We thank Dr. Helene Bernstein for providing us with access to her flow cytometer. We also thank CFAR flow cytometry facility for the flow cytometry services. This project was in part supported by CTSC core utilization funding and STERIS corporation/University Hospitals-Division of Infectious diseases grant to PP.

HINWEIS: Die Experimente mit Mäusen wurden in Übereinstimmung mit der institutionellen Tierschutzausschusses (IACUC) Richtlinien durchgeführt. 1. Reconstituting der Rag-1 - / - Mäuse, die mit I n vitro kultiviert Th17-Zellen (drei Tage vor der Infektion) <ol><li> Zum Herstellen Th17 Zellen, der Kultur CD4 + CD25- CD44low CD62Lhigh naiven T-Zellen (3 x 104) in U-Boden-Platten mit 96 Vertiefungen allein oder Cokultur sie zusammen mit 3 x 104 CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg in Gegenwart löslicher α-CD3 (1 &amp; mgr; g / ml), α-CD28 (2 ug / ml) Antikörper und Antigen-präsentierenden Zellen unter Bedingungen, Th17 (polarisiert mit IL-6 (25 ng / ml), TGF-β (2 ng / ml) , α-IFN-γ (2 ug / ml) und α-IL-4 (2 &amp; mgr; g / ml)) für drei bis vier Tage. HINWEIS: Naive Zellen und T regs wurden mittels Fluoreszenz-aktivierter Zellsortierung sortiert (FACS) eind magnetische Zellisolierungsverfahren und kultiviert wie zuvor 19 bis 22 beschrieben. </li><li> Am Tag 4 nach Resuspendieren der Th17-Zellen mit der Pipette, sammeln sie aus Kulturen und zentrifugieren unter sterilen Bedingungen. <ol><li> Nehmen Sie eine kleine Teilmenge dieser Zellen, um ihre Lebensfähigkeit und zur Phänotypisierung zu untersuchen. Resuspendieren sie in 500 ul RPMI-Medium, fügen Propidiumiodid (200 ng / ml) und eine Bewertung ihrer Rentabilität sofort mittels Durchflusszytometrie. Führen Phänotypisierung mittels Durchflusszytometrie Beurteilung der IL-17A Produktion nach Restimulation (siehe Abschnitt 6.3). </li></ol></li><li> Zentrifuge und wäscht die Hauptmasse der Zellen in sterilem PBS bei 480 × g für 6 Minuten bei 4 ° C in allen Stufen, wenn nicht anders angegeben. </li><li> Verwenden Sie diese Zellen für die adoptive Transfer in 6-8 Wochen alte CD45.2 Rag1 - / - immundefizienten Mäusen. <ol><li> Resuspendieren der Zellen in 1 x 10 7 Zellen / ml Zelldichte mit kaltem sterilem PBS. </li><li> Injizieren 100 ul der Zellen durch intraperitoneal Injektion, unter Verwendung von 25 G Nadeln auf 1 ml Tuberkulin-Spritze, derart, dass eine Maus erhält 1 x 10 6 Zellen. Einige Mäuse PBS oder Th17 Zellen nur zu empfangen, und andere Mäuse Th17 Zellen, co-kultiviert mit Treg-Zellen wurden erhalten. HINWEIS: Führen Sie alle Schritte unter aseptischen Bedingungen. </li></ol></li></ol> 2. Wachsende C. albicans für eine Infektion (einen Tag vor der Infektion) <ol><li> Vor der Inokulation zerstreuen fünf Kolonien der CAF2-1 C. albicans Laborstamm in 100 ul sterilem PBS-Suspension, und fügen Sie die Suspension auf die sterile Brühe. </li><li> Impfen 5 Kolonien der C albicans in 50 ml des Hefe-Stickstoff-Base (YNB ohne Aminosäuren) / Peptone / Dextrose-Broth-Medium und Inkubation in einem Schüttelinkubator bei 30 ° C für 15-18 h bei 130 Umdrehungen pro Minute. </li><li> Überwachen Sie die Brühe für Bewölkung, denn das ist ein Indiz für das Wachstum des Pilzes. </li></ol> 3. CandidaErnte und Counting-Verfahren (Am Tag der Infektion) <ol><li> Sammeln Sie 10 ml Candida Brühe in 15 ml Tuben. Für größere Volumina, sammeln Candida in 50 ml Tuben. </li><li> Zentrifugieren Blastosporen bei 1900 × g für 5 min bei RT in allen Stufen, wenn nicht anders angegeben. Pellet die Blastosporen durch Zentrifugation, gefolgt von der Entfernung des Überstandes. </li><li> Wenn es mehr als ein Rohr Vereinige die Candida Blastosporen aus mehreren Rohren, Zugabe von