使用化学活检进行移植质量评估

化学活检是器官移植中用于快速复杂移植质量评估的一种新型诊断解决方案。目前，没有其他低侵入性方法支持这种分析。由于SPME探针的简单性和侵入性低，该技术的主要优点是有可能在保存时间监测移植组织修饰。

探针直径小，生物相容涂层种类繁多，使该方法适用于移植器官分析，适用于肿瘤分析等医学研究。首次尝试此技术时，请注意特定步骤的细节和时间安排，因为小错误可能会严重影响结果。该协议很简单，但在可视化演示后更易于理解和执行。

首先准备一个由一对一甲醇和水组成的预置混合物。将溶液的一毫升移入每两毫升玻璃瓶中，并在每个小瓶中放置一个探针。以 1200 RPM 的涡流搅拌器搅拌小瓶一小时。

然后用 LCMS 级水冲洗探头，然后根据标准手术灭菌方案或在无菌处理部门进行灭菌。当准备提取样品时，打开无菌包装，每个时间点直接将两个探针插入肾脏皮层 10 分钟，确保整个涂层长度被组织基质覆盖。确保跟踪每个探头的采样时间。

将探针从组织中拉出，立即用 LCMS 级水冲洗涂层，以清除任何剩余的血液，确保从手术现场冲洗开去。要运输探头，请将它们放在单独的小瓶中并关闭它们。然后将小瓶放在装满干冰或液氮的盒子里。

将样品存放在负 80 摄氏度，或立即进行脱吸。准备一种由乙酰胺和水组成的解吸溶液进行甲基分析，另一种由异丙醇和甲醇组成的解吸溶液进行脂肪分析。将溶液的100微升加入两毫升标有小瓶的插入中，并在每个小瓶中放置一个探针，以1200 RPM的速度搅拌小瓶两个小时，然后从小瓶中取出探针，然后进行 LCMS 分析。

液相色谱与高分辨率质谱法相结合，用于进行无目标代谢和唇部分析。数据经过主要成分分析，以评估质量，从而了解有关结果的一般见解。质量控制样品形成了一个紧密的集群，证实了分析的质量。

研究组表现出相对良好的分离，允许可视化在移植前和移植后以及器官灌注期间代谢和唇部特征的差异。反相和液相色谱柱上分离出广泛的提取特征。在整个实验中，通过所选代谢物的盒须图演示了变化和代谢物水平。

执行此程序时，请记住器官异质性。将探头放在所需位置，使采样时间在所有时间点保持相同，并在采样后正确固定光纤。使用SPME发现的生物标志物可以使用这种提取方法与MSMS、LCMS或其他分析仪器进行量化。

此外，由于不消耗样品，可以进行常规分析，如活检。该方法可适用于其他组织代谢组学和唇部分析，无需进行样品预处理。对于特定的代谢物。

其他涂料可用于提高文章的选择性和灵敏度。