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* Ces auteurs ont contribué à parts égales
Le but de ce manuscrit est de décrire les étapes microchirurgicales nécessaires pour réaliser une greffe de larynx hétérotopique chez la souris. Les avantages de ce modèle murin par rapport à d’autres modèles animaux de transplantation laryngée sont son rapport coût-efficacité et la disponibilité de tests et de données immunologiques.
La transplantation hétérotopique laryngée, bien qu’il s’agisse d’une procédure techniquement difficile, offre plus d’analyses scientifiques et d’avantages en termes de coûts par rapport à d’autres modèles animaux. Bien que décrite pour la première fois par Shipchandler et al. en 2009, cette technique n’est pas largement utilisée, peut-être en raison des difficultés d’apprentissage de la technique microchirurgicale et du temps nécessaire pour la maîtriser. Cet article décrit en détail les étapes chirurgicales, ainsi que les pièges potentiels à éviter, afin d’encourager une utilisation efficace de cette technique.
Dans ce modèle, les artères carotides bilatérales du larynx donneur sont anastomosées à l’artère carotide receveuse et à la veine jugulaire externe, ce qui permet le flux sanguin à travers la greffe. Le flux sanguin peut être confirmé en peropératoire par la visualisation du remplissage sanguin dans les artères carotides bilatérales du greffon, la rougeur des glandes thyroïdes du greffon et le saignement des microvaisseaux dans le greffon. Les éléments cruciaux du succès comprennent la préservation délicate des vaisseaux du greffon, la fabrication d’artériotomie et de veinotomie de taille correcte et l’utilisation du nombre approprié de sutures sur les anastomoses artério-artérielles et artério-veineuses pour sécuriser les vaisseaux sans fuite et prévenir l’occlusion.
N’importe qui peut devenir compétent dans ce modèle avec une formation suffisante et effectuer la procédure en environ 3 heures. S’il est réalisé avec succès, ce modèle permet d’effectuer des études immunologiques facilement et à faible coût.
Pour les patients souffrant de lésions irréparables du larynx ou d’un cancer du larynx, une laryngectomie totale est souvent la seule option1. La laryngectomie totale laisse les patients sans la capacité de respirer et de parler par eux-mêmes, en plus d’éprouver une détresse sociale et psychologique2. Les patients atteints d’un cancer du larynx qui ont besoin d’une laryngectomie totale sont d’excellents candidats potentiels pour la transplantation laryngée. Alors qu’une transplantation laryngée humaine dans le cadre de lésions laryngées irréparables a été effectuée, l’allotransplantation du larynx est actuellement évitée....
Cette recherche a été réalisée en conformité avec le comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux (IACUC) de la Mayo Clinic. Des souris BalbC (âgées de 10 à 12 semaines) ont été utilisées comme donneuses et des souris C57/BL6 (âgées de 10 à 12 semaines) ont été utilisées comme receveuses parce que leurs principaux complexes d’histocompatibilité, H-2Db et H-2Kb, respectivement, sont immunologiquement incompatibles, et donc la réponse immunitaire à la greffe peut être étudiée plus avant. Tous les instruments utilisés pendant la chirurgie ont été stérilisés (voir la figure supplémentaire S1 et la figure supplémentaire S2), ....
Confirmation de la réussite de la transplantation
En utilisant le protocole décrit ci-dessus, il est possible d’évaluer le flux sanguin vers le complexe LTE en observant la pulsation de l’artère carotide du donneur après avoir retiré les pinces vasculaires. La pulsation est généralement visible et la coloration rouge immédiate de l’artère donneuse confirme un flux sanguin actif (Figure 4A). Si l’anastomose n’est pas efficace, l’artère n’aura pas d.......
L’incidence et la prévalence du cancer du larynx ont augmenté respectivement de 12 % et 24 % au cours des trois dernières décennies, et bon nombre de ces patients subissent une laryngectomie pour le traitement10. Cette procédure aggrave considérablement la qualité de vie d’une personne et, par conséquent, un traitement alternatif est souhaité. L’allotransplantation composite vascularisée du larynx peut améliorer la capacité d’un patient à respirer et à parler; Cependant, des .......
Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents. Les frais de voyage et de subsistance d’Egehan Salepci pour la recherche ont été financés par le Conseil de la recherche scientifique et technologique de Turquie (TUBITAK).