sterilem PBS auf die Pellets und Resuspendieren sie in 10 ml PBS für die Zählung. </li><li> Nehmen Sie 20 ul Blastosporen in 1,5 ml Mikrozentrifugenröhrchen, fügen Sie 20 ul der 2X Para und Inkubation bei Raumtemperatur für 15-20 min. Zählen Sie die Fest Blastosporen mit dem Hämozytometer unter dem Mikroskop. HINWEIS: Paraformaldehyd ist krebserregend. Öffnen Sie die unverdünnte Lösung nur im Abzug durchführen. </li><li> In der Zwischenzeit wiederholt wenigstens zweimal Waschen der Blastosporen durch Zentrifugieren them in PBS, und Pelletieren der Blastosporen. Halten Sie die Pellets in 15-ml-Röhrchen bei Raumtemperatur, in der ABSL1 Haube, bereit für die Infektion. </li><li> Lassen Sie etwas sterilem PBS bei RT Resuspendieren der Blastosporen für eine Infektion. </li><li> Nach dem Zählen hinzufügen sterilem PBS in die Blastospore Pellet um die Zellzahlen Hefe Blastospore bis 2 x10 8 von Hefezellen / ml einzustellen. Dies ist der Blastosporen Suspension, verwendet, um die Mäuse zu infizieren wird. HINWEIS: Führen Sie alle Schritte unter aseptischen Bedingungen. </li></ol> 4. Mäuse Infektion (3-5 Tage nach der Zellübertragung) HINWEIS: Die Grund Infektion Verfahren durchgeführt wird, wie oben beschrieben, 19,23-25. <ol><li> Wiegen Sie die Rag-1 - / - Mäuse, die PBS oder die Zellen drei Tage zuvor erhalten. </li><li> Berechnen Sie die Dosis des Narkosemitteln mit ihrem Körpergewicht. Anesthetize der Mäuse durch die Verabreichung von Ketamin / Xylazin-Mischung (16,1 mg / ml und 1,6 mg / ml), unter Verwendung von 25 G Nadeln auf 1 ml Tuberkulin-Spritze durch intraperitoneal Injektion. <ol><li> Gabe von 50 &amp; mgr; l pro 10 g Körpergewicht. (Das heißt, 0,8 mg Ketamin und 0,08 mg Xylazin / 10 g Körpergewicht oder 80 mg Ketamin und 8 mg Xylazin pro kg Körpergewicht beziehungsweise). Beachten Sie für toe Prise Reaktion alle 15 min nach der Narkose. HINWEIS: Diese Dosis wird 60-90 min der Anästhesie, die genug für die Infektion Verfahren einzuleiten. </li><li> Übernehmen Sie die Augen Schmiermittel Salbe in den Augen der Mäuse, die Hornhaut vor dem Austrocknen zu verhindern. Da das Auge Schmiermittel kann austrocknen, wiederholen Augen Schmierung alle 45 min. </li></ol></li><li> Injizieren 1 ml Salzlösung (0,9% NaCl) subkutan am Rücken benachbart dem Vorderbein zu Rehydration der Mäuse während der Anästhesie zu helfen. </li><li> Besorgen Sie sich einen neuen, sauberen Käfig. Folgen Sie der Infektion Verfahren eine Maus zu einem Zeitpunkt, indem jede Maus in den neuen Käfig einmal infiziert. Führen Sie die PBS / Schein-Infektion zuerst, und dann auf die Candida-Infektion gro gehenups. </li><li> Nehmen Sie den narkotisierten Maus und öffnen Sie den Mund weit auf, um die Basis der Zunge zeigen. <ol><li> Legen Sie eine 3 mm Durchmesser Wattebausch mit 50 ul PBS oder Blastospore Aussetzung gesättigten, sublingual in der Mundhöhle für 90 min. Drehen Sie die Mäuse alle 15 min vor und zurück zu Staulunge zu vermeiden, sicherstellen, dass die Watte nicht zu bewegen. </li></ol></li><li> Einrichten eines Zeitgebers für jede Maus 90 Minuten von Sham oder Candida Inokulation in der Mundhöhle zu gewährleisten. </li><li> Halten Sie sie in einem Käfig unter der Wärmelampe (4 Meter), und jede Maus auf Hitze Gel-Pads. </li><li> Stellen Sie sicher, dass die Zunge in und von den Zähnen zurückgezogen, um die Zähne zerreißt die Zunge zu vermeiden. </li><li> Am Ende der 90 Minuten, entfernen Sie den Wattebausch aus dem Mund der Maus. Sehen Sie für jede Maus, die aus der Narkose erholen kann früher als 75 Minuten. In einem solchen Fall zu betäuben sie wieder mit Ketamin (40 mg / kg) allein. </li></ol> 5. Beitrag procedure Monitoring (während der 90 