Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

הפרוטוקול מתאר הכנה של מיקרוספרות נתרן אלגינט מוצלבות עם יוני מתכת שונים באמצעות מכשיר מיקרופלואידי לתכנון נשאות תרופות. התכונות האנטי-מיקרוביאליות והשחרור האיטי של תרופות אלה נחקרו גם כן.

Abstract

מיקרוספרות הן חלקיקים בגודל מיקרומטרי שיכולים לטעון ולשחרר בהדרגה תרופות באמצעות אנקפסולציה פיזית או ספיחה על פני השטח ובתוך פולימרים. בתחום הביו-רפואה, מיקרוספרות הידרוג'ל נחקרו בהרחבה ליישומן כנשאיות תרופות בשל יכולתן להפחית את תדירות מתן התרופות, למזער תופעות לוואי ולשפר את היענות המטופלים. נתרן אלגינט (ALG) הוא פוליסכריד ליניארי טבעי עם שלושה קשרים גליקוזידים בעמוד השדרה. ישנן שתי קבוצות הידרוקסיל עזר נוכחים בכל אחד moieties של פולימר, אשר יש את המאפיינים של אלכוהול hydroxyl moiety. יחידות ה-ALG הסינתטיות יכולות לעבור תגובות כימיות צולבות עם יוני מתכת, וליצור מבנה רשת צולב של ערימות פולימרים, ובסופו של דבר ליצור הידרוג'ל. מיקרוספרות הידרוג'ל ניתן להכין באמצעות תהליך פשוט המערב את תכונות הקישור היוני של ALG. במחקר זה הכנו מיקרוספרות הידרוג'ל מבוססות ALG (ALGMS) באמצעות אסטרטגיית אלקטרודפוזיציה מיקרופלואידית. מיקרוספרות ההידרוג'ל שהוכנו היו בגודל אחיד ומפוזרות היטב, הודות לבקרה מדויקת של זרימת האלקטרופלואיד. ALGMS הצולבים עם יוני מתכת שונים הוכנו בטכניקת אלקטרוספריי מיקרופלואידית המשלבת שדה מיקרופלואידי ושדה חשמלי גבוה, ונחקרו תכונותיו האנטי-מיקרוביאליות, יכולת שחרור תרופות איטית ותאימות ביולוגית. טכנולוגיה זו טומנת בחובה הבטחה ליישום בפיתוח וייצור תרופות מתקדמות.

Introduction

מערכות אספקת תרופות הן מוקד מחקרי בתחום הנדסת ביו-רקמות, במטרה לשפר את יעילות ויעילות אספקת התרופות ולהפחית תגובות שליליות ותופעות לוואי1. בין מערכות אלה, מיקרוספרות הידרוג'ל, המאופיינות בתאימות ביולוגית טובה, תכונות מכניות מתכווננות ופלסטיות פונקציונלית, הן אחד הכלים הנפוצים ביותר להעמסה ומשלוח של תרופות2. הם יכולים לשמש הן לשחרור איטי ומבוקר של תרופות, לספק השפעות הגנה טובות לתרופות, להימנע או למזער השפעות לא ספציפיות של תרופות ברקמות אחרות, ולכוון משלוח תרופות למבני רקמות ספציפיים3. לכן, מיקרוספרות הידרוג'ל הפכו למערכת אספקת תרופות חדשה ויעילה, כאשר המחקר בתחום זה מתפתח בהדרגה4.

מיקרוספרות הידרוג'ל מסונתזות בדרך כלל מחומרים מתכלים, כולל פוליסכרידים, חלבונים ופולימרים טבעיים5. ביניהם, ALG הוא פוליסכריד תואם ביולוגית, מתכלה המופק מאצות חומות ימיות6. השרשרת המולקולרית שלו מכילה קבוצות הידרוקסיל וקרבוקסיל חופשיות שיכולות להצליב עם רוב הקטיונים הדו-ערכיים או הרב-ערכיים ליצירת מבנה הידרוג'ל בלתי מסיס במים עם רשת תלת ממדית5. מיקרוספרות הידרוג'ל שנוצרו על ידי ALG ניתן להמיר פוליאלקטרוליטים טעונים שלילית בתמיסות ניטרליות אלקליין. דחייה זו בין מטענים שליליים גורמת למיקרוספרות להתנפח, ומאפשרת שחרור של החומר הפעיל או התרופה העטופים. תכונות אלה הובילו להתייחסות למיקרוספרות ALG כנשאי תרופות מבטיחים הנמצאים בשימוש נרחב להעמסת תרופות ושחרור מבוקר7.

