磷酸钙诱导的小鼠腹主动脉瘤模型

该方案描述了磷酸钙诱导的腹主动脉瘤三A小鼠模型，以研究腹主动脉瘤分子机制中的病理特征。与血管紧张素管和弹性蛋白酶诱导的腹主动脉瘤模型相比，磷酸钙诱导的腹主动脉瘤模型是一种快速且具有成本效益的模型。演示该程序的将是蔡泽宇，这里的博士后，我们实验室的研究员。

开始切割0.3厘米宽的无粉橡胶手套和纱布。然后购买八到十周大的C57BL6J Mayo小鼠，并将动物饲养在空调环境中，12小时的光照黑暗循环，并免费获得食物和水。接下来，在手术前高压灭菌纱布、棉签、剪刀和镊子，并获得 Betadine、70% 乙醇和消毒洗手液。

使用电动剪或脱毛膏剃除麻醉小鼠的腹毛。然后用Betadine擦拭并擦拭剃光的区域，然后以圆周运动数次70%乙醇。然后用剪刀沿着腹部中线在下腹部做一个大约 1.5 厘米的切口。

使用蘸有生理盐水的无菌棉签，小心地取出肠道，直到可见肾下主动脉。接下来，从肾下主动脉解剖结缔组织和脂肪约 0.5 厘米的部分，同时避免小血管向背侧撕裂。然后将一块盐水浸泡的橡胶手套条放在腹主动脉和腹部主静脉下方，同时用棉签擦去多余的液体。

之后，在肾下腹部脉管系统的外罩上包装一块浸有0.5摩尔氯化钙的纱布10分钟。取下纱布，包装另一块用PBS溶液浸泡五分钟的纱布，以在主动脉外膜的C2中生成钙正磷酸盐晶体。然后小心地取下橡胶手套条和纱布。

重置小鼠肠道后，用五零缝合缝合腹部切口和皮肤。接下来，将鼠标放在加热垫上，直到鼠标恢复意识。将小鼠再安置14天，并在手术后密切监测小鼠，并随后至少每天观察。

手术14天后，在腹侧切开安乐死的小鼠胸腔和腹腔，切开右心房。通过心脏左心室用PBS缓冲液大量使用小鼠以去除主动脉中的血液，然后如手稿中所述用4%多聚甲醛灌注。在体视显微镜下小心去除外源组织和脂肪。

然后收获主动脉并将其放入装有五毫升4%多聚甲醛的管中48小时。然后用昆虫针将主动脉固定在黑色蜡板上，并继续获取主动脉图像。应用正磷酸钙14天后，对主动脉的形态进行成像，以可视化腹主动脉瘤的形成。

观察到正磷酸钙导致肾下腹主动脉扩张，并导致弹性纤维的急剧降解，如弹性蛋白断裂所示。使用蘸有生理盐水的无菌棉签去除肠道，直到可见肾下主动脉，然后从肾下主动脉中提取结缔组织和脂肪。总体而言，亚磷酸钙诱导小鼠腹主动脉瘤模型是探索腹主动脉瘤分子机制和治疗策略的一种快速且具有成本效益的方法，可以与其他模型并行应用，以充分模仿人类腹主动脉瘤的特征。