Tecnología 2D-HPLC-MS combinada con una red molecular para la identificación de componentes en el péndulo de acónito de la medicina tibetana

Resumen

Este estudio utiliza la tecnología de cromatografía líquida bidimensional de alta resolución-espectrometría de masas (2D-HPLC-MS) junto con redes moleculares para desentrañar la intrincada composición química de la planta medicinal tibetana Aconitum pendulum Busch (APB). El artículo proporciona un protocolo detallado para la exploración sistemática y la identificación de componentes químicos complejos de los medicamentos a base de hierbas.

Resumen

En este estudio, se empleó un enfoque integral, utilizando la tecnología 2D-HPLC-MS junto con la red molecular para desentrañar la intrincada composición química de la planta medicinal tibetana APB. A través de la implementación de la HPLC 2D, se logró una mejor separación de mezclas complejas, lo que permitió el aislamiento de compuestos individuales para su posterior análisis. El enfoque de redes moleculares ayudó aún más a dilucidar las relaciones estructurales entre estos compuestos, lo que contribuyó a la determinación de posibles moléculas bioactivas. Esta estrategia integrada identificó de manera eficiente una amplia gama de componentes químicos presentes dentro de la planta. Los hallazgos revelaron un espectro diverso de constituyentes químicos dentro de APB, incluidos los alcaloides, entre otros. Esta investigación no solo avanza en la comprensión del perfil fitoquímico de esta medicina tradicional tibetana, sino que también proporciona información valiosa sobre sus posibles propiedades terapéuticas. La integración de 2D-HPLC-MS y la red molecular demuestra ser una poderosa herramienta para explorar e identificar sistemáticamente composiciones químicas complejas en medicamentos a base de hierbas, allanando el camino para futuras investigaciones y desarrollos en el campo del descubrimiento de productos naturales.

Introducción

La medicina tibetana es una parte integral de la medicina tradicional china, se adhiere a los principios de las prácticas médicas tibetanas y se utiliza para la prevención^{y el tratamiento} de enfermedades. Sin embargo, la medicina herbal tibetana contiene componentes químicos complejos de las plantas caracterizados por fluctuaciones significativas en el contenido. La comprensión limitada de los elementos bioactivos fundamentales se ha convertido en un cuello de botella en la modernización de^{la medicina} tibetana. La aplicación de la cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS), que combina el fuerte poder de separ....

Protocolo

1. Preparación

1. Preparación de la muestra
   1. Utilice una balanza de sensibilidad 1/10.000 para pesar 0,25 g (peso seco) de APB en un tubo de microcentrífuga de 3 mL, añada 2,5 mL de metanol y, a continuación, sonique durante 30 min (potencia 240 W, frecuencia 40 kHz).
   2. Realice la centrifugación a 1,2 x g durante 5 minutos, recoja el sobrenadante y filtre a través de un filtro de membrana con un tamaño de poro de 0,22 μm.
2. Preparación de materiales experimentales
   1. Prepare la fase móvil bidimensional, use acetonitrilo como fase orgánica B y configure agua ultrapura con ácido fórmico al 0,1% como....

Discusión

El objetivo principal de este experimento fue la optimización de un método parcial en el marco de la separación bidimensional de fases líquidas. Para lograr esto, un nuevo modulador de dilución en columna se integró a la perfección en el sistema de cromatografía líquida bidimensional (2D-LC). Este ajuste técnico fue de suma importancia, ya que elevó significativamente la competencia en el perfil de los constituyentes químicos presentes en la medicina tibetana conocida como APB. La incorporación de la tecnolo.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrile	Fisher chemical	F22M81203	Mobile phase
Aconitum pendulum	/	/	Herb medicine
Agilent 1290 Infinity (II) 2D-LC	Agilent Technologies	G2198-90001	Liquid chromatography
Disposable syringes	Chengdu Keen experimental equipment	/	1ml
EP tube	Chengdu Keen experimental equipment	/	3ml
Liquid phase injection bottle	Chengdu Keen experimental equipment	/	1.5ml
LTQ XL Mass Spectrometer	Thermo Fisher	LTQ21991	Mass Spectrometer
Microporous membranes	Chengdu Keen experimental equipment	/	0.22μm
Ultimate XB-C18,5 μm,2.1 x 200 mm	Welch	00201-31015	Reversed-phase column
Ultrasonic Cleaner	GT Sonic	UGT20DEC048Y	Ultrasonic Cleaner 240W 40KHz
XAmide,3 μm,100A	Dalian Mondi Technology	D2019110601	Hydrophilic column