Punción modificada de la vena de la cola y la vena del pene para el muestreo de sangre en el modelo de rata

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo para ofrecer alternativas de recolección de sangre rápidas, fáciles y confiables para el modelo de rata. Describimos tres métodos diferentes de muestreo de sangre según el contexto: punción de la vena de la cola bajo anestesia o en un animal consciente, y punción de la vena dorsal del pene bajo anestesia.

Resumen

Las muestras de sangre son necesarias en la mayoría de los diseños de animales experimentales para evaluar diversos parámetros hematológicos. Este trabajo presenta dos procedimientos para la recolección de sangre en ratas: la punción de la vena lateral de la cola y la punción de la vena dorsal del pene, que ofrecen ventajas significativas sobre otras técnicas descritas anteriormente. Este estudio muestra que estos dos procedimientos permiten un muestreo rápido (menos de 10 min) y producen volúmenes sanguíneos suficientes para la mayoría de los ensayos (202 μL ± 67,7 μL). La punción de la vena dorsal del pene debe realizarse bajo anestesia, mientras que la punción de la vena lateral de la cola se puede realizar en un animal consciente y restringido.

La alternancia de estas dos técnicas, por lo tanto, permite la extracción de sangre en cualquier situación. Si bien siempre se recomienda que un operador reciba asistencia durante un procedimiento para garantizar el bienestar animal, estas técnicas requieren un solo operador, a diferencia de la mayoría de los métodos de muestreo de sangre que requieren dos. Además, mientras que estos métodos descritos anteriormente (por ejemplo, palo yugular, extracción de sangre de la vena subclavia) requieren un entrenamiento previo extenso para evitar el daño o la muerte del animal, la punción de la vena de la cola y la vena dorsal del pene rara vez son fatales. Por todas estas razones, y de acuerdo con el contexto (por ejemplo, para estudios que incluyen ratas macho, durante el período perioperatorio o postoperatorio inmediato, para animales con venas delgadas de la cola), ambas técnicas se pueden usar alternativamente para permitir extracciones repetidas de sangre.

Introducción

El muestreo de sangre es necesario para la mayoría de los estudios en animales, tanto in vivo como in vitro. En ratas, como la frecuencia y la cantidad de muestreo de sangre pueden ser significativas, es útil tener diferentes alternativas para la recolección. Se han descrito varios métodos en estudios previos.

Las técnicas más utilizadas son la punción de la vena de la cola y la extracción de sangre de la vena safena. El muestreo de venas de la cola es adecuado para todas las cepas de ratas. Con el entrenamiento adecuado, el procedimiento es fácil de realizar y causa una angustia mínima al animal¹. ....

Protocolo

Los procedimientos se realizaron en ratas Lewis macho de 3 meses de edad, cada una con un peso de 300-400 g. Se incluyeron un total de 24 animales, con tres condiciones de punción: 12 ratas se sometieron a punción de vena de la cola sin anestesia (TV grupal sin anestesia), y otras 12 ratas fueron anestesiadas para someterse tanto a punción de vena de la cola (TV grupal con anestesia) como a punción de vena peneana (grupo PV con anestesia). Todos los procedimientos fueron aprobados y respetaron las directrices del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC). Todos los animales fueron sacrificados al final del estudio (después de un seguimiento de 1 mes) p....

Discusión

La punción de la vena de la cola es un método eficiente para obtener sangre de una rata consciente. Sin embargo, cuando un animal está bajo anestesia, el efecto del isoflurano puede provocar espasmos vasculares y hacer que la punción de la vena de la cola sea inadecuada¹¹. Como se muestra en este estudio, una alternativa en esta situación es recolectar sangre de la vena del pene, que es más exitosa y produce un volumen significativamente mayor de sangre en menos tiempo. Es importante recorda.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.5 mL | 28 G ½  Insulin Syringes	BD	329424	for tail vein puncture
0.5 mL | 30 G x 5/16 Insulin Syringes	BD	320468	for penile vein puncture
250 L  Microtainer blood collection tubes with K2EDTA	BD	365974
Gauze Sponges	Curity	6939
Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine	E-Z Systems	EZ-190F	for penile vein puncture
Isoflurane, USP	Patterson Veterinary	1403-704-06	for penile vein puncture
Nosecone for Anesthesia	World Precision Instruments	EZ-112	for penile vein puncture
Rodent Restraint Cone	Harvard Apparatus	ST2 52-95-86	for tail vein puncture
Small Animal Heated Operating Table (Adjustable)	Peco Services Ltd	69023
Webcol Alcohol prep pads	Simply Medical	5110