קיימות שיטות שונות להכנת מיקרוספרות הידרוג'ל. שיטות הכנה מסורתיות של ALGMS כוללות בדרך כלל את שיטת סול-ג'ל או שיטת תחליב-סול. שיטות אלה כוללות צעדים כגון משקעים, משקעים משותפים ותגובות ג'לציה כדי להשיג את מיקרוספרות המטרה8. בשנים האחרונות, עם ההתפתחות המתמדת של הטכנולוגיה המיקרופלואידית, שיטת האלקטרוספריי המיקרופלואידית הפכה בהדרגה לשיטת הכנה יעילה ומדויקת למיקרוספירה9. שיטה זו משתמשת בטכנולוגיה מיקרופלואידית כדי לרסס תמיסת פולימר באמצעות זרבובית מיקרו-עדינה כדי ליצור טיפות מיקרומטריות ומיקרוספרות במהלך תהליך הריפוי או הקישור הצולב,10. בהשוואה לשיטה המסורתית, אלקטרוספריי מיקרופלואידי מציע שליטה מדויקת בגודל חלקיקי המיקרספירה, ומורפולוגיה על ידי התאמת פרמטרים כגון קצב זרימת תמיסה, מתח וגודל זרבובית עדינה11. הוא גם מאפשר הכנה רציפה במהירות גבוהה של מיקרוספרות, שיפור יעילות ההכנה ושמירה על תנאי תגובה מתונים. בנוסף, ALGMS יכול להיות מוכן להיות בעל פונקציות שונות, כגון תרופות שחרור מבוקר זרזים טעונים, המאפשר יישום קל שלהם בתחומים שונים.

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להכנת מיקרוספרות ALG בשיטת אלקטרוספריי מיקרופלואידית. התהליך כולל העברת תמיסת ALG דרך מכשיר מיקרופלואידי וחשיפתה לאלקטרוספריי. הטיפות שהתקבלו נאספו בתמיסה שהכילה יוני מתכת שונים (Ca2+, Cu2+, Zn2+ ו-Fe3+) כדי ליזום את תגובת הקישור הצולב. תגובה זו משפרת את היציבות וההיצמדות של המיקרוספרות ומקנה להם פונקציות שונות. שיטה זו קלה לביצוע, והמיקרוספרות המסונתזות מציגות אחידות גודל טובה במורפולוגיה שלהן. נוסף על כך, חקרנו את הסגולות האנטי-בקטריאליות שלהם, את יכולת שחרור התרופות האיטי ואת התאימות הביולוגית. פרוטוקול זה יהיה שימושי להמשך פיתוח וייצור תרופות.

Protocol

הדם ששימש בניסויים התקבל מנקבות עכברים בדרגת SPF BALB/c במשקל 20-25 גרם ובנות כ-7 שבועות. ועדת האתיקה של ניסויים בבעלי חיים של מכללת ג'ג'יאנג שורן אישרה את כל הליכי הטיפול והניסויים בבעלי חיים.

1. הכנת פתרון

  1. יש לשקול ALG ולהמיס במים טהורים במיוחד על ידי ערבוב באמבט מים בטמפרטורה של 50°C לקבלת תמיסת ALG של 2%.
  2. הכן בנפרד חלק מסה עם 5% (או ריכוז המסה המולרית הוא 0.3 M) תמיסות של CaCl2, FeCl3, ZnSO4 ו- CuSO4 במים טהורים במיוחד. יוצקים כל תמיסה בנפרד לצלחת איסוף.