Nous tenons à remercier Randall Raish pour son excellente vidéographie et son aide au montage.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
#1 Paperclips | Staples | OP-7404 | Clips are shaped manually to be used as retractors |
1 cc Insulin Syringes | BD | 329412 | 27 G 5/8 |
10-0 Ethilon Nylon Suture | Ethicon | 2870G | |
25 G Precision Glide Needle | BD | 305125 | 1 in |
3 mL Luer-Lok Tip Syringe | BD | 309657 | |
30 G Sterile Standard Blunt Needles | Cellink | NZ5300505001 | |
5-0 Monocryl Suture | Ethicon | Y822G | |
8-0 Ethilon Nylon Suture | Ethicon | 2815G | |
Adson Forceps | Fine Science Tools | 11027-12 | Straight, 1 x 2 teeth |
Adventitia scissors | S&T | SAS-10 | 19 mm, 10 cm, straight |
Angled Forceps | Fine Science Tools | 00109-11 | 45/11 cm |
Artifical Tears Lubricant Opthalmic Ointment | Akorn Animal Health | 59399-162-35 | |
Bandaid Fabric Fingertip | Cardinal Healthcare | 299399 | |
Betadine Solution Swabsticks | Purdue Products | 67618-153-01 | |
Buprenex Injection | CIII | 12495-0757-1 | 0.3 mg/mL |
Clamp applying forceps without lock | Accurate Surgical & Scientific Instruments | ASSI.CAF5 | 14 cm |
Cotton Swabs | Puritan | 10806-001-PK | |
DeBakey forceps | |||
Dermabond Mini | Cardinal Healthcare | 315999 | |
Dissecting Boards | Mopec | 22-444-314 | |
Falcon Sterile Disposable Petri Dish | Corning | 25373-041 | 35 mm |
Fine Scisssors | Fine Science Tools | 14029-10 | Curved Sharp-Blunt 10 cm |
Golden A5 2-Speed Blade Clipper | Oster | 008OST-78005-140 | #10 |
Hair Remover Sensitive Formula | Nair | 2260000033 | |
Heparin | Meitheal Pharmaceuticals | 71288-4O2-10 | 10,000 USP units per 10 mL |
Isoflurane | Piramal Healthcare | 66794-013-25 | |
Low-Temp Micro Fine Tip Cautery | Bovie Medical | AA90 | |
Mercian Visibility Background Material | Synovis Micro Companies | VB3 | Green |
Microvascular Approximator Clamp without Frame | Accurate Surgical & Scientific Instruments | ASSI.ABB11V | 0.4-1 mm Vessel Diameter |
Mouse face mask kit | Xenotec | XRK-S | Small |
Needle holder | S&T | C-14 W | 5.5", 8 mm, 0.4 mm |
Press n' Seal | Glad | 70441 | |
Scalpel | Braun | BA210 | 10 blade |
Single Mini Vessel Clamp | Accurate Surgical & Scientific Instruments | ASSI.ABB11M | .31 (8 mm), 3 x 1 mm Rnd. Bl., Black Pair |
Stereomicroscope | Olympus | SZ61 | |
Sterile Alcohol Prep Pads | Fisherbrand | 06-669-62 | |
Sterile Disposable Drape Sheets | Dynarex | DYN4410-CASE | |
Sterile Gauze Pads | Dukal | 1212 | |
Sterile Saline | Hospira | 236173 | NaCl 0.9% |
Sterile Surgical Gloves | Gammex | 851_A | |
Straight Forceps | Fine Science Tools | 00108-11 | 11 cm |
Tissue forceps | Accurate Surgical & Scientific Instruments | ASSI.JFLP3 | 13.5 cm, 8 mm, 0.3 mm |
Vannas Pattern Scissors | Accurate Surgical & Scientific Instruments | ASSI.SDC15RV | 15 cm, 8 mm, curved 7mm blade |
Vannas Spring Scissors | Fine Science Tools | 15000-10 | 3 mm cutting edge, curved |
Vessel Dilator Tip | Fine Science Tools | 00126-11 | Diameter 0.1 mm/Angled 10/11 cm |
Vessel Dilator, Classic line | S&T | D-5a.3 W | 9 mm, 0.3 mm, angled 10 |
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