Para comenzar la transfección celular, agregue 20 microlitros de la suspensión de células HeLa a los pocillos de placa de 384 pocillos que contienen siRNA diluido para sembrar 700 células HeLa por pocillo. Después de una hora de incubación a temperatura ambiente, coloque la placa del pozo en una incubadora durante 72 horas a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono. Para incorporar BrdU en las células transfectadas, agregue 10 microlitros de solución de BrdU 90 micromolares a cada pocillo después de 56 horas de transfección de ARNsi.
Incubar las células durante 16 horas a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono. La especificidad de la incorporación de BrdU en el ADN mitocondrial de las células HeLa se estudió utilizando células rho0 que carecen de ADN mitocondrial.
