Para empezar, coloque la placa del tumor maligno de la vaina de los nervios periféricos confluente al 80 % o las células MPNST a una densidad de 1200 células por pocillo en placas de 96 pocillos de paredes negras. Después de preparar las diluciones del fármaco que se va a probar, agregue cada dilución o vehículo a al menos tres células replicadas. Para evaluar el número directo de células, agregue hoaxed 33342, a una concentración final de uno a cinco microgramos por mililitro a las placas.
E incubar las placas durante 30 minutos a 37 grados centígrados. Coloque las placas en un citómetro de imágenes de alto rendimiento y escanee las placas utilizando la opción de recuento directo de células para el número total de células con tiempos de exposición de 100.000 a 600.000 milisegundos. Analice las lecturas con el software, expórtelas a una hoja de cálculo y utilice el software adecuado para los análisis estadísticos.
