Untersuchung der Pathogenese der MYH7-Mutation Gly823Glu bei familiärer hypertropher Kardiomyopathie anhand eines Mausmodells

Dieses Protokoll ist von Bedeutung, da es eine Demonstration von Ultraschall bei kleinen Tieren liefern kann. Diese Technik kann Einblicke in die Entdeckung pathogener Gene bei der hereditären Kardiomyopathie geben. Befestigen Sie die Knockin-Mäuse horizontal auf der Plattform und neigen Sie die Plattform um 30 Grad zur Knockin-Maus.

Entfernen Sie Haare an der vorderen Brustwand der Knockin-Mäuse mit einer Enthaarungscreme Positionieren Sie die Sonde senkrecht mit der Beule zum Kopf des Tieres. Drehen Sie dann die Sonde gegen den Uhrzeigersinn um ca. 45 Grad in der parasternalen Längsachsenansicht. Drehen Sie die Sonde um 90 Grad im Uhrzeigersinn, um die parasternale Kurzachsenansicht zu erhalten.

Passen Sie nach dem Drehen der Sonde die Verschiebung der Y-Achse an, um die richtige Scheibe zu erhalten. Beobachten Sie das Bild der langen Achse des Herzens und wählen Sie dann die Messdaten des M-Modus aus. Erfassen Sie Ultraschalldaten von parasternalen Langachsenansichten von Mäusen und messen Sie die Herzfrequenz, die linksventrikuläre Ejektionsfraktion, das Herzzeitvolumen, die linksventrikuläre und diastolische Dimension, die linksventrikuläre und systolische Dimension.

Linke ventrikuläre hintere Wand und Ventrikelscheidewand Die Familienstammbäume der hypertrophen Kardiomyopathie wurden erhalten, und bei allen dokumentierten Familienmitgliedern wurde eine hypertrophe Kardiomyopathie diagnostiziert. Die Sanger-Sequenzierung bestätigte die gleiche M Y H 7 P G 8 23 E-Variante bei allen Patienten, jedoch nicht bei den gesunden Personen in den Familien.

Und 174 Kontrollen, die heterozygot M Y H 7 P G 8 23 E vollständig in dieser Familie co-getrennt. Der Glycinrest bei Codon 8 23 im Halsbereich von M Y H 7 war in allen verfügbaren Wirbeltiermyocinsequenzen hochkonserviert. Nach A C M G Standards und Richtlinien wurde die M Y H 7 P G 8 23 E Variante als pathogene Variante vorhergesagt.

Die Knockin-Mäuse entwickelten nach der Geburt eine altersabhängige Herzhypertrophie. Die Echokardiographie zeigte, dass sich das interventrikuläre Septum und die linke ventrikuläre hintere Wand bei den Knockin-Mäusen mit erhöhter Herzfrequenz entwickelten. Auch durch die histologische Analyse bestätigt.

Virus-Ultraschalldaten können erhalten werden, indem die Sonde in verschiedenen Winkeln auf verschiedenen Abschnitten des Mausbegriffs gedreht wird.