Ultrasound Gel	Medline	CTR001305	8.5 oz, 12/CS
Ultrasound system	Siemens	ACUSON Antares	3-D, Color, Continuous wave (CW), Pulsed wave (PW), Power CW/CW Spectral
Venoplasty Balloon	Customized