Les modèles annuels apparaissent comme un outil important pour comprendre les mécanismes pathologiques sous-jacents à la sténose valvulaire aortique en raison du manque d’accès à des sources fiables de valves aortiques humaines malades. Les modèles traditionnels de sténose valvulaire aortique de lapin nécessitent une supplémentation alimentaire à long terme et des manipulations génétiques pour induire une sténose significative dans la valve aortique, ce qui limite leur utilisation dans les études expérimentales. Cette technique décrit une nouvelle procédure pour induire une sténose valvulaire aortique chez le lapin par une lésion directe du ballon à la valve aortique, qui peut imiter avec précision l’état d’un humain atteint de sténose aortique.
Eun-Hye Park, Jin-Moo Kim et Eunmi Lee, spécialistes de la recherche de mon organisme de réglementation, feront la démonstration de la procédure. Commencez à préparer l’ensemble de cathéters à ballonnet de dilatation en connectant le dispositif de dégonflage rempli du mélange un à un de solution saline et de produit de contraste disponible dans le commerce à la partie Luer lock du cathéter à ballonnet. Après avoir rempli le ballonnet avec une solution de gonflage, retirez l’air du cathéter à ballonnet.
Commencez la procédure chirurgicale en insérant un cathéter intraveineux ou IV de calibre 24 dans la veine auriculaire marginale du lapin anesthésié. Connectez un dispositif de perfusion avec 100 unités par kilogramme de solution saline héparine héparinisée. Ensuite, connectez le lapin à un moniteur vétérinaire multiparamètre pour surveiller en permanence les signes vitaux tels que le signal de saturation en oxygène ou la température et la pression artérielle de la SpO2.
Après avoir placé le lapin en décubitus dorsal sur une table d’opération équipée d’une fluoroscopie à arceau, retirez les poils de la zone ventrale du cou à l’aide d’une tondeuse à poils d’animaux. Stérilisez la zone d’incision avec de l’iode et couvrez le lapin avec des serviettes chirurgicales. Pour positionner le cœur du lapin, allumez l’arceau et sélectionnez le mode fluoroscopique pour l’imagerie cardiaque.
Ajustez la position du lapin pour vous assurer que le cœur est au centre du champ d’imagerie. Une fois la position ajustée, faites une incision longitudinale d’environ trois centimètres dans la peau du cou et utilisez des ciseaux chirurgicaux pour couper le fascia et le tissu adipeux. Ensuite, séparez soigneusement les muscles jusqu’à ce qu’environ 3 à 3,5 centimètres de l’artère carotide commune gauche, ou LCCA, soient exposés.
Mettez en relation le LCCA avec une suture en soie 3-0 en haut et à l’extrémité du LCCA exposé pour arrêter le flux sanguin. Insérez un cathéter IV de calibre 22 dans le LCCA. Introduisez ensuite un fil-guide de 0,016 pouce dans le ventricule gauche à travers le cathéter IV, en veillant à ce que l’extrémité du cathéter soit correctement positionnée dans le champ d’imagerie de l’arceau.
Ensuite, retirez le cathéter IV, en laissant le fil-guide avant de placer une gaine 4 French sur le fil-guide dans le LCCA pour introduire le cathéter à ballonnet. Insérez avec précaution le cathéter à ballonnet de huit millimètres sur le fil-guide dans la valve aortique sous guidage fluoroscopique à l’arceau. Placez l’extrémité du cathéter à ballonnet à environ un à deux centimètres distal de la valve aortique et gonflez le ballonnet en purgeant la solution de gonflage avec un gonfleur à pression à six atmosphères.
Ensuite, faites avancer le ballonnet dans le ventricule gauche ou l’apex du VG et tirez-le vers l’arrière dans la sortie du VG. Répétez cette procédure cinq fois avant de dégonfler le ballon. Retirez le cathéter à ballonnet et le fil guide, puis retirez lentement la gaine de l’ACVL et attachez immédiatement l’ACV à la suture en descendant jusqu’à la valve aortique.
Nettoyez la zone de l’incision avec une solution saline pour éliminer les caillots sanguins. Inspectez le site ponctionné pour détecter les saignements artériels avant de fermer le muscle et la peau avec une suture non résorbable 3-0. Une fois cela fait, stérilisez la plaie avec de l’iode.
Après l’opération, retirez les patchs et les clips de surveillance et gardez le lapin dans un incubateur de soins intensifs. Après huit semaines de blessure par ballonnet, placez le lapin anesthésié sur une table d’écho en position couchée. Appliquez le gel transducteur à ultrasons sur la poitrine après avoir rasé la zone thoracique.
Ajustez le transducteur pour obtenir la vue péristernale à grand axe et la vue péristernale à court axe de la valve aortique. Utilisez l’imagerie en mode pour enregistrer des images de la valve aortique et enregistrer les images pour une analyse ultérieure. L’évaluation des changements structurels de la valve aortique a révélé que huit semaines après la lésion de la valve aortique, les cuspides étaient épaissies et le mouvement était restreint chez les lapins blessés nourris avec le régime riche en cholestérol et en vitamine D2 par rapport aux lapins témoins ou de type sauvage, et les lapins nourris avec le régime riche en cholestérol et en vitamine D2 sans lésion valvulaire.
Les lapins ont été sacrifiés et les cœurs ont été excisés huit semaines après la blessure pour une analyse histologique de la valve aortique. La valve aortique colorée au trichrome de Masson a montré une augmentation de l’épaisseur des cuspides valvulaires aortiques dans le groupe blessé par rapport au groupe témoin dans les groupes induits par un régime hypercholestérolémique et en vitamine D2. La coloration au rouge d’alizarine et la coloration de Von Kossa ont été effectuées pour comparer le degré de dépôts valvulaires de calcium indiquait des dépôts de calcium négligeables dans les feuillets valvulaires dans le groupe induit par un régime hypercholestérolémique et en vitamine D2.
En revanche, des dépôts calcifiants importants ont été observés dans le groupe blessé par ballonnet. La technique réussie pour induire une sténose valvulaire arctique, dans le modèle de lapin, est démontrée ici avec une explication étape par étape d’une lésion directe de la valve aortique par ballonnet. Ce modèle simple et reproductible offre une approche prometteuse pour l’étude de l’initiation et de la progression de la sténose valvulaire aortique, et fournit un outil précieux pour étudier les mécanismes pathologiques sous-jacents de la sténose valvulaire aortique.