Minuten Anästhesie) <ol><li> Verwenden Sie Hitze Gel-Pads während der 90 Minuten Narkose. <ol><li> Um die Körpertemperatur zu halten und zum Ersticken zu vermeiden, darf nicht zulassen, dass Mäuse, um auf den regulären Maiskolben Maus Betten erholen. </li></ol></li><li> Nach der Erholung von der Anästhesie verabreichen zusätzliche 1 ml steriler 0,9% NaCl subkutan an zwei Stellen auf der Rückseite. </li><li> Bleiben Sie auf dem fünf PBS (Schein) geimpft Mäusen pro Käfig. Haus nur 1-2 infizierten Mäusen pro Käfig. </li><li> Füllen Sie das Verfahren Karte mit Initialen jeden Tag nach dem Eingriff zu notieren, die Veränderungen im Körpergewicht, Körperpflege Gewohnheiten und die allgemeine Gesundheit. </li></ol> 6. Die Beurteilung der Entzündung 6.1) Gewichtsverlust <ol><li> Wiegen Sie die Mäuse jeden Tag während der Infektion, beginnend am Tag vor der Infektion Verfahren. HINWEIS: In der Regel werden die immundefizienten Mäuse mit Th17 Zellen und ohne T regs injiziert erliegen 20-30% Gewichtsverlust aufgrund erhöhter Pilzbelastung 19 und verschlimmert die Entzündung. </li></ol> 6.2) Histologie Scoring der Zunge <ol><li> Opfern die Mäuse durch CO 2 Ersticken durch Genickbruch folgte. </li><li> Die Backen öffnen und sezieren die Zunge mit einer Schere und Pinzette. Verwenden stumpfen Pinzette, um den Mund zu halten und mit der Schere erreichen, um den hinteren Teil des Mundes, um das hintere Ende der Zunge einzuschneiden. </li><li> Für immunzytochemische Hämatoxylin und Eosin (H &amp; E) Färbung der Zunge Gewebe, spülen Sie die Zunge Gewebe mit eiskaltem PBS. 5 ml 10% Formalin für 2-3 Zungen und befestigen Sie O / N in 15 ml Tuben. <ol><li> Am nächsten Tag, entfernen Sie das Formalin und tauchen das Gewebe in 5 ml 70% Ethanol, um hyper-Fixierung zu verhindern. Senden Sie sie aus, um kommerziellen Dienst und Paraffineinbettung weiter, Schneiden und Färben von Paraffinschnitten. HINWEIS: Kommerzielle Histologie Service wird verwendet, um diese Schritte durchführen. </li&gt; </ol></li><li> Sobald die Dias aus dem Handels Histologie Service zurück, Grad der Entzündung durch die Beobachtung der Gewebeschnitte unter einem Lichtmikroskop. <ol><li> Score von 0 bis 5, wobei 0 keine Entzündung und 5 die schwerste Entzündungen. Ergebnis der Entzündung mit Tabelle 1. </li></ol></li></ol> 6.3) Zytokin-Produktion von Th17-Zellen HINWEIS: Übermäßiger TNF-α Produktion ist eine der Ablesungen für eine übermäßige Immunpathologie. Wenn Mäuse adoptiv mit Th17 Zellen nur übertragen, verursacht es Immunpathologie, die mit übermäßiger TNF-α-Produktion in Th17-Zellen assoziiert ist. <ol><li> Sammeln Sie eine Einzelzellsuspension aus Milz, Lymphknoten, axillären Lymphknoten, und der Zunge, mit zuvor beschriebenen Verfahren 19,26. </li><li> Restimulieren der Zellen mit Phorbolmyristatacetat (PMA) (50 ng / ml) und Ionomycin (500 ng / ml) für 4 h mit Brefeldin A (10 ug / ml) in der l hinzugefügtast 2 Std. Waschen Sie die Zellen mit PBS und fixieren Sie diese mit einem handelsüblichen Fixierung / Permeabilisierung Kit gemäß Herstellerangaben. </li><li> Führen intrazelluläre Cytokin Färbung mit dem Fluorochrom konjugierten anti-TNF-α, Anti-IL-17A und ROR &amp; ggr; t-Antikörper wie zuvor beschrieben 19. </li><li> Kurz gesagt, die Zellen werden in dem 1X Permeabilisierung Puffer mit dem Cocktail von Anti-TNF-α, Anti-IL-17A und ROR &amp; ggr; t-Antikörper, jedes Antikörpers mit einem 2 - 3 ug / ml Endkonzentration. </li><li> Inkubieren der Zellen für 1 h bei RT. </li><li> Nach der Inkubation, waschen Sie die Zellen mit 1X Permeabilisierung Puffer. </li><li> Zellpellet in 500 ul PBS mit 0,5% Rinderserumalbumin für die Durchflußzytometrie-Analyse. </li></ol>

