המטרה הכוללת של מחקר זה היא לבחון את ההשפעה של פגיעה בחוט השדרה על הדינמיקה של התפתחות כיב לחץ וריפוי במודל של בעלי חיים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא אינה פוגעת בתנועות בעלי חיים, והיא ניתנת לשחזור. מודל זה מספק פלטפורמה לחקר הדינמיקה של ריפוי פצעים ולבדוק אסטרטגיות טיפוליות שונות עבור חולה SCI.
לפני תחילת ההליך להבטיח הרדמה נכונה על ידי חוסר תגובה קמצוץ זנב. לגלח את השיער מעל הגב עם קוצץ חשמלי. לאחר מכן להחיל את קרם depilatory, ולהשאיר במשך שלוש דקות כדי להסיר את השיער הנותר.
לאחר שלוש דקות להסיר את קרם depilatory עם קרצוף רטוב לשטוף את הגב באופן דומה. ואז להחזיר את החיות לכלובים שלהם. למחרת הרדמה את בעלי החיים ולהחיל את משחת עיניים על הקרניות כדי להגן על העיניים מפני ייבוש במהלך ההליך הכירורגי.
לאחר מכן, לשפשף את עור החיה שלוש פעמים כל אחד עם קרצוף betadine ו 70% אתנול. לפני החתך, השתמש במזרק עם מחט 25 מד להזריק 100 microliters של 0.125% bupivacaine סביב אתר החתך כמו משכך כאבים. לספור לאחור מן הצלעות הצפות התואמות T13 כדי לזהות T8 כדי T12.
לאחר יצירת חתך של 1 עד 1.5 ס"מ, לאורך קו האמצע, על הגב, ברמה של חוליות T8 עד T12 לנקות את רקמת השומן התת עורית כדי לגשת לשרירים paraspinal. ואז לנתח אותם לאט כדי לחשוף את התהליכים ספין ולמינה משני הצדדים. זה מאוד קריטי לעשות הליך זה בזהירות רבה, כדי למנוע דימום מוגזם וכל פגיעה בחוט השדרה.
בצע כריתת למין של חוליות T9 עד T10 כדי לחשוף את חוט השדרה על ידי קילוף עדין של למינה עמוד השדרה באמצעות מדפים ניתוח מיקרו. השתמש במקלפות כדי לאבטח ולהרים את עמוד השדרה ב T8 כדי להגזים עקמומיות עמוד השדרה. לאחר מכן, השתמש במספריים עדין כדי לחתוך את חוט השדרה בין חוליות T9 ו- T10 כל הדרך לרצפה של תעלת החוליות כדי להבטיח מעבר מלא.
לאחר התבוננות transection מלא תחת מיקרוסקופ כירורגי להחיל חתיכת שומן תת עורי על האתר laminectomy כדי לספק הגנה נוספת על חוט השדרה לפני סגירת אתר כירורגי. לבסוף, לסגור את הפצע ולתפור את השרירים paravertebral ו fascia שטחית. ואז לסגור את העור באמצעות קליפים תפר.
מיד לאחר ניתוח SCI לשפשף את החלק האחורי של החיה עם betadine ו 70% אלכוהול. עבור כיב לחץ מתחת לאתר הפציעה בחוט השדרה השתמש במחט 25 מד להזריק 10 microliters של 0.125% bupivacaine פתרון באליפסה בעור הגב, ליד sacrum, עם נקודות 0.5 עד סנטימטר אחד זה מזה. הרם בעדינות קפל עור בגב העכבר וכריך אותו בין שני דיסקים מגנטיים.
מיד לאחר יישום מגנט להחזיר את בעלי החיים לכלובים בודדים להציב על כרית חימום עד להכרה מלאה הוא חזר. לאחר 12 שעות של יישום מגנט בקלילות הרדמה החיה עם isoflurane ולהסיר את המגנטים. צלם את אתרי הפצע כדי לתעד את המראה הראשוני של כיב הלחץ בנקודת הזמן אפס היום.
מכסים את הפצע בסרט הלבשה שקוף כדי למנוע ייבוש או זיהום. בית אחד בעלי החיים בעקבות ההליך. מיד לאחר הניתוח להזריק את החיה עם מיליליטר אחד של 0.9% מלוחים עבור הידרציה ו buprenorphine SR עבור משככי כאבים.
בצע פינוי ידני של שלפוחית השתן פעמיים ביום. הסר את הסרטונים הכירורגיים שבעה ימים לאחר ניתוח פגיעה בחוט השדרה. לאסוף דגימות עור פצועות מהעכבר המתת דם בנקודת הזמן הרצויה לאחר פגיעה בחוט השדרה אינדוקציה כיב לחץ העור.
תקן ב- 10%formalin למשך 24 שעות. לאחר 24 שעות מעבירים ל-70% אתנול ומאחסנים בארבע מעלות צלזיוס עד לאחסון. תמונה זו מתארת את היעלמות האפידרמיס בחיית בקרה ביום השלישי להסרת פוסט-מגנט.
החצים מציינים את קצות הפצע האפידרמליים הממוקמים במקום שבו רירית האפיתל מתדלדלת החוצה. בחיית הבקרה האפידרמיס מופיע שוב ביום השביעי. עבור פצעים שנוצרו מתחת לרמה של SCI, בעכברי SCI, הגירה איטית משמעותית נראית.
כאן, הדמות מתארת ריפוי פצעים איטי יותר וסגירה בעכברי SCI בהשוואה לעכברי הבקרה. כשל חיסוני עבור Ki67, סמן של תאים מתרבים המצוין על ידי החצים האדומים, גילה פחות התפשטות בקבוצת SCI. כתמים עבור CD31, סמן לכלי הדם המצוין על ידי החצים האדומים, גילה צפיפות כלי דם נמוכה יותר בקבוצת SCI.
לבסוף, immunostaining עבור אקטין שריר חלק אלפא גילה רמות נמוכות יותר של חלבון זה בפצעי העור מעכברי SCI. בעת ניסיון הליך זה חשוב לזכור למקם את המגנטים כראוי לפתח שני פצעים עגולים מופרדים על ידי עור שלם. זה יקטין את השונות בהתפתחות הפצע וריפוי.
כיבים בלחץ העור בחוט השדרה חולים פצועים להקנות עלויות משמעותיות למערכת הבריאות בארה"ב. מודל זה של בעלי חיים מספק פלטפורמה לבדיקת אסטרטגיות טיפוליות שונות כדי לסייע בריפוי כיב לחץ בחולים פצועים בחוט השדרה.
