单壁碳纳米管 (sscnt) (mallat1 反义寡 3号) 抑制多骨髓瘤细胞在体内的生长

我们在这里使用的方法可以帮助将寡核苷酸与单壁碳纳米管进行包装，这是一种用于药物输送的纳米粒子。这种技术的主要优点是更有效地将寡核苷酸药物输送到体内的细胞中。这项技术的影响延伸到研究多发性骨髓瘤，因为它引入了纳米粒子，以改善寡核苷酸药物的输送。

通过这种方法可以提供多发性骨髓瘤的治疗洞察。它也可以应用于其他疾病，并与其他货物结合，如蛋白质和小分子。首先，将一毫克单壁碳纳米管、5毫克DSPE-PEG 2000胺和5毫升灭菌无核糖水混合在20毫升玻璃闪烁小瓶中。

在室温下，在90瓦的功率水平上将小瓶在水浴声波器中声波化一小时。声波化后，将小瓶以24，000倍g离心6小时。然后收集上一点溶液。

将单壁碳纳米管溶液的一毫升添加到 100 千吨分子量截止离心过滤装置中，然后加入 4 毫升灭菌无核素水。在室温下以4000倍g的离心10分钟，以去除多余的胺。在 450 微升胺功能化单壁碳纳米管中加入 0.5 毫克 Sulfo-LC-SPDP。

然后加入50微升10xPBS，并在室温下孵育两小时。接下来，将反应混合物加入到100千托氏分子量截止离心过滤装置中，然后加入四毫升无核酸酶水。在室温下以4000倍g离心样品10分钟，以去除多余的S sulfo-LC-SPDP。

收集过滤器中留下的 Sulfo-LC-SPDP 处理胺单壁碳纳米管溶液，然后用 500 微升以前准备的抗 MALAT1-Cy3 溶液稀释。然后在四摄氏度下孵育样品过夜。为了获得最佳的比较结果，随机将14只小鼠安排成试验组或对照组，每组7只小鼠，每组男女比例相同。

接下来，清洁操作台，用 70%乙醇消毒。使用加热灯加热其中一只小鼠，帮助尾部静脉出现。使用尾部喷射抑制器正确约束鼠标。

通过尾静脉在50微升PBS中注入MM.1S-luc/mCherry细胞。用酒精拭子按注射部位 30 秒。然后标记注射的鼠标，并返回到干净的笼子。

第七天，MM1S细胞注射后，将50微升含有单壁碳纳米管抗MALET1的PBS注射到小鼠的尾静脉中。然后用酒精拭子按注射部位 30 秒。观察尾巴上的局部出血和小鼠的一般行为一分钟，然后返回到干净的笼子。

在将笼子返回到机架之前，再次观察所有注射小鼠，以确保注射的耐受性良好。解剖前称量每只鼠标。从心脏收集外周血，由血细胞计数器机进行完整的血液计数测定。

接下来，收集骨髓、脾脏、淋巴结、肾脏和具有可见转移的组织的组织。从骨髓样本中提取RNA和蛋白质。将所有剩余的组织修复在形式素中。

固定24小时后，将骨骼样本浸入0.5摩尔EDTA溶液中5天，进行脱钙。然后将所有样品浸入75%乙醇中，进行长期储存。QRT PCR结果表明，抗 MALAT1 gapmeR DNA 在 H929 和 MM.1S 细胞中显著地击倒了 MALAT1 表达并诱导凋亡。

单壁碳纳米管抗MA拉特1-Cy3被传递到MM细胞核，显著抑制了H929和MM.1S细胞的内源性MA拉特1水平。BMEC-1细胞在治疗单壁碳纳米管抗MA拉特1-Cy3或不同剂量和时间点控制后，其生存能力无显著差异。这表明单壁碳纳米管抗MA拉特1-Cy3的毒性在高剂量下对正常细胞具有有限且可接受的毒性。

建立了人类MM传播小鼠模型，以评估单壁碳纳米管抗MART1在体内的治疗效果。单壁碳纳米管抗MART1治疗组中小鼠的荧光素信号与21天治疗后对照值明显降低。从这些结果中得出结论，通过静脉注射进行单壁碳纳米管抗MAOL1治疗，可以有效地将抗MAOLT1寡糖送到肿瘤细胞。

未观察到治疗的显著副作用，表明单壁碳纳米管抗MART1注射是小鼠的安全治疗。在尝试此程序时，重要的是要记住，细胞分子组成将影响寡核苷酸药物的传递、效率和治疗效果。按照这个程序，其他方法，如蛋白质或小分子的结合，可以执行，以回答额外的问题。

比如使用单壁碳纳米管来提供其他药物。