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The authors declare that they have no competing financial interests.

Dieses Modell basiert auf Induktion von oraler C basiert albicans-Infektion abhängig Th17 Entzündung. Wegen der Abwesenheit von regulatorischen T ist die Th17 Zelle induzierte Entzündung ungebremst und führt zu schlecht aufgelöst Immunpathologie. In vitro abgeleitet naiven CD4-Zellen polarisiert Th17 Zellen wurden für die adoptive Übertragung verwendet. 40 bis 50% des gezüchteten CD4 + Zellen zeigen nachweisbare IL-17A-Expression um Tag 3 (Th17-Zellen), und wurden daher für...

Oral infections and inflammation have been related to cancer and cardiovascular diseases, and have dramatic impact on overall human health2,3. Opportunistic infections and inflammation caused by C. albicans are associated with primary immunodeficiencies (PID)4,5, inflammatory disorders such as periodontitis 6,7, Sjogren&#8217;s syndrome, and salivary gland disease8,9, as well as oral squamous cell carcinoma 10-12. C. albicans is a dimorphic commensal fungus that colonizes the mouths of 60% of healthy humans asymptomatically, yet it is the most common fungal pathogen causing infections when the host defense is weakened13-15. It causes recurring and chronic infections and inflammation in patients with AIDS and PID, and also in other immunocompromised individuals. As a commensal, its colonization load is associated with the change in the diversity of the overall oral microbiome16. As a pathogen it causes several forms of oropharyngeal candidiasis such as acute pseudomembranous, acute atrophic, chronic atrophic, chronic hypertrophic/hyperplastic, and angular cheilitis. 
Protection against C. albicans is determined not only by host immune resistance, but also by the ability to appropriately control Candida-induced immunopathology. Although commensals such as C. albicans contribute to modulation and exacerbation of other oral inflammatory conditions, the mechanisms by which dysbiosis occur during opportunistic infections are unclear. Besides the known role of adaptive Th17 cells in memory response to C. albicans17, their role in initiation and perpetuation of inflammation pathology during chronic infections remain unclear. Furthermore, oral inflammatory diseases such as Sjogren&#8217;s syndrome and periodontitis are associated with Th17 mediated pathology. Interestingly, these diseases are also strongly associated with frequent OPC. However, the interactions among Th17 cells, oral immunopathology of OPC and other oral inflammatory diseases are unstudied. 
Although mouse models of primary and secondary infection of oral candidiasis are available, a mouse model to study Candida infection associated Th17 inflammation, especially in the context of immunodeficiency is unavailable. This study presents a method for establishing oral Th17 inflammation associated with oral Candida infection in mice. Candida infection in mice is characterized by fungal lesions, inflammation in the tongue, decreased food intake, weight loss and eventually a moribund state. Oral pathology resembles chronic candidal infection lesions, as well as epithelial dysplasia in mouse oral cancer models12,18.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1289">
	<tbody>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:380px;">CAF-2</td>
			<td style="width:411px;">University of Pittsburgh (Sarah Gaffen)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:380px;">Candida culture</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">U-bottom 96 well plates&#160;</td>
			<td style="width:411px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">055588</td>
			<td>Used for cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">a-CD3&#160;</td>
			<td style="width:411px;">eBiosciences</td>
			<td style="width:119px;">16-0031-85</td>
			<td>Polarization of cells to Th17 conditions</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">a-CD28&#160;</td>
			<td style="width:411px;">eBiosciences</td>
			<td style="width:119px;">16-0281-85</td>
			<td>Polarization of cells to Th17 conditions</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">m-IL-6</td>
			<td style="width:411px;">Bio Basic</td>
			<td style="width:119px;">RC232</td>
			<td>Polarization of cells to Th17 conditions</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">h-TGF-b&#160;</td>
			<td style="width:411px;">R&#38;D</td>
			<td style="width:119px;">240-B</td>
			<td>Polarization of cells to Th17 conditions</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">a-IFN-g&#160;</td>
			<td style="width:411px;">eBiosciences</td>
			<td style="width:119px;">16-7311-85</td>
			<td>Polarization of cells to Th17 conditions</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">a-IL-4&#160;</td>
			<td style="width:411px;">eBiosciences</td>
			<td style="width:119px;">16-7041-85</td>
			<td>Polarization of cells to Th17 conditions</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:380px;">&#945;-IL17A ef660</td>
			<td style="width:411px;">eBiosciences</td>
			<td>50-7177-82</td>
			<td>Used for cell culture - 1:50</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:380px;">&#945;-TNFa-PE-Cy7</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>25-7423-41</td>
			<td>Used for cell culture - 1:100</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:380px;">&#945;-RORgt PE&#160;</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>12-6981-82</td>
			<td>Used for cell culture - 1:50</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">YNB w/o amino acids)/Peptone/Dextrose broth medium&#160;</td>
			<td style="width:411px;">Bio Basic</td>
