我们的方案意义重大，因为它能够高效、大规模地生产均质组织球体，这对于我们先进的组织工程、药物开发和疾病建模应用至关重要。该技术的主要优点是它能够快速且经济高效地产生大量均匀的组织球体，确保高细胞活力和组成球体质量，这对我们的各种生物医学应用至关重要通过生产患者特异性类固醇，该技术提供了一个生理学上准确的模型，能够进行精确的疾病建模，并了解分子和行为机制， 包括癌症。这种方法可以提供对癌症研究、神经退行性疾病和组织工程的见解，并可以应用于药物开发和个性化医疗，增强我们对各种生物系统的理解。
我们的视觉演示至关重要，因为它清楚地说明了复杂的步骤，例如设备插入和细胞接种，有助于防止常见错误，并确保正确的技术是一致结果的缓冲。首先将琼脂糖粉末加入 1 x PBS 中，在玻璃容器中制备 2% 琼脂糖凝胶。通过圆周运动使悬架均质化。
将玻璃容器放入微波炉中，并将时间设置为 30 秒。每 5 秒停止一次微波炉，取出玻璃瓶，然后以圆周运动手动匀浆溶液。执行加热过程，直到溶液达到液态清澈状态。
接下来，向 6 孔板的每个孔中加入 6 mL 琼脂糖溶液，等待 15 分钟或直到琼脂糖凝固。然后将 3D 打印的生物装置轻轻插入液体琼脂糖上方，等待 30 分钟或直到琼脂糖凝固。然后轻轻地从琼脂糖中取出装置并加入 2 毫升 DMEM 培养基。
等待 10 分钟，然后丢弃培养基并用新的 DMEM 替换。重复洗涤 3 次。完成后，加入 2 毫升 DMEM，并将用于细胞接种的六孔板置于 37 摄氏度的 5% 二氧化碳和 80% 湿度的培养箱中。
在细胞培养瓶中培养小鼠成纤维细胞，并在含有 5% 二氧化碳的培养箱中将其保持在 37 摄氏度，直至达到 80% 汇合。然后用 1 x PBS 洗涤细胞并加入解离酶。将细胞在 37 摄氏度、5% 二氧化碳和 80% 湿度下孵育 2 到 5 分钟。
细胞从细胞培养瓶中分离后，加入生长培养基以中和细胞解离酶。在室温下以 400 G 离心细胞悬液 5 分钟，并对细胞进行计数。至 50 乘以 10 次方的 5 倍于试管中采集的 5 个细胞，加入 5 毫升 1 x PBS。
接下来，在室温下以 400 G 离心细胞悬液 5 分钟。在加入 1 毫升细胞培养基并匀浆溶液之前，用移液管去除上清液。从之前制备的六孔板中，去除 2 毫升培养基，并将 1 毫升细胞悬液添加到由 3D 打印生物设备形成的琼脂糖模具的中心。
等待 20 至 30 分钟，让细胞在显微切片中沉淀，然后向孔中加入 1 毫升细胞培养基。将六孔板置于 37 摄氏度的培养箱中约 24 至 48 小时，以形成组织球状体。由圆柱形微针组成的 3D 打印印章状装置通过使用光固化树脂的立体光固化方法成功制造。
该设备简单、易于消毒、可重复使用，并且可针对不同尺寸的孔板和培养皿进行调整。它产生了 750 个均匀的显微切除孔或每 6 孔板 4， 716 个。装置从板中提前退出破坏了非粘附的模具并使微切除几何形状变形。
接种到非贴壁琼脂糖霉菌上的细胞大约在 24 小时后沉淀并形成组织球状体。该方法通过保持球体的形状、大小和活力成功地证明了球体的大规模生产，并支持类固醇培养数月。当我考虑此过程时，要记住的最重要的事情是小心地插入设备以防止气泡，并轻轻添加培养基以避免干扰细胞。
按照此程序，可以进行药物检测和基因表达分析。回答有关药物疗效、咸味和对治疗的遗传反应的问题。这项技术将允许大规模、高质量的球状体生产，对 3D 生物打印至关重要，从而提高细胞质量和数量，用于制药和化妆品毒性测试。
