Uso de un sistema de perfusión tisular in vitro para detectar las actividades funcionales de tubos intestinales aislados en tiempo real

Resumen

Presentamos un método para aislar los tubos intestinales de ratas y evaluar el impacto de los fármacos sobre su tensión, frecuencia y amplitud in vitro. Este método ofrece un enfoque valioso para los investigadores que investigan los tubos intestinales.

Resumen

Las enfermedades gastrointestinales, que tienen una alta incidencia, plantean desafíos considerables para los seres humanos. El intestino delgado es parte integral de la digestión y absorción de alimentos y medicamentos y desempeña un papel crucial en el tratamiento de estas enfermedades. El experimento del movimiento del tubo intestinal, un método in vitro común y esencial, se utiliza para estudiar la dinámica gastrointestinal. Esto incluye la preparación del tubo intestinal aislado, así como la suspensión del tubo intestinal preparado en el baño y su conexión a un detector de señales. A continuación, se registran y analizan una serie de parámetros, como la tensión, que pueden utilizarse para evaluar la función motora intestinal, así como consideraciones para mantener el tubo intestinal activo in vitro. El programa estandarizado desde el muestreo hasta la recolección de datos mejora en gran medida la repetibilidad de los datos experimentales y garantiza la autenticidad del registro de la tensión intestinal después de la intervención fisiológica, patológica y farmacológica. Aquí presentamos los problemas clave en la operación experimental y un valioso protocolo experimental de referencia para el estudio de fármacos que regulan la motilidad gastrointestinal.

Introducción

Las enfermedades gastrointestinales, una afección prevalente, afectan gravemente la vida y la salud humanas¹. El trastorno de la motilidad gastrointestinal es una parte importante de las enfermedades gastrointestinales funcionales, que se manifiesta principalmente en síntomas debilitantes, retraso en el vaciamiento gástrico y problemas gástricos graves². Puede alterar la coordinación gastrointestinal, dificultar el vaciado gástrico, afectar la intolerancia alimentaria intestinal e incluso causar obstrucción funcional en el intestino delgado o grueso³. Para los pac....

Protocolo

Este protocolo se deriva de la literatura previamente publicada 14,15,16,17. Para el presente estudio se utilizaron ratas macho Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 semanas de edad). El protocolo animal fue revisado y aprobado por el Comité de Gestión de la Universidad de Medicina Tradicional China de Chengdu (Registro Nº 2023017). Antes del experimento, se instruyó a las ratas para que ayunaran durante 24 horas. Durante el experimento, las ratas se mantuvieron en una cámara de animales y tuvieron libre acce....

Discusión

La motilidad gastrointestinal se logra mediante una serie de contracciones y relajaciones del músculo liso coordinadas con precisión. Este proceso implica la contracción rítmica de un grupo de grupos musculares, la contracción coordinada de múltiples grupos y una contracción propulsiva especial^20,21. La aparición de trastornos de la motilidad gastrointestinal puede estar asociada a disfunciones a diferentes niveles, como .......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetylcholine	Sigma, USA	A6625
atropine	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	IA06501
Barium chloride	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	B861682
CaCl2	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A501330
D-glucose	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A610219
drawing software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Epinephrine	Sigma, USA	E4642
HEPES	Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China	S3872
In vitro tissue perfusion system	PowerLab, ADInstruments, Australia	ML0146
KCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100395
KH2PO4	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100781
LabChart Professional version 8.3	ADInstruments, Australia	—
MgCl2·6H2O	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100288
NaCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100241
NaHCO3	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100865
nifedipine	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	N5087
statistical analysis software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Surgical sutures	Johnson, USA	—