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Potato Virus X-Based microRNA Silencing (VbMS) in Kartoffeln.

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3.0K Views

•

11:51 min

•

May 11th, 2020

DOI :

10.3791/61067-v

May 11th, 2020

•

Jinping Zhao¹, Carlos Garcia Rios¹, Junqi Song¹^,²

¹Texas A&M AgriLife Research Center at Dallas, Texas A&M University System, ²Department of Plant Pathology, Microbiology, Texas A&M University

Zusammenfassung

Wir präsentieren ein detailliertes Protokoll für das auf Kartoffelvirus X (PVX) basierende microRNA-Silencing-System (VbMS) zur funktionellen Charakterisierung endogener microRNAs (miRNAs) in Kartoffeln. Target Mimic (TM) Moleküle von miRNA von Interesse werden in den PVX-Vektor integriert und vorübergehend in Kartoffeln exprimiert, um die Ziel-miRNA oder miRNA-Familie zum Schweigen zu bringen.

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Umweltwissenschaften

virusbasiertes microRNA Silencing VbMS

Kartoffelvirus X PVX

Target Mimik TM

Kurze Tandem Target Mimics STTMs

Solanum tuberosum

Kapitel in diesem Video

0:04

Introduction

0:42

Short Tandem Target Mimic (STTM) Fragment Amplification

1:40

STTM Purification

2:22

T4 DNA Polymerase Reaction Mix Preparation

3:13

Potato Virus X (PVX)-Based microRNA (miRNA) Silencing (VbMS) Vector Construction

4:55

T4 DNA Polymerase Reaction Setup and STTM Cloning

7:21

Potato Virus-X-Based VbMS Assay

10:07

Results: Representative VbMS of miR165/166 in Tetraploid Potato Species

11:16

Conclusion

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