			<td style="width:119px;">S507.SIZE</td>
			<td>Mediium for candida growth</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Shaker incubator&#160;</td>
			<td style="width:411px;">New Brunswick Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Innova 4300</td>
			<td>Incubation growth for candida</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">15 ml tubes</td>
			<td style="width:411px;">Bio Basic</td>
			<td style="width:119px;">BT888-SY</td>
			<td>Used for cell culture and candida growth</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">50 ml tubes</td>
			<td style="width:411px;">Bio Basic</td>
			<td style="width:119px;">CT 788-YS</td>
			<td>Used for cell culture and candida growth</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Table top Centrifuge</td>
			<td style="width:411px;">VWR International LLC</td>
			<td style="width:119px;">82017-654</td>
			<td>For pelleting candida -900 g</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Allegra Centrifuge</td>
			<td style="width:411px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:119px;">392302</td>
			<td>Cell culture - 480 g</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">1.5 ml eppendorf tubes</td>
			<td style="width:411px;">Bio Basic</td>
			<td style="width:119px;">BT620-NS</td>
			<td>Preparing final concentration of candida</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">2x paraformaldehyde</td>
			<td style="width:411px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:119px;">15710</td>
			<td>Fixing candida for count</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hemocytometer</td>
			<td style="width:411px;">VWR International LLC</td>
			<td style="width:119px;">15170-172</td>
			<td>Counting cells</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PBS - Phosphate Buffered Saline</td>
			<td style="width:411px;">Bio Basic</td>
			<td style="width:119px;">PD8117</td>
			<td>Preparation of buffers</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;">Ketamine/xylazine&#160;</td>
			<td style="width:411px;">Case Western Reserve University - Animal Resource Center</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Obtained from ARC approved protocol for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ophthalmic lubricant ointment&#160;</td>
			<td style="width:411px;">Allergan</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Eye ointment for animals to prevent dryness</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Saline (0.9% NaCl)</td>
			<td style="width:411px;">G Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">786-561</td>
			<td>Administerd to animals to prevent dehydration</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3-mm-diameter cotton wool ball&#160;</td>
			<td style="width:411px;">VWR International LLC</td>
			<td style="width:119px;">BP7603</td>
			<td>3 mm balls for candida infection</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Heat gel pads</td>
			<td style="width:411px;">Case Western Reserve University - Animal Resource Center</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>for maintaining the body temperaturre and fast recovery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hematoxylin and Eosin staining</td>
			<td style="width:411px;">Histoserv - MD</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Tissue histology</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">10% formalin&#160;</td>
			<td style="width:411px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:119px;">JC1111/MC</td>
			<td>Tissue histology</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">70% ethanol&#160;</td>
			<td style="width:411px;">VWR International LLC</td>
			<td style="width:119px;">97064-490</td>
			<td>Sterilization purpose</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PMA - Phorbol 12-myristate 13-acetate</td>
			<td style="width:411px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P1585-1MG</td>
			<td>Restimulation of cells</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ionomycin</td>
			<td style="width:411px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:119px;">124222 1mg</td>
			<td>Restimulation of cells</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fixation permeabilization kit</td>
			<td style="width:411px;">eBiosciences</td>
			<td style="width:119px;">E16913-106</td>
			<td>Fixing cells for Flow cytometry</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:380px;">Tuberculin syringes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td align="right">309659</td>
			<td>Mice injection</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">25 G x 3/8 needles</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td align="right">309626</td>
			<td>Mice injection</td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;">Rag1 -/- mice</td>
			<td style="width:411px;">Jackson laboratories</td>
			<td style="width:119px;">Stock no: 002216</td>
			<td>Recipient mice</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">CD45.1 congenic mice</td>
			<td style="width:411px;">Jackson laboratories</td>
			<td style="width:119px;">Stock no:002014&#160;</td>
			<td>Donor Th17 cells</td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:380px;">CB17-SCID mice</td>
			<td style="width:411px;">Jackson laboratories</td>
			<td style="width:119px;">Stock no: 001303</td>
			<td>Recipient mice</td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:380px;">Balb/c mice</td>
			<td style="width:411px;">Jackson laboratories</td>
			<td style="width:119px;">Stock no: 000651</td>
			<td>Donor Th17 cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