2. מכשיר אלקטרוספריי מיקרופלואידי

  1. קחו צינור נימי זכוכית והניחו אותו מעל להבת ניפוח כדי להתרכך, ואז מתחו אותו לקטרים שונים (50 מיקרומטר-500 מיקרומטר). חתכו את החלקים העדינים עם חותך זכוכית ולטשו בעדינות את יציאת החוד עם נייר זכוכית סיליקון קרביד באיכות גבוהה. לאחר הניקוי, חברו את הקצה העבה של צינור הנימים לצינור ארוך ואת הקצה השני של הצינור למחט ניפוק ולמזרק בנפח 5 מ"ל (איור משלים 1).
    הערה: קשה להכניס קצוות חדים של חתכי צינור זכוכית לצינור; לכן, יש לעגל את ההפסקה בקצה הלהבה.
  2. חבר את המזרק למשאבת המזרק המיקרופלואידית ואת צינור הנימים בקצה אחד למחזיק. חבר את תפס הקצה האדום במתח גבוה של ספק הכוח במתח גבוה למחט הניפוק של המזרק והנח את האטב הכסוף בנוזל האיסוף. תצורה זו יוצרת התקן אלקטרוספריי מיקרופלואידי פשוט (איור 1A).
    הערה: הנח את צינור הנימים בניצב לשולחן.

3. הכנת מיקרוספרות ALG

  1. הניחו את כלי האיסוף הנפרדים המכילים יוני מתכת שונים ישירות מתחת לצינור הנימים. הפעל את משאבת המזרק המיקרופלואידית ובחר Fast Forward כדי להפעיל את הצינור עם ALG, ולאחר מכן הגדר את קצב הזרימה המתאים (2 מ"ל / שעה).
  2. הפעל את מתג ההפעלה במתח גבוה וסובב את הידית כדי להגדיר את המתח המתאים (5-7 קילו וולט).
  3. הוסיפו תמיסת 20 מ"ל לכל אחת מצלחות הפטרי בקוטר 90 מ"מ כדי לאסוף מיקרוספרות ALG ליצירת ALGMS מוצלבים עם יוני מתכת שונים (איור 1B).
  4. ALG יוצרת מיקרוספרות תחת פעולת השדה החשמלי וכוח הכבידה בתמיסות איסוף יונים שונות תוך מספר שניות. שאפו את המיקרוספרות עם פיפטה מעוקרת והעבירו אותן לצינורות צנטריפוגות בודדות של 1.5 מ"ל כדי לקבל מיקרוספרות הידרוג'ל Zn2+, Ca2+, Cu2+ ו-Fe3+ -ALG (איור 1C). תייגו את הצינורות Zn-ALGMS, Ca-ALGMS, Cu-ALGMS ו-Fe-ALGMS.
    הערה: ניתן להשיג מיקרוספרות בקטרים שונים על ידי התאמת פרמטרים כגון מתח, קוטר קצה, קצב זרימה וריכוז תמיסה.
  5. קח כמות קטנה של microspheres מוכנים, לפזר אותם באופן שווה ככל האפשר PBS, ומניחים אותם תחת מיקרוסקופ להדמיה.
  6. נבחרו באופן אקראי 10 שדות תצפית באותה אצווה של מיקרוספרות, ייבאו את התמונות שיימדדו לתוכנת ImageJ, המירו את התמונות למצב גווני אפור מתאים, והשתמשו בטכנולוגיית פילוח הסף כדי להגדיר במדויק את שטח חלקיקי המטרה ולהתחיל את הפונקציה של ניתוח החלקיקים כך ש- ImageJ תוכל לזהות ולמדוד את חלקיקי המטרה. קבל נתונים על המיקרוספרות ולאחר מכן ייבא את הנתונים לתוכנת המקור לצורך ניתוח ומיפוי גודל חלקיקים.

