球囊直接损伤诱导的兔主动脉瓣狭窄模型

由于无法获得患病的人类主动脉瓣的可靠来源，年度模型正在成为了解主动脉瓣狭窄潜在病理机制的重要工具。传统的主动脉瓣狭窄兔模型需要长期的膳食补充剂和基因操作来诱导主动脉瓣的显着狭窄，限制了它们在实验研究中的使用。该技术描述了一种通过对主动脉瓣的直接气球损伤来诱导兔子主动脉瓣狭窄的新程序，该程序可以准确地模拟主动脉瓣狭窄患者的状况。

Eun-Hye Park、Jin-Moo Kim 和 Eunmi Lee 将演示该程序，他们是我所在监管机构的研究专家。通过将充满生理盐水和市售造影剂的一对一混合物的放气装置连接到球囊导管的鲁尔锁部分，开始准备扩张球囊导管组。用充气溶液填充球囊后，从球囊导管中排出空气。

通过将 24 号静脉内或静脉导管插入麻醉兔的边缘耳静脉来开始手术程序。用每公斤100单位的肝素肝素盐水连接输液器。接下来，将兔子与多参数兽医监视器连接，以持续监测生命体征，例如氧饱和度信号或SpO2温度和血压。

将兔子仰卧在配备C臂透视的手术台上后，使用动物毛发剪从腹侧颈部区域去除毛发。用碘对切口区域进行消毒，并用手术巾覆盖兔子。要定位兔子的心脏，请打开C型臂并选择透视模式进行心脏成像。

调整兔子的位置，确保心脏位于成像场的中心。调整位置后，在颈部皮肤上做一个约3厘米的纵向切口，然后用手术剪刀切开筋膜和脂肪组织。然后小心地分开肌肉，直到暴露左颈总动脉（LCCA）约3至3.5厘米。

在暴露的 LCCA 的顶部和末端用 3-0 丝线缝合 LCCA 以阻止血液流动。将 22 号 IV 导管插入 LCCA。然后通过静脉导管将一根 0.016 英寸的导丝引入左心室，确保导管尖端正确定位在 C 臂的成像区域中。

接下来，抽出静脉导管，离开导丝，然后将 4 法式护套放在导丝上，放入 LCCA 以引入球囊导管。在C型臂透视引导下，小心地将8毫米球囊导管越过导丝插入主动脉瓣。将球囊导管尖端放置在主动脉瓣远端约一到两厘米处，并通过在六个大气压下用压力充气器吹扫充气溶液来给球囊充气。

接下来，将球囊推进到左心室或左心室顶点，并将其拉回左心室出口。在给气球放气之前重复此过程五次。拔出球囊导管和导丝，然后慢慢从LCCA上取下护套，并立即将LCCA与缝合线结扎到主动脉瓣。

用生理盐水清洁切口区域以去除血凝块。检查穿刺部位是否有动脉出血，然后用 3-0 不可吸收缝合线缝合肌肉和皮肤。完成后，用碘对伤口进行消毒。

手术后，取下监测贴片和夹子，并将兔子放在重症监护保温箱中。球囊损伤八周后，将麻醉的兔子放在仰卧位的回声台上。剃除胸部区域后，将超声换能器凝胶涂抹在胸部。

调整换能器以获得主动脉瓣的胸骨周围长轴视图和胸骨周围短轴视图。使用模式成像记录主动脉瓣的图像并保存图像以供以后分析。主动脉瓣结构变化评估显示，与对照或野生型兔相比，主动脉瓣损伤后8周，饲喂高胆固醇和维生素D2饮食的受伤兔的瓣尖增厚，运动受限，且饲喂高胆固醇和维生素D2饮食的兔无瓣膜损伤。

在受伤八周后处死兔子并切除心脏，用于主动脉瓣的组织学分析。与高胆固醇和维生素 D2 饮食诱导组的对照组相比，用 Masson 三色染色的主动脉瓣显示受伤组主动脉瓣尖的厚度增加。茜素红染色和Von Kossa染色比较高胆固醇和维生素D2饮食诱导组瓣膜小叶中钙沉积的程度，表明钙沉积程度可忽略不计。

相比之下，在球囊损伤组中观察到明显的钙化沉积物。本文演示了在兔子模型中诱导北极瓣膜狭窄的成功技术，并逐步解释了球囊对主动脉瓣的直接损伤。这种简单且可重复的模型为研究主动脉瓣狭窄的发生和发展提供了一种有前途的方法，并为研究主动脉瓣狭窄的潜在病理机制提供了有价值的工具。