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Utilisation d’un système de perfusion tissulaire in vitro pour détecter en temps réel les activités fonctionnelles de tubes intestinaux isolés
Dans cet article
Résumé
Nous présentons une méthode pour isoler des tubes intestinaux de rat et évaluer l’impact des médicaments sur leur tension, leur fréquence et leur amplitude in vitro. Cette méthode offre une approche précieuse pour les chercheurs qui étudient les tubes intestinaux.
Résumé
Les maladies gastro-intestinales, qui ont une incidence élevée, posent des défis considérables pour les humains. L’intestin grêle fait partie intégrante de la digestion et de l’absorption des aliments et des médicaments et joue un rôle crucial dans le traitement de ces maladies. L’expérience de mouvement du tube intestinal, une méthode in vitro courante et essentielle, est utilisée pour étudier la dynamique gastro-intestinale. Cela comprend la préparation du tube intestinal isolé, ainsi que la suspension du tube intestinal préparé dans le bain et sa connexion à un détecteur de signaux. S’ensuit l’enregistrement et l’analyse d’une série de paramètres, tels que la tension, qui peuvent être utilisés pour évaluer la fonction motrice intestinale, ainsi que des considérations pour maintenir le tube intestinal actif in vitro. Le programme standardisé de l’échantillonnage à la collecte des données améliore considérablement la répétabilité des données expérimentales et garantit l’authenticité de l’enregistrement de la tension intestinale après une intervention physiologique, pathologique et médicamenteuse. Nous présentons ici les principaux problèmes du fonctionnement expérimental et un protocole expérimental de référence précieux pour l’étude des médicaments qui régulent la motilité gastro-intestinale.
Introduction
Les maladies gastro-intestinales, une affection répandue, ont un impact grave sur la vie et la santé humaines1. Le trouble de la motilité gastro-intestinale est une partie importante des maladies gastro-intestinales fonctionnelles, se manifestant principalement par des symptômes débilitants, une vidange gastrique retardée et des problèmes gastriques graves2. Il peut perturber la coordination gastro-intestinale, entraver la vidange gastrique, avoir un impact sur l’intolérance alimentaire intestinale et même provoquer une obstruction fonctionnelle de l’intestin grêle ou du gros
Protocole
Ce protocole est dérivé de la littérature précédemment publiée 14,15,16,17. Des rats Sprague Dawley mâles (SD) (260-300 g, âgés de 8 à 10 semaines) ont été utilisés pour la présente étude. Le protocole animal a été examiné et approuvé par le comité de gestion de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu (enregistrement n° 2023017). Avant l’expérience, les rats ont reçu l’ordre de jeûner pendant 24 heures. Au cours de l’expérience, les rats ont été gardés dans une chambre d’animal et avaient....
Résultats Représentatifs
La première partie de l’étude se concentre sur le processus de séparation des tubes intestinaux isolés du corps et de leur conversion en tubes de 2 cm in vitro. Ce processus est illustré en détail à la figure 1. La deuxième partie implique la suspension et la standardisation de l’anneau isolé du tube intestinal. Le succès de ce processus est démontré par la figure 2, qui montre la contraction rythmique a.......
Discussion
La motilité gastro-intestinale est accomplie par une série de contractions et de relaxations des muscles lisses coordonnées avec précision. Ce processus implique la contraction rythmique d’un groupe de groupes musculaires, la contraction coordonnée de plusieurs groupes et une contraction propulsive spéciale20,21. L’apparition de troubles de la motilité gastro-intestinale peut être associée à des dysfonctionnements ?.......
Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.
Remerciements
Ce travail a été soutenu par le Programme spécial de talents de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu pour le « Plan de promotion de la recherche sur les chercheurs et les talents disciplinaires de Xinglin » (33002324).
....matériels
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acetylcholine | Sigma, USA | A6625 | |
| atropine | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | IA06501 | |
| Barium chloride | Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China | B861682 | |
| CaCl2 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A501330 | |
| D-glucose | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A610219 | |
| drawing software | GraphPad Software, San Diego, California, USA | — | |
| Epinephrine | Sigma, USA | E4642 | |
| HEPES | Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China | S3872 | |
| In vitro tissue perfusion system | PowerLab, ADInstruments, Australia | ML0146 | |
| KCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100395 | |
| KH2PO4 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100781 | |
| LabChart Professional version 8.3 | ADInstruments, Australia | — | |
| MgCl2·6H2O | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100288 | |
| NaCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100241 | |
| NaHCO3 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100865 | |
| nifedipine | Macklin Biochemical Co.,Ltd.,Shanghai, China | N5087 | |
| statistical analysis software | GraphPad Software, San Diego, California, USA | — | |
| Surgical sutures | Johnson, USA | — |
Références
- Jiang, Z., et al. Therapeutic role of wuda granule in gastrointestinal motility disorder through promoting gastrointestinal motility and decreasing inflammatory level. Front Pharmacol. 14, 1-15 (2023).
- Talley, N. J.
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