4. בדיקת ביצועים מיקרוביאלית

  1. הכינו תרחיפים של 5 מ"ל של Staphylococcus aureus (S. aureus) ו-Escherichia coli (E. coli) עם עכירות חיידקית התחלתית של 0.2 mcF באמצעות מדיום Luria-Bertani נוזלי (LB).
  2. הוסף 10 מ"ל מכל תמיסה חיידקית ל -4 צינורות צנטריפוגות סטריליות בודדות של 15 מ"ל. לאחר מכן, הוסף 0.5 מ"ל של Zn-ALGMS, Ca-ALGMS, Cu-ALGMS ו- Fe-ALGMS ALG לכל צינור והנח אותם בשייקר בטמפרטורה קבועה ב- 37 ° C ו- 200 סל"ד למשך 12 שעות. הוסף כמות שווה של מלוחים לקבוצת הביקורת.
  3. לדלל כל פתרון חיידקי ל 105 פעמים עם מים סטריליים. השתמש חרוז זכוכית סטרילי כדי להפיץ 200 μL של תמיסה חיידקית על מדיום מוצק LB.
  4. מורחים את התמיסה במהירות ובאופן שווה על צלחת הציפוי, תוך הימנעות קדימה ואחורה באותו אזור. לאחר מכן, מניחים את הצלחות באינקובטור ב 37 ° C במשך 12 שעות. התבוננו במושבות של קבוצות שונות.
    הערה: כל ההליכים האספטיים צריכים להתבצע ליד מנורת אלכוהול. עיקור כלי תרבית מיקרוביאליים, כלי חיסון ואמצעי תרבית.

5. בדיקות שחרור סמים

  1. כדי להעריך את יכולת שחרור התרופה של מיקרוספרות שונות, השתמש באלבומין בסרום בקר (BSA) כתרופת מודל טעונה. הוסף 500 μL מכל מיקרוספירה (Ca-ALGMS, Cu-ALGMS, Zn-ALGMS ו- Fe-ALGMS) לתרחיף BSA של 1 מ"ג/מ"ל למשך 24 שעות.
  2. לבדיקת שחרור התרופה, יש להוסיף כל דגימה רוויה ל-5.0 מ' של מלח חוצץ פוספט (PBS; pH 7.4), ולאחר מכן תסיסה במשך 15 דקות ב-37°C עם רעידות מתמשכות ב-80 סל"ד.
  3. השתמש 100 μL של התמיסה ולהחליף את המדיום עם אחד טרי ב 1, 3, 6, 12, 24, 36, ו 48 שעות.
  4. כמת את ריכוזי החלבון העל-טבעי בזמנים ספציפיים באמצעות ערכת BCA בהתאם להוראות היצרן. למדוד כמותית את התרופה המשתחררת על ידי סמן אנזים כדי לקבל את הספיגה המתאימה ולהמיר את הערך הנמדד לריכוז התרופה בפועל על פי עקומת התקן. חשב את קצב שחרור התרופה באמצעות הנוסחה הבאה:
    אחוז שחרור התרופה = (ריכוז התרופה המשתחררת בנקודת זמן מסוימת / ריכוז התרופה הראשונית) x 100%
  5. במרווחי זמן קבועים, הסר נפח שווה של PBS מכל באר והחלף אותו בנפח שווה של מדיום טרי.

6. בדיקת המוליזה

  1. הניחו את Ca-ALGMS, Cu-ALGMS, Zn-ALGMS ו-Fe-ALGMS המוכנים ב-PBS ודגרו עליהם בטמפרטורה של 37°C למשך 24 שעות כדי לגבש את תמיסת הדגירה.
  2. קבל דם שלם מעכברי BALB/c בריאים על ידי פלבוטומיה עינית, שנאספו בצינורות נוגדי קרישה המכילים נתרן ציטראט. מערבולת וצנטריפוגה ב 1509 x גרם במשך 15 דקות כדי לקבל תאי דם אדומים.
  3. שטפו את תאי הדם האדומים 2x-3x עם PBS והכינו תמיסת תאי דם אדומים 10% עם PBS.
  4. הכנת ALGMS שונים: קח 500 μL מכל מיקרוספירה עבור קבוצת הניסוי, 1 מ"ל מים טהורים במיוחד (ddH2O) עבור קבוצת הביקורת החיובית, ו 1 מ"ל של תמיסת PBS עבור קבוצת הביקורת השלילית ולערבב כל אחד עם 20 μL של תמיסת תאי דם.
  5. לדגור על הדגימות ב 37 ° C במשך 4 שעות, צנטריפוגה ב 1509 x גרם, 15 דקות. שמור את supernatant בצד ולצלם את תאי הדם האדומים בכל קבוצה לאחר המוליזה.
  6. ניקח את שיעור ההמוליזה של קבוצת הביקורת החיובית כ- 100% ואת קבוצת הביקורת השלילית כ- 0%. למדוד את ערכי הספיגה של הסופרנאטנטים בכל קבוצה ולחשב את קצב ההמוליזה באמצעות הנוסחה:
    המוליזה (%) = (ערכי ספיגה של הסופרנאטנטים של כל קבוצה-
    ערכי ספיגה של מים מזוקקים בלבד) / (ערכי ספיגה של קבוצת הביקורת החיובית- ערכי ספיגה של מים מזוקקים בלבד) x 100

