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Dans cet article

  • Résumé
  • Résumé
  • Introduction
  • Protocole
  • Résultats Représentatifs
  • Discussion
  • Déclarations de divulgation
  • Remerciements
  • matériels
  • Références
  • Réimpressions et Autorisations

Résumé

Ici, nous présentons un protocole pour offrir des alternatives de prélèvement de sang rapides, faciles et fiables pour le modèle de rat. Nous décrivons trois méthodes différentes de prélèvement sanguin selon le contexte : ponction veineuse de la queue sous anesthésie ou sur un animal conscient, et ponction veineuse dorsale du pénis sous anesthésie.

Résumé

Des échantillons de sang sont nécessaires dans la plupart des modèles d’animaux expérimentaux pour évaluer divers paramètres hématologiques. Cet article présente deux procédures de prélèvement sanguin chez le rat: la ponction latérale de la veine de la queue et la ponction dorsale de la veine pénienne, qui offrent des avantages significatifs par rapport aux autres techniques décrites précédemment. Cette étude montre que ces deux procédures permettent un échantillonnage rapide (moins de 10 min) et donnent des volumes sanguins suffisants pour la plupart des tests (202 μL ± 67,7 μL). La ponction dorsale de la veine pénienne doit être effectuée sous anesthésie, tandis que la ponction latérale de la veine de la queue peut être effectuée sur un animal conscient et immobilisé.

L’alternance de ces deux techniques permet donc une prise de sang dans n’importe quelle situation. Bien qu’il soit toujours recommandé d’assister un opérateur lors d’une procédure visant à assurer le bien-être des animaux, ces techniques ne nécessitent qu’un seul opérateur, contrairement à la plupart des méthodes de prélèvement sanguin qui en nécessitent deux. De plus, alors que ces méthodes décrites précédemment (p. ex., bâton jugulaire, prélèvement sanguin dans la veine sous-clavière) nécessitent une formation préalable approfondie pour éviter de blesser ou de tuer l’animal, la ponction de la veine de la queue et de la veine dorsale du pénis est rarement mortelle. Pour toutes ces raisons, et selon le contexte (par exemple, pour les études incluant des rats mâles, pendant la période périopératoire ou postopératoire immédiate, pour les animaux ayant des veines caudales minces), les deux techniques peuvent être utilisées alternativement pour permettre des prises de sang répétées.

Introduction

Le prélèvement sanguin est nécessaire pour la plupart des études animales, tant in vivo qu’in vitro. Chez les rats, comme la fréquence et la quantité de prélèvement sanguin peuvent être importantes, il est utile d’avoir différentes alternatives pour le prélèvement. Diverses méthodes ont été décrites dans des études antérieures.

Les techniques les plus couramment utilisées sont la ponction de la veine de la queue et la prise de sang dans la veine saphène. L’échantillonnage des veines de la queue convient à toutes les souches de rats. Avec une formation appropriée, la procédure est simple à effectuer et cause une détresse mi....

Protocole

Les procédures ont été effectuées sur des rats Lewis mâles âgés de 3 mois, pesant chacun de 300 à 400 g. Au total, 24 animaux ont été inclus, avec trois conditions de ponction : 12 rats ont subi une ponction de la veine de la queue sans anesthésie (groupe TV sans anesthésie), et 12 autres rats ont été anesthésiés pour subir à la fois une ponction de la veine de la queue (groupe TV avec anesthésie) et une ponction de la veine du pénis (PV de groupe avec anesthésie). Toutes les procédures ont été approuvées et respectées par les lignes directrices du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux (IACUC). Tous les animaux ont été euthanasiés à la fin de l’ét....

Résultats Représentatifs

Le succès a été défini comme une prise de sang produisant au moins 100 μL de sang en moins de 10 minutes (du temps de ponction à la fin du prélèvement sanguin), et l’échec a été défini comme une prise de sang produisant moins de 100 μL de sang ou prenant plus de 10 minutes pour récupérer le volume sanguin requis. Un maximum de 250 μL de sang par échantillon était autorisé. Les analyses statistiques ont été effectuées à l’aide d’un test ANOVA unidirectionnel pour des comparaisons multiples et .......

Discussion

La ponction de la veine de la queue est une méthode efficace pour obtenir du sang d’un rat conscient. Cependant, lorsqu’un animal est sous anesthésie, l’effet de l’isoflurane peut entraîner des spasmes vasculaires et rendre la ponction de la veine de la queue inappropriée11. Comme le montre cette étude, une alternative dans cette situation consiste à prélever du sang dans la veine pénienne, ce qui est plus efficace et produit un volume de sang significativement plus important en mo.......

Déclarations de divulgation

Aucun des auteurs n’a de conflit d’intérêts à déclarer.

Remerciements

Ce travail a été financé par Shriners Children’s Boston (B. E. U., K.U., C.L.C.). L.C. est financé par « La Bourse des Gueules Cassées », « La Bourse Année Recherche », et « La Bourse de l’Amicale des Anciens Internes des Hôpitaux de Paris ». Y.B. est financé par « La Bourse des Gueules Cassées ». Y.B. et I.F.v.R. sont financés par les Hôpitaux Shriners pour enfants (l’ID de la bourse est #84308-BOS-22 #84302-BOS-21 respectivement). Ce matériel est partiellement basé sur des travaux soutenus par la National Science Foundation dans le cadre de la subvention No. CEE 1941543. Le soutien partiel des National Institutes of Health des États-Unis (R01EB028782, R56AI171958 et....

matériels

NameCompanyCatalog NumberComments
0.5 mL | 28 G ½  Insulin SyringesBD329424for tail vein puncture
0.5 mL | 30 G x 5/16 Insulin SyringesBD320468for penile vein puncture
250 L  Microtainer blood collection tubes with K2EDTABD365974
Gauze SpongesCurity6939
Isoflurane Auto-Flow Anesthesia MachineE-Z SystemsEZ-190Ffor penile vein puncture
Isoflurane, USPPatterson Veterinary1403-704-06for penile vein puncture
Nosecone for AnesthesiaWorld Precision InstrumentsEZ-112for penile vein puncture
Rodent Restraint ConeHarvard ApparatusST2 52-95-86for tail vein puncture
Small Animal Heated Operating Table (Adjustable)Peco Services Ltd69023
Webcol Alcohol prep padsSimply Medical5110

Références

  1. Lee, G., Goosens, K. A. Sampling blood from the lateral tail vein of the rat. Journal of Visualized Experiments. (99), e52766 (2015).
  2. Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing blood from rats through the saphenous vein and by c....

Réimpressions et Autorisations

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