th17 inflammation model of oropharyngeal candidiasis in immunodeficient mice

Oropharyngeal Candidiasis (OPC) disease is caused not only due to the lack of host immune resistance, but also the absence of appropriate regulation of infection-induced immunopathology. Although Th17 cells are implicated in antifungal defense, their role in immunopathology is unclear. This study presents a method for establishing oral Th17 immunopathology associated with oral candidal infection in immunodeficient mice. The method is based on reconstituting lymphopenic mice with in vitro cultured Th17 cells, followed by oral infection with Candida albicans (C. albicans). Results show that unrestrained Th17 cells result in inflammation and pathology, and is associated with several measurable read-outs including weight loss, pro-inflammatory cytokine production, tongue histopathology and mortality, showing that this model may be valuable in studying OPC immunopathology. Adoptive transfer of regulatory cells (Tregs) controls and reduces the inflammatory response, showing that this model can be used to test new strategies to counteract oral inflammation. This model may also be applicable in studying oral Th17 immunopathology in general in the context of other oral diseases.

In diesem Modell werden sowohl die Candida infizierten Mäusen und nicht-infizierte Mäuse in Rag-1 - / - immundefizienten Hintergrund wurden adoptiv mit Th17 Zellen 3-5 Tage vor der Infektion übertragen. Insgesamt 10-12 Mäuse wurden für die Experimente verwendet, mit 2 Mäuse in jeder Sham infizierten Gruppen und 4-5 in jedem der Candida infizierten Gruppen. Naive Zellen wurden von kongenen Thy1.1 oder CD45.1 Mäusen stammten, damit injiziert Th17 Zellen wurden in vivo unter Ver...

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Th17 Inflammation Model of Oropharyngeal Candidiasis in Immunodeficient Mice

Although Candida infection models are available to study host immune resistance, a model to study T cell mediated immunopathology in the context of Candida infection is absent. Here we describe a method to establish Th17 immunopathology associated with oral Candida infection in immunodeficient mice.

Th17 Entzündung Modell Oropharyngeale Candidiasis in immundefizienten Mäusen

Oropharyngeal Candidiasis (OPC) disease is caused not only due to the lack of host immune resistance, but also the absence of appropriate regulation of ...

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