7. בדיקת תאימות Cytobiocompatibility

  1. שטפו את ה-ALGMS השונים 2x עם PBS והכניסו לצלחת פטרי של 5 מ"ל למשך 15 דקות והשליכו את הסופרנטנט.
  2. בנפרד להוסיף ALGMS שונים ב 0.2 מ"ל בתווך תרבית מלאה (DMEM) המכיל 10% FBS, לדגור ב 37 ° C במשך 24 שעות, ולסנן את התמיסה כדי לקבל את leachate.
  3. תרבית תאי NIH3T3 לצפיפות תאים של כ-70% בצלחות של 24 בארות, טפלת בתאי NIH3T3 בתמיסת שטיפה מיקרוספירית, והמשיכה לתרבית בתווך מלא למשך 24 שעות נוספות.
  4. הסר את מדיום תרבית התאים ושטוף את התאים עם PBS.
  5. הערך את כדאיות התא באמצעות בדיקת Calcein-AM/PI. קח 2.5 μL של פתרון Calcein-AM (4 mM) ו 12.5 μL של פתרון PI (2 mM) ולהוסיף אותם 5 מ"ל של 1x PBS ולערבב היטב כדי לקבל פתרון עבודה עם 2 μM Calcein-AM ו 5 μM PI.
  6. הוסף את פתרון העבודה ללוחות תרבית תאים שנזרעו בעבר ב 500 μL לכל באר, לדגור ב 37 ° C תחת הגנת אור במשך 15 דקות, ולצפות ולצלם תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך. הגדר שלושה עותקים משוכפלים עבור כל קבוצה.
  7. חישוב כדאיות התא לפי הנוסחה הבאה:
    כדאיות התא (%) = מספר התאים ברי קיימא / (מספר התאים ברי קיימא + מספר התאים המתים)

תוצאות

אפיון ALGMS מוצלב עם יוני מתכת שונים
המורפולוגיה האופטית של Ca-ALGMS, Cu-ALGMS, Zn-ALGMS ו-Fe-ALGMS מוצגת באיור 2, ומציגה ספריות טובה, משטח חלק, התפלגות גודל חלקיקים אחידה (איור משלים 2) וחד-פיזור מצוין. בהמשך ביצענו אפיון מיקרוסקופי באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM) וספ?...

Discussion

בפרוטוקול זה אנו מציגים שיטה להכנת ALGMS המבוססת על טכנולוגיית אלקטרוספריי מיקרופלואידית. השיטה פשוטה לתפעול ומניבה מספר רב של מיקרוספרות בעלות מעוגלות אחידה וקוטר נשלט. גישה זו מציעה נוחות לחוקרים ויכולה לקדם את המחקר והיישום של מיקרוספרות הידרוג'ל. בנוסף, על ידי הצלבה עם יוני מתכת שונים, ?...

Disclosures

אין לחשוף ניגודי עניינים.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה על ידי פרויקט מחקר של אוניברסיטת ג'ג'יאנג שורן (2023R053 ו- 2023KJ237).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
120 mesh screenSolarbio,ChinaYA0946
Alcohol burnerSolarbio,ChinaYA2320
BALB/c miceWukong Biotechnology,China
Bicinchoninic Acid Assay reagentMeilunbio,ChinaMA0082
Bovine Serum AlbuminLablead,China9048-46-8
CaCl2  powderAladdin,China10043-52-4
Calcein-AM/PIBiosharp,ChinaBL130A
Centrifuge tubesCorning,America430290
CuSO4  powderJnxinyuehuagong,China7758-99-8
DMEMGibicol,ChinaC11995500BT
FeCl3  powderAladdin,China7705-08-0
Fetal Bovine SerumHAKATA,ChinaHN-FBS
Glass tubesSartorius,GermanyCC0028
Light microscopyEvidentscientific,JapanBX53(LED)
Microfluidic syringe pumpLongerpump,EnglandLSP01-3A
NIH3T3HyGyte,ChinaTCM-C752
Petri dishThermofisher,America150464
Phosphate buffer salineThermofisher,America3002
Scanning electron microscopeThermofisher,AmericaAxia ChemiSEM
Sodium alginate powder Bjbalb,ChinaY13095
ZnSO4 powderJnxinyuehuagong,China7733-02-0

