Aislamiento, expansión y nucleofección de células madre neurales de la zona subventricular murina adulta

Nuestra investigación se centra en estudiar cómo se regula la población de células madre neurales en el cerebro de los mamíferos adultos. Comprender los mecanismos moleculares intrínsecos y extrínsecos que regulan las células madre neurales dentro de los nichos neurogénicos es importante para comprender la biología y desarrollar futuras aplicaciones terapéuticas potenciales. Para estudiar el comportamiento de las células madre neurales, se utilizan ampliamente los enfoques tanto in vivo como in vitro.

Los cultivos in vitro de células madre neurales ofrecen entornos controlados y la posibilidad de manipular y monitorizar fácilmente esta población de células. Las técnicas para la preservación de la expresión génica in vitro son un enfoque versátil para estudiar los mecanismos moleculares que gobiernan la biología celular. Sin embargo, un método eficiente y reproducible para sobreexpresar y eliminar genes candidatos en células madre neurales sigue siendo un desafío en el campo.

Los métodos tradicionales de transfección para la administración de genes han demostrado ser eficaces en las células del sistema nervioso central. Además, estos métodos afectan la viabilidad y funcionalidad de la célula. Por lo tanto, el refinamiento de enfoques alternativos es crucial para manipular la expresión génica en las células madre neurales.

Con este protocolo, presentamos un sistema de nucleofección mejorado que logra una alta eficiencia de entrega de genes en cultivos de células madre neurales de la zona subventricular murina adulta, junto con tasas de supervivencia superiores al 80%