Electroporation-Based DNA Plasmids Delivery to Induce In Vivo Mutations in the Mouse

Comience la administración de plasma de ADN basado en electroporación colocando un trozo cuadrado de película de parafina sobre la mesa y apretando el gel del electrodo sobre la película. A continuación, aplique una cantidad generosa de gel de electrodos en cada paleta para cubrir completamente las paletas de electrodos. A continuación, sostenga al cachorro microinyectado con la mezcla de ADN plasmídico en la mano no dominante, manteniendo los dedos detrás de la cabeza.

Para posicionar la cabeza del cachorro para la electroporación, deslice suavemente un dedo en el siguiente lado dorsal, posterior a la cabeza, y coloque el electrodo positivo fuera de la cabeza donde se dirige el ventrículo. Coloque el electrodo sobre el ojo del cachorro y apriete ligeramente las paletas de electrodos en la parte rostral de la cabeza del cachorro. Presione el pedal del electrodo para iniciar la electroporación.

Con cada pulso, gire ligeramente las paletas de electrodos, en sentido contrario a las agujas del reloj, de modo que la paleta positiva se mueva hacia la parte superior de la cabeza. Después del pulso final, retire las paletas y colóquelas a un lado. Los ratones estaban moribundos a los cinco meses de la electroporación, y se detectó un crecimiento tumoral completo a través de la proteína reportera y el análisis histológico.