References

  1. Gong, J., et al. A review of recent advances of cellulose-based intelligent-responsive hydrogels as vehicles for controllable drug delivery system. Int J BiolMacromol. 264 (2), 130525 (2024).
  2. Zhao, Z., et al. Injectable microfluidic hydrogel microspheres for cell and drug delivery. Adv Funct. 31 (31), 2103339 (2021).
  3. Qiao, S., Chen, W., Zheng, X., Ma, L. Preparation of pH-sensitive alginate-based hydrogel by microfluidic technology for intestinal targeting drug delivery. Int J Biol Macromol. 254 (2), 127649 (2024).
  4. Lei, L., et al. Antimicrobial hydrogel microspheres for protein capture and wound healing. Mater Design. 215, 110478 (2022).
  5. Ju, Y., et al. Zn2+ incorporated composite polysaccharide microspheres for sustained growth factor release and wound healing. Mater Today Bio. 22, 100739 (2023).
  6. El-Sayed, N. S., Hashem, A. H., Khattab, T. A., Kamel, S. New antibacterial hydrogels based on sodium alginate. Int. J Biol Macromol. 248, 125872 (2023).
  7. Olukman Şahin, M., Şanlı, O. In vitro 5-fluorouracil release properties investigation from pH sensitive sodium alginate coated and uncoated methyl cellulose/chitosan microspheres. Int J Biol Macromol. 258 (1), 128895 (2024).
  8. Chi, H., Qiu, Y., Ye, X., Shi, J., Li, Z. Preparation strategy of hydrogel microsphere and its application in skin repair. Front Bioeng Biotechnol. 11, 1239183 (2023).
  9. Yang, L., et al. Bio-inspired dual-adhesive particles from microfluidic electrospray for bone regeneration. Nano Res. 16 (4), 5292-5299 (2022).
  10. Zheng, H., et al. Celastrol-encapsulated microspheres prepared by microfluidic electrospray for alleviating inflammatory pain. Biomater Adv. 149, 213398 (2023).
  11. Yang, L., Yang, W., Xu, W., Zhao, Y., Shang, L. Bio-inspired Janus microcarriers with sequential actives release for bone regeneration. Chem Eng J. 476, 146797 (2023).
  12. Yang, L., Sun, L., Zhang, H., Bian, F., Zhao, Y. Ice-inspired lubricated drug delivery particles from microfluidic electrospray for osteoarthritis treatment. ACS Nano. 15 (12), 20600-20606 (2021).
  13. Li, S., et al. Ultra-flexible stretchable liquid metal circuits with antimicrobial properties through selective laser activation for health monitoring. Chem Eng J. 482, 149173 (2024).
  14. Sukhodub, L., Kumeda, M., Sukhodub, L., Bielai, V., Lyndin, M. Metal ions doping effect on the physicochemical, antimicrobial, and wound healing profiles of alginate-based composite. Carbohydr Polym. 304, 120486 (2023).
  15. Daly, A. C., Riley, L., Segura, T., Burdick, J. A. Hydrogel microparticles for biomedical applications. Nat Rev Mater. 5 (1), 20-43 (2020).
  16. Bertsch, P., Diba, M., Mooney, D. J., Leeuwenburgh, S. C. G. Self-healing injectable hydrogels for tissue regeneration. Chem Rev. 123 (2), 834-873 (2023).
  17. Yang, L., et al. Biomass microcapsules with stem cell encapsulation for bone repair. Nanomicro Lett. 14 (1), 4 (2021).
  18. Wu, D., et al. NK-Cell-Encapsulated porous microspheres via microfluidic electrospray for tumor immunotherapy. ACS Appl Mater. 11 (37), 33716-33724 (2019).
  19. Nan, L., Zhang, H., Weitz, D. A., Shum, H. C. Development and future of droplet microfluidics. LOC. 24 (5), 1135-1153 (2024).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

208

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved