从小鼠荧光血管造影图像中测量视网膜血管直径

该协议提供了一种简单可靠的方法，可以自动测量由于基因突变或视网膜疾病而麻醉小鼠的视网膜血管直径。这种技术的主要优点是这里定制编写的MATLAB程序实用、易用、方便、可靠。视网膜血管直径变化通常发生在退行性疾病中，如 RP 和其他视网膜血管疾病。

小鼠模型提供了对治疗效果及其对视网膜血管影响的见解。该方法可能作为眼部血管疾病进展后的可量化临床标志物，以及监测可能的治疗方法。首先，准备一个装有荧光素工作溶液的注射器，并将其腹膜内给药给药给麻醉的动物，并在角膜表面滴一滴2%甲基纤维素凝胶。

然后将动物放在成像系统的定位台上。将视网膜成像眼底相机镜头直接轻轻地触摸鼠标的角膜，并稍微调整对准方式，将视神经头置于视野的中间。然后切换到眼底相机上的绿色荧光通道，并聚焦在视网膜血管上以拍摄图像。

在荧光素注射后的所需时间点捕获图像，以确定理想的时间点并可视化荧光素眼底图像。首先，打开MATLAB程序。然后下载并保存眼底直径。

M 代码。接下来，打开眼底图像分析文件夹并拖放眼底直径。M 代码添加到分析文件夹中。

将 FFA 图像拖放到图像分析文件夹中。在MATLAB程序中，在代码文件上单击两次以激活它。选择“运行”选项。

将出现一个弹出菜单以选择图像。选择图像，屏幕上将出现一个用于分析参数的弹出菜单。在弹出菜单中设置分析参数，然后按 OK。选择光盘的中心，然后选择光盘的边缘。

分析将在后台执行，分析结果将显示在屏幕上。该表包含每艘船的平均值、标准差和标准误差值。保存表。

然后保存设置了平均厚度的图形。打开包含已保存文件的分析文件夹，然后打开已保存的图窗。打开保存的表，复制值，然后将它们粘贴到 Excel 文件中。

荧光素注射后，获得来自对照小鼠和MITFMI-VGA9 /突变小鼠的图像，其中从视盘中心到血管端点的最短距离沿顺时针方向测量。平均血管直径是作为野生型和突变型小鼠的血管数量的函数获得的。要记住的最重要的事情是眼底摄像头的位置和视盘在眼底图像中的居中。

除了这种技术外，还可以进行分子技术，以探索新药，诊断眼睛中的不同血管状况，并更好地了解视网膜血管系统的功能。