In vitro Tissue Perfusion System을 사용하여 분리된 장관의 기능적 활동을 실시간으로 감지

요약

쥐의 장관을 분리하고 약물이 시험관 내에서 장력, 빈도 및 진폭에 미치는 영향을 평가하는 방법을 제시합니다. 이 방법은 장관을 조사하는 연구자에게 유용한 접근 방식을 제공합니다.

초록

발병률이 높은 위장 질환은 인간에게 상당한 문제를 제기합니다. 소장은 식품과 약물의 소화 및 흡수에 필수적이며 이러한 질병을 치료하는 데 중요한 역할을 합니다. 일반적이고 필수적인 체외 방법인 장 이동 실험은 위장 역학을 연구하는 데 활용됩니다. 여기에는 격리 된 장관의 준비뿐만 아니라 준비된 장관을 욕조에 현탁시키고 신호 감지기에 연결하는 것이 포함됩니다. 그 다음에는 장 운동 기능을 평가하는 데 사용할 수 있는 장력과 같은 일련의 매개변수를 기록하고 분석하며, 시험 관 내에서 장을 활성 상태로 유지하기 위한 고려 사항을 확인합니다. 샘플링에서 데이터 수집에 이르는 표준화된 프로그램은 실험 데이터의 반복성을 크게 향상시키고 생리학적, 병리학적, 약물적 개입 후 장 긴장 기록의 신뢰성을 보장합니다. 여기에서 우리는 실험 운영의 주요 문제와 위장 운동성을 조절하는 약물을 연구하기 위한 귀중한 참조 실험 프로토콜을 제시합니다.

서문

널리 퍼진 질환인 위장 질환은 인간의 삶과 건강에 심각한 영향을 미칩니다¹. 위장관 운동성 장애는 기능성 위장관 질환의 중요한 부분으로, 주로 쇠약 증상, 위 배출 지연, 심각한 위 문제 등으로 나타난다². 이는 위장 협응을 방해하고, 위 배출을 방해하며, 장내 음식 과민증에 영향을 미치고, 소장 또는 대장의 기능 장애를 유발할 수 있습니다³. 위장관 수술을 받는 환자의 경우, 이 질환은 장 부전으로 직결될 수 있습니다. 또한, 장 질환은 위장 질환뿐만 아니라 간염 및 중추 신경계 질환과 같은 다양한 다른 질병의 발병 인자와도 관련이 있습니다. 장내 미생물 군집은 운동성을 포함한 장 생리학에서 중요한 조절 역할을 하며, 이는 결과적으로 미생물 생태계 내 집락화에 영향을 미친다⁴. B형 간염 바이러스 감염이 만성 B형 간염으로 진행됨에 따라 장내 세균총의 변화 정도는 다양합니다. 장내 세균총을 조절하는 것은 B형 간염 바이러스 치료에 도움이 되는 것으로 입증되었다⁵. 또한 중추 신경계는 장에 영향을 미치고 미생물 구성을 변....

프로토콜

이 프로토콜은 이전에 발표된 문헌 ^14,15,16,17에서 파생되었습니다. 본 연구에는 수컷 Sprague Dawley (SD) 랫트(260-300g, 8-10주령)가 사용되었습니다. 동물 프로토콜은 Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (기록 번호 2023017)의 관리 위원회에서 검토하고 승인했습니다. 실험에 앞서, 쥐들은 24시간 동안 금식하도록 지시받았다. 실험 기간 동안 쥐들은 동물의 방에 갇혀 있었고 음식과 물을 자유롭게 이용할 수 있었다.

1. 솔루션 준비

1. 118 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 2.5 mM CaCl₂, 1.2 mM KH₂PO₄ , 1.2 mM MgCl₂∙6H₂O, 25 mM NaHCO₃, 11 mM D- ....

토론

위장 운동성은 정밀하게 조정된 일련의 평활근 수축과 이완에 의해 이루어집니다. 이 과정에는 한 그룹의 근육 그룹의 리드미컬 수축, 여러 그룹의 조정 수축 및 특수 추진 수축이 포함됩니다^20,21. 위장 운동 장애의 발생은 중추 신경계, 자율 신경계, 장 신경계 및 위장 평활근과 같은 다양한 수준의 기능 장애와 관련이 있을 수 .......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetylcholine	Sigma, USA	A6625
atropine	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	IA06501
Barium chloride	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	B861682
CaCl2	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A501330
D-glucose	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A610219
drawing software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Epinephrine	Sigma, USA	E4642
HEPES	Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China	S3872
In vitro tissue perfusion system	PowerLab, ADInstruments, Australia	ML0146
KCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100395
KH2PO4	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100781
LabChart Professional version 8.3	ADInstruments, Australia	—
MgCl2·6H2O	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100288
NaCl	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100241
NaHCO3	Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China	A100865
nifedipine	Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China	N5087
statistical analysis software	GraphPad Software, San Diego, California, USA	—
Surgical sutures	Johnson, USA	—