We thank Mr. Hajime Ichijo for video recording and helpful advice concerning editing the video. We also thank the Osumi lab members for animal care. This work is supported by a Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Area, Neural Diversity and Neocortical Organization, from MEXT of Japan (to N. O.). T. K. was supported by a Research Fellowship of JSPS for Young Scientists.

NOTA: Gli esperimenti sugli animali sono stati condotti in conformità con il National Institutes of Health Guide per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio. Il Comitato per la Sperimentazione Animale della Facoltà di Medicina di Tohoku University ha approvato le procedure sperimentali qui descritte. 1. Anestesia e laparotomia <ol style="margin-left: 40px;"><li> Per la raccolta di sangue, utilizzare specifici ratti maschi Sprague-Dawley esenti da organismi patogeni. Digiunare i ratti per almeno 18 ore, fornendo acqua. Utilizzare pensionati ratti allevatore maschi a 6-8 mesi di età (550-650 g) per la raccolta di sangue. </li><li> Portata 2.5-4.0% isoflurano, che è un anestetico inalatorio, in una scatola collegata ad un apparecchio anestesia introdurre anestesia a 2,0-3,5 L / min per 10 min. Trasferire i ratti nella casella di introdurre l&#39;anestesia. <ol><li> Conferma anesthetization controllando la perdita della risposta alla stimolazione delle zampe con pinze. Coprire il naso di ratti wi° Una maschera collegata ad un apparecchio di anestesia per anestetizzare profondamente i ratti durante il prelievo. La concentrazione e flusso sono mantenuti a 2.5-4.0% e 2.0-3.5 L / min, rispettivamente. NOTA: alotano non deve essere utilizzato per l&#39;anestesia per inalazione perché embrioni coltivati ​​nel siero che vengono raccolti da ratti anestetizzati con questa mostra reagente un ritardo nello sviluppo embrionale rispetto a embrioni coltivati ​​nel siero ottenuti da ratti anestetizzati con isoflurano 22. </li></ol></li><li> Per evitare la contaminazione del pelo, disinfettare la pelle versando il 70% di etanolo sul ventre di ratto anestetizzato. Sollevare la pelle disinfettata e parete addominale in corrispondenza della zona inferiore con un paio di pinze e tagliare questi strati contemporaneamente verso la regione torace con un paio di forbici grandi per esporre gli organi interni. Riflettere l&#39;intestino di fuori della cavità addominale con un paio di pinze. </li><li> Tagliare la pelle e la parete addominale verso gli arti posteriori conpaio di forbici grandi per esporre ulteriormente la regione addominale posteriore. Riflettere il grasso extra al di fuori della cavità addominale con un paio di pinze. </li><li> Sollevare il grasso viscerale sulla linea mediana utilizzando due coppie di pinze e dividere accuratamente il grasso in una direzione parallela esporre l&#39;aorta addominale. Ripetere questa procedura per dividere il grasso viscerale in una direzione longitudinale di identificare facilmente la biforcazione dell&#39;aorta addominale. Inoltre, l&#39;aorta è pulsatile e può essere distinto dalla vena cava adiacente utilizzando questa caratteristica. </li><li> Sollevare il grasso intorno l&#39;aorta addominale e la biforcazione accuratamente con due coppie di pinze e separare il grasso sulla aorta addominale. </li></ol> 2. Raccolta di sangue <ol style="margin-left: 40px;"><li> Inserire delicatamente la punta di un ago G 21 collegato ad una siringa da 20 ml subito cranialmente alla biforcazione dell&#39;aorta, con il bordo inclinato verso il basso. Tenere la siringa con una solamano, e tirare la siringa lentamente per raccogliere 15 ml di sangue da un ratto maschio. </li><li> Rimuovere l&#39;ago dalla siringa, e versare il sangue in due tubi ghiacciati 10 ml sterili test (Figura 1A). Conservare le provette in ghiaccio fino centrifugazione per ritardare la formazione del coagulo. Ridurre il tempo di centrifugazione mediante centrifugazione diversi tubi in una sola volta. </li><li> Euthanize il ratto anestetizzato da toracotomia e tagliando il cuore o decapitazione. </li></ol> 3. Rat Siero Preparazione <ol style="margin-left: 40px;"><li> Centrifugare il sangue raccolto per 5 minuti a 1200 xg e temperatura ambiente (RT) per separare il sangue in strati superiore e inferiore (Figura 1C). </li><li> Conservare le provette a 4 ° C per 1,5-2 ore per risolvere il coagulo di fibrina. </li><li> Sollevare il coagulo di fibrina nello strato superiore usando un paio di pinze curve, e spremere il coagulo di fibrina per separare il siero. Quindi, premere il coagulo di fibrina con le pinze curve fronte downwards prossimità dell&#39;interfaccia tra i due strati (Figura 1D). </li><li> Ripetere passo 3.3 per staccare ulteriormente il coagulo di fibrina. </li><li> Centrifugare le provette per 5 minuti a 1200 xg e RT (Figura 1E). </li><li> Trasferire accuratamente il siero in una provetta sterile da 15 ml con una pipetta sterile in un armadio flusso d&#39;aria laminare. </li><li> Centrifugare il siero di ratto raccolti per 5 minuti a 1200 xg e RT per eliminare cellule rosse rimanenti. </li><li> Pool attenzione il siero in un nuovo tubo 15 ml sterilizzati utilizzando una pipetta sterile per evitare la contaminazione da globuli rossi residue al fondo della provetta (figura 1F). </li><li> Incubare il siero in un bagno d&#39;acqua a 56 ° C per 30 minuti per inattivare il sistema del complemento. </li><li> Raffreddare le provette di siero di ratto a RT nell&#39;armadio aria a flusso laminare. Il siero deve essere frazionare a 10 ml in provette sterili individuali. Conservare le provette a -20 ° C fino al momento dell&#39;uso (Figura 1H). </li></ol>

<ol>
