Verwendung eines In-vitro-Gewebeperfusionssystems zum Nachweis der funktionellen Aktivitäten isolierter Darmschläuche in Echtzeit

Zusammenfassung

Wir stellen eine Methode zur Isolierung von Darmschläuchen von Ratten vor und beurteilen den Einfluss von Medikamenten auf deren Spannung, Häufigkeit und Amplitude in vitro. Diese Methode bietet einen wertvollen Ansatz für Forscher, die Darmschläuche untersuchen.

Zusammenfassung

Magen-Darm-Erkrankungen, die eine hohe Inzidenz aufweisen, stellen den Menschen vor erhebliche Herausforderungen. Der Dünndarm ist ein wesentlicher Bestandteil der Verdauung und Absorption von Lebensmitteln und Medikamenten und spielt eine entscheidende Rolle bei der Behandlung dieser Krankheiten. Das Experiment zur Bewegung der Darmröhre, eine gängige und wesentliche In-vitro-Methode , wird zur Untersuchung der gastrointestinalen Dynamik eingesetzt. Dies umfasst die Aufbereitung des isolierten Darmschlauchs, sowie die Suspension des vorbereiteten Darmschlauchs im Bad und dessen Anschluss an einen Signaldetektor. Es folgt die Erfassung und Analyse einer Reihe von Parametern, wie z.B. die Spannung, die zur Beurteilung der Darmmotorik herangezogen werden kann, sowie Überlegungen zur Aufrechterhaltung der Aktivität des Darmschlauchs in vitro. Das standardisierte Programm von der Probenahme bis zur Datenerhebung verbessert die Wiederholbarkeit der experimentellen Daten erheblich und stellt die Authentizität der Erfassung der Darmspannung nach physiologischen, pathologischen und medikamentösen Eingriffen sicher. Hier stellen wir die Schlüsselprobleme im experimentellen Betrieb und ein wertvolles experimentelles Referenzprotokoll für die Untersuchung von Medikamenten vor, die die gastrointestinale Motilität regulieren.

Einleitung

Magen-Darm-Erkrankungen, eine weit verbreitete Erkrankung, haben schwerwiegende Auswirkungen auf das Leben und die Gesundheit der Menschen¹. Die gastrointestinale Motilitätsstörung ist ein wichtiger Bestandteil funktioneller Magen-Darm-Erkrankungen und äußert sich vor allem in schwächenden Symptomen, verzögerter Magenentleerung und schweren Magenproblemen². Es kann die Magen-Darm-Koordination stören, die Magenentleerung behindern, die Nahrungsmittelunverträglichkeit im Darm beeinflussen und sogar Funktionsstörungen im Dünn- oder Dickdarm verursachen³. Bei Patiente....

Protokoll

Dieses Protokoll leitet sich aus der zuvor veröffentlichten Literatur^ab 14,15,16,17. Für die vorliegende Studie wurden männliche Sprague Dawley (SD) Ratten (260-300 g, 8-10 Wochen alt) verwendet. Das Tierprotokoll wurde vom Verwaltungsausschuss der Universität für Traditionelle Chinesische Medizin in Chengdu geprüft und genehmigt (Aktenzeichen 2023017). Vor dem Experiment wurden die Ratten angewiesen, 24 Stunden lang zu fasten. Während des Experiments wurden die Ratten in einer Tierkammer gehalten und hatten....

Diskussion

Die gastrointestinale Motilität wird durch eine Reihe von genau aufeinander abgestimmten Kontraktionen und Entspannungen der glatten Muskulatur erreicht. Dieser Prozess beinhaltet die rhythmische Kontraktion einer Gruppe von Muskelgruppen, die koordinierte Kontraktion mehrerer Gruppen und eine spezielle treibende Kontraktion ^20,21. Das Auftreten von gastrointestinalen Motilitätsstörungen kann mit Funktionsstörungen auf versch.......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetylcholine	Sigma, USA	A6625
atropine	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	IA06501
Barium chloride	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	B861682
CaCl2	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A501330
D-glucose	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A610219
drawing software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Epinephrine	Sigma, USA	E4642
HEPES	Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China	S3872
In vitro tissue perfusion system	PowerLab, ADInstruments, Australia	ML0146
KCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100395
KH2PO4	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100781
LabChart Professional version 8.3	ADInstruments, Australia	—
MgCl2·6H2O	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100288
NaCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100241
NaHCO3	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100865
nifedipine	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	N5087
statistical analysis software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Surgical sutures	Johnson, USA	—