げっ歯類の下大静脈静脈形成術バルーンモデル

要約

このプロトコルは、非血栓性、血栓性、および血栓性後の深部静脈における静脈形成バルーン (VB) 介入をテストするための生存げっ歯類モデルを提示します。

要約

バルーン静脈形成術は、外傷、先天性解剖学的異常、急性深部静脈血栓症(DVT)、またはステント留置術の結果としての深部静脈狭窄症および閉塞を治療するために一般的に使用される臨床技術です。慢性深部静脈閉塞は、組織病理学的に血栓症、線維症、またはその両方によって特徴付けられます。現在、これらの病理学的プロセスを標的とする直接的な治療法はありません。したがって、新しい介入をテストするための信頼性の高い in vivo 動物モデルが必要です。げっ歯類生存率下大静脈 (IVC) 静脈形成術バルーン モデル (VBM) は、複数の時点にわたる非血栓性および血栓後の状態におけるバルーン静脈形成術の研究を可能にします。コーティングされた静脈形成術およびコーティングされていない静脈形成術バルーンの局所的および全身的な影響は、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)、ウェスタンブロット、酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)、ザイモグラフィー、静脈壁および血栓細胞分析、全血および血漿アッセイ、組織学的分析などの組織、血栓、および血液アッセイによって定量化できます。VBMは再現性があり、外科的なヒト介入を再現し、局所静脈壁血栓タンパク質の変化を特定でき、同じサンプルからの複数の分析を可能にするため、グループごとに必要な動物の数が減少します。

概要

未解決の血栓による深部静脈閉塞は、深部静脈血栓症(DVT)の一般的な結果であり、血栓後症候群(PTS)の原因の1つであり、医療に数十億ドルの費用がかかり、生活の質に大きな影響を与えています^1,2,3。PTSは、小動物のDVTモデル^5,6,7では完全に捕捉されていない結果として生じる静脈壁線維症⁴を伴う独特の炎症性病理であり、さらに重要なことに、以前のモデルは治療介入に対する反応を評価できません。血栓性静脈閉塞は、ステント留置術やバルーン静脈形成術によって治療されることがよくあります^8,9;このような介入は、再狭窄と閉塞による高い再介入率によって妨げられます 10,11,12。

プロトコル

次のプロトコルは、ミシガン大学(UMICH)の施設内動物管理および使用委員会(IACUC)のポリシーとガイドライン、試験、研究、および訓練で使用される脊椎動物の利用とケアに関する米国政府の原則、およびARRIVEガイドライン2.0に従います。UMICH動物福祉保証契約は、OLALおよびUSDAに準拠しており、AAALACインターナショナルによって完全に認定されています。このプロトコルは、ID番号PRO00010841で承認されました。Charles River Laboratoriesの雄の近交系スプレイグ・ドーリーラット(体重450g、生後15週齢)を用いた。

1.ラット麻酔

1. 動物をケージから取り出し、5%イソフルランと100%酸素の麻酔術前導入ガスチャンバーに0.8〜1 L / minの流量(気化器制御)で入れ、全身麻酔を誘発します。
2. 麻酔導入チャンバーでラットを鎮静させ、チャンバーから取り出し、体重を量り、滅菌眼軟膏で眼を滑らかにしてから、温水循環加熱装置で背側横臥に置きます。ペダル反射(つま先をしっかりとつまむ)を使用して、麻酔の適切な深さを確認します。
3. 電動バリカンで腹側腹部を剃ります。全身麻酔を2.5%イソフルランと100%酸素で0.8〜1 L / minで維持し、ノーズコーンを介した非再呼吸回路を使用します。.

ディスカッション

VBMは、2.5〜3.5mmの範囲のバルーンを使用して、250g≥ラットに対して実行できます。750 gを超えるラットの場合、この技術は、IVC直径の変化ではなく、腹腔内の脂肪組織の量と臓器のサイズが多いことによって制限されます。私たちの経験から、静脈壁タンパク質分析または活性アッセイと組織学のためにグループ間の統計的有意性を得るためには、グループごとに10匹以上の動物が必要である.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-0 DemeCRYL	DemeTech	G183019F4P	12 per box
5-0 DemeCRYL	DemeTech	G285017B0P	12 per box
7-0 DemeLENE	DemeTech	PM197011F13M	12 per box
8-0 DemeLON	DemeTech	NL868007C7P	12 per box
Angled Clip Applier	SCANLAN	3795-01A	7-1/4″ (18.5 cm)
Baxter 0.9% Sodium Chloride Irrigation Bottle	Baxter	SKU: 195-7124	1000mL Bottle
Bovie Cautery Low Temperature Fine Tip	Symmetry Surgical Inc	AA00	10/bx
Buprenorphine	Fidelis Animal Health	SKU- 099114	1.3mg/mL, 3mL
CD (Sprague Dawley) Rats	Charles River	Strain Code 001	Male, 400 gm
Clip-It Traceable Timer	TRACEABLE PRODUCTS	Cat. No. 5046
Cotton-Tip Applicator 3"	Dukal Corporation	922-00037BX100	1000/BOX
Enzymatic Surgical Instrument Detergent and Presoak	Medline	MDS88000B9	1 Gal
Eye Lube	Optixcare	SKU-065441	20gm
Gaymar T/Pump Stryker Localized Warming/Cooling Therapy System	Stryker	TP700
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-20	Straight
Heifetz Microclips 12mmx2.25mm	SCANLAN	3795-28	Curved
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-14	Straight
Heifetz Microclips 8mmx1.75mm	SCANLAN	3795-18	Curved
Inflation device	Merit Medical	IN4130	BasixCOMPAK with Analog Display
Isoflurane	MFR VETONE	SKU-501017	100mL, Liquid for Inhalation
Microsurgery kit containing tweezers and forceps	Customized
Oxygen, E-tank	Medline	MDM1630
Sharpened Guidewire	Customized
Sterile Glad Press-n-Seal	Glad	SKU # PSS-140	ETO Exposed
Sterile Nonwoven Gauze Sponges 2s 4ply 4x4	Medline	SKU PRM21444H	100Ct
Surgical microscope	Zeiss	S100 / OPMI pico
Surgical Scrub & Handwash	Vetoquinol	NDC: 17030-003-16	16 oz
Ultrasound Gel	Medline	CTR001305	8.5 oz, 12/CS
Ultrasound system	Siemens	ACUSON Antares	3-D, Color, Continuous wave (CW), Pulsed wave (PW), Power CW/CW Spectral
Venoplasty Balloon	Customized