	<li>New, D. A. T., Copp, A. J., Cockroft, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introduction.">Introduction.</a> Mammalian Postimplantation Embryos. A Practical Approach. , 1-14 (1990).</li><li>Eto, K., Takakubo, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+development+of+rat+embryos+in+culture+during+the+period+of+craniofacial+morphogenesis.">Improved development of rat embryos in culture during the period of craniofacial morphogenesis.</a> J Craniofac Genet Dev Biol. 5, 351-355 (1985).</li><li>Takahashi, M., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+method+of+rodent+whole+embryo+culture+using+the+rotator-type+bottle+culture+system.">The method of rodent whole embryo culture using the rotator-type bottle culture system.</a> J Vis Exp. (42), e2170 (2010).</li><li>New, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+embryo+culture,+teratogenesis,+and+the+estimation+of+teratologic+risk.">Whole embryo culture, teratogenesis, and the estimation of teratologic risk.</a> Teratology. 42, 635-642 (1990).</li><li>Matsuo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mutation+in+the+Pax-6+gene+in+rat+small+eye+is+associated+with+impaired+migration+of+midbrain+crest+cells.">A mutation in the Pax-6 gene in rat small eye is associated with impaired migration of midbrain crest cells.</a> Nat Genet. 3, 299-304 (1993).</li><li>Nomura, T., Holmberg, J., Frisen, J., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pax6-dependent+boundary+defines+alignment+of+migrating+olfactory+cortex+neurons+via+the+repulsive+activity+of+ephrin+A5.">Pax6-dependent boundary defines alignment of migrating olfactory cortex neurons via the repulsive activity of ephrin A5.</a> Development. 133, 1335-1345 (2006).</li><li>Yamamoto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nodal+antagonists+regulate+formation+of+the+anteroposterior+axis+of+the+mouse+embryo.">Nodal antagonists regulate formation of the anteroposterior axis of the mouse embryo.</a> Nature. 428, 387-392 (2004).</li><li>Inoue, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+cadherins+in+maintaining+the+compartment+boundary+between+the+cortex+and+striatum+during+development.">Role of cadherins in maintaining the compartment boundary between the cortex and striatum during development.</a> Development. 128, 561-569 (2001).</li><li>Takahashi, M., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pax6+regulates+specification+of+ventral+neurone+subtypes+in+the+hindbrain+by+establishing+progenitor+domains.">Pax6 regulates specification of ventral neurone subtypes in the hindbrain by establishing progenitor domains.</a> Development. 129, 1327-1338 (2002).</li><li>Calegari, F., Haubensak, W., Yang, D., Huttner, W. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convergent+extension+analysis+in+mouse+whole+embryo+culture.">Convergent extension analysis in mouse whole embryo culture.</a> Methods Mol Biol. 839, 133-146 (2012).</li><li>Kikkawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dmrta1+regulates+proneural+gene+expression+downstream+of+Pax6+in+the+mammalian+telencephalon.">Dmrta1 regulates proneural gene expression downstream of Pax6 in the mammalian telencephalon.</a> Genes Cells. 18, 636-649 (2013).</li><li>Tabata, H., Nakajima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+in+utero+gene+transfer+system+to+the+developing+mouse+brain+using+electroporation:+visualization+of+neuronal+migration+in+the+developing+cortex.">Efficient in utero gene transfer system to the developing mouse brain using electroporation: visualization of neuronal migration in the developing cortex.</a> Neuroscience. 103, 865-872 (2001).</li><li>Fukuchi-Shimogori, T., Grove, E. 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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+backscatter+microscopy+of+mouse+embryos.">Ultrasound backscatter microscopy of mouse embryos.</a> Methods Mol Biol. 135, 235-243 (2000).</li><li>Pierfelice, T. J., Gaiano, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound-guided+microinjection+into+the+mouse+forebrain+in+utero+at+E9.5.">Ultrasound-guided microinjection into the mouse forebrain in utero at E9.5.</a> J Vis Exp. (45), e2047 (2010).</li><li>Quinlan, G. A., Khoo, P. L., Wong, N., Trainor, P. A., Tam, P. 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E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+tube+closure+in+mouse+whole+embryo+culture.">Neural tube closure in mouse whole embryo culture.</a> J Vis Exp. (56), e3132 (2011).</li><li>Machado, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstruction+of+phrenic+neuron+identity+in+embryonic+stem+cell-derived+motor+neurons.">Reconstruction of phrenic neuron identity in embryonic stem cell-derived motor neurons.</a> Development. 141, 784-794 (2014).</li><li>Glanville-Jones, H. C., Woo, N., Arkell, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+whole+embryo+culture+with+commercially+available+reagents.">Successful whole embryo culture with commercially available reagents.</a> Int J Dev Biol. 57, 61-67 (2013).</li><li>Ornoy, A., Yacobi, S., Yaffee, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+culture+of+11.5-day-old+rat+embryos+in+DMEM/F12+and+20%+fetal+bovine+serum.">A simple method of culture of 11.5-day-old rat embryos in DMEM/F12 and 20% fetal bovine serum.</a> J Anat. 203, 419-423 (2003).</li><li>Moore-Scott, B. A., Gordon, J., Blackburn, C. C., Condie, B. G., Manley, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+serum-free+in+vitro+culture+technique+for+midgestation+mouse+embryos.">New serum-free in vitro culture technique for midgestation mouