Um der Maus Dextran, FITC, sieben Tage nach der Matrix-Gel-Injektion zu injizieren, RESUSPENDIEREN Sie 0,5 Milligramm Dextran, FITC in 500 Mikrolitern doppelt destilliertem Wasser. Gründlich vortexen, um eine Dextran-FITC-Lösung von einem Mikrogramm pro Mikroliter zu erhalten. Füllen Sie eine 29-Gauge-Spritze mit 50 Mikrolitern der Dextran FITC-Lösung.
Befestigen Sie die Maus am Schwanzvenen-Injektionsinstrument, desinfizieren Sie den Schwanz mit einem 75%ig alkoholgetränkten Wattebausch, bevor Sie vorsichtig 50 Mikroliter der Dextran FITC-Lösung in die Spritze in die Schwanzvene injizieren. Üben Sie mit dem Wattestäbchen eine Minute lang Druck auf die Injektionsstelle aus, um Blutungen zu stillen. Setzen Sie die Maus wieder in ihren Käfig ein und lassen Sie sie 30 Minuten lang entspannen, bevor Sie den Matrix-Gel-Plug einsammeln.
Um den Gelpfropfen zu sammeln, schneiden Sie die Haut der euthanasierten Maus mit einer chirurgischen Schere entlang des markierten Randes des Pfropfens ab. Und entfernen Sie die Haut über dem Matrix-Gel-Plug. Sammeln Sie den Pfropfen und spülen Sie ihn in einem Becherglas mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung aus, um überschüssiges Blut abzuwaschen.
Als nächstes bedecken Sie den Boden der Gewebeeinbettungskassette mit etwa 0,5 Millilitern Gewebeeinbettgel. Platzieren Sie dann den Matrix-Gel-Plug schnell in der geplanten Ausrichtung auf dem Gewebeeinbettungsgel. Betten Sie den Plug mit zusätzlichem Gewebeeinbettungsgel ein.
Erstarren Sie die Kassetten 12 Stunden lang bei minus 80 Grad Celsius. Schneiden Sie nach dem Entfernen des erstarrten Pfropfenblocks 12 Mikrometer dicke Abschnitte mit einem Gefriermikrotom. Montieren Sie dann die Schnitte auf Objektträger.