연간 모델은 질병에 걸린 인간 대동맥 판막의 신뢰할 수 있는 출처에 대한 접근이 부족하기 때문에 대동맥 판막 협착증의 기저에 있는 병리학적 메커니즘을 이해하는 중요한 도구로 부상하고 있습니다. 기존의 대동맥 판막 협착증 토끼 모델은 대동맥 판막에 심각한 협착증을 유발하기 위해 장기간의 식이 보충제와 유전자 조작이 필요하므로 실험 연구에서 사용이 제한됩니다. 이 기술은 대동맥 판막에 대한 직접적인 풍선 손상을 통해 토끼의 대동맥 판막 협착증을 유도하는 새로운 절차를 설명하며, 이는 대동맥 협착증이 있는 인간의 상태를 정확하게 모방할 수 있습니다.
이 과정을 시연하는 것은 박은혜, 김진무, 이은미 등 필자의 연구 전문가다. 식염수와 시판되는 조영제의 일대일 혼합물로 채워진 수축 장치를 풍선 카테터의 루어 잠금 부분에 연결하여 팽창 풍선 카테터 세트 준비를 시작합니다. 풍선에 팽창 용액을 채운 후 풍선 카테터에서 공기를 제거합니다.
마취된 토끼의 가장자리 귓바퀴 정맥에 24게이지 정맥 주사 또는 IV 카테터를 삽입하여 수술 절차를 시작합니다. 헤파린 헤파린 화 식염수 킬로그램 당 100 단위의 주입 세트를 연결하십시오. 다음으로 토끼를 다중 매개변수 수의학 모니터와 연결하여 산소 포화도 신호 또는 SpO2 온도 및 혈압과 같은 활력 징후를 지속적으로 모니터링합니다.
C-arm 형광투시가 설치된 수술대에 토끼를 누운 후 동물 이발기를 사용하여 복부 목 부위의 털을 제거합니다. 절개 부위를 요오드로 소독하고 수술용 수건으로 토끼를 덮습니다. 토끼의 심장을 배치하려면 C-arm을 켜고 심장 이미징을 위한 형광 투시 모드를 선택합니다.
심장이 이미징 필드의 중앙에 오도록 토끼의 위치를 조정합니다. 자세가 조정되면 목 피부를 약 3cm 정도 세로로 절개하고 수술 용 가위를 사용하여 근막과 지방 조직을 자릅니다. 그런 다음 좌측 총경동맥(LCCA)의 약 3-3.5cm가 노출될 때까지 근육을 조심스럽게 분리합니다.
노출된 LCCA의 상단과 끝에 3-0 실크 봉합사로 LCCA를 결찰하여 혈류를 멈춥니다. 22게이지 IV 카테터를 LCCA에 삽입합니다. 그런 다음 IV 카테터를 통해 좌심실에 0.016인치 가이드 와이어를 삽입하여 카테터 끝이 C-arm의 이미징 필드에 적절하게 위치하도록 합니다.
다음으로, IV 카테터를 빼내고 가이드 와이어를 남겨둔 후 가이드 와이어 위에 4개의 프렌치 시스를 LCCA에 배치하여 풍선 카테터를 도입합니다. C-arm 형광 투시 유도 하에 가이드 와이어 위의 8mm 풍선 카테터를 대동맥 판막에 조심스럽게 삽입합니다. 풍선 카테터 팁을 대동맥 판막의 원위부에 약 1-2cm 떨어진 곳에 놓고 6기압의 압력 팽창기로 팽창 용액을 퍼지하여 풍선을 팽창시킵니다.
그런 다음 풍선을 좌심실 또는 LV 정점으로 전진시키고 LV 배출구로 다시 당깁니다. 풍선의 공기를 빼기 전에 이 절차를 5번 반복합니다. 풍선 카테터와 가이드 와이어를 빼낸 다음 LCCA에서 칼집을 천천히 제거하고 즉시 대동맥 판막으로 내려가는 길에 LCCA를 봉합사와 묶습니다.
혈전을 제거하기 위해 식염수로 절개 부위를 청소하십시오. 3-0 비흡수성 봉합사로 근육과 피부를 봉합하기 전에 천자 부위에 동맥 출혈이 있는지 검사합니다. 완료되면 요오드를 사용하여 상처를 소독하십시오.
수술 후 모니터링 패치와 클립을 제거하고 토끼를 중환자실 인큐베이터에 보관합니다. 풍선에 부딪힌 지 8주가 지나면 마취된 토끼를 앙와위 자세의 에코 테이블 위에 올려놓습니다. 가슴 부위를 면도한 후 초음파 변환기 젤을 가슴에 바릅니다.
변환기를 조정하여 대동맥 판막의 흉골 주위 장축 보기와 흉골 주위 단축 보기를 얻습니다. 모드 이미징을 사용하여 대동맥 판막의 이미지를 기록하고 나중에 분석할 수 있도록 이미지를 저장합니다. 대동맥 판막의 구조적 변화 평가 결과, 대동맥 판막 손상 후 8주가 지나면 대조군 토끼나 야생형 토끼에 비해 고콜레스테롤과 비타민D2 식단을 먹인 부상당한 토끼에서 교두가 두꺼워지고 움직임이 제한되었으며, 토끼는 판막 손상 없이 고콜레스테롤과 비타민D2 식단을 먹인 것으로 나타났습니다.
토끼를 희생시키고 대동맥 판막의 조직학적 분석을 위해 부상 8주 후에 심장을 절제했습니다. Masson's trichrome으로 염색된 대동맥 판막은 고콜레스테롤 및 비타민D2 식이 유도 그룹의 대조군에 비해 부상군의 대동맥 판막 교두의 두께가 증가한 것으로 나타났습니다. Alizarin Red 염색 및 Von Kossa 염색을 수행하여 고콜레스테롤 및 비타민-D2-식이 유도 그룹의 판막 소엽에서 무시할 수 있는 칼슘 침착을 나타내는 판막 칼슘 침착 정도를 비교했습니다.
대조적으로, 풍선 손상 그룹에서는 상당한 석회화 침전물이 관찰되었습니다. 토끼 모델에서 북극 판막 협착증을 유도하는 성공적인 기술은 대동맥 판막에 대한 직접적인 풍선 손상에 대한 단계별 설명과 함께 여기에서 시연됩니다. 이 간단하고 재현 가능한 모델은 대동맥 판막 협착증의 시작과 진행을 연구하기 위한 유망한 접근 방식을 제공하며, 대동맥 판막 협착증의 근본적인 병리학적 메커니즘을 조사하기 위한 귀중한 도구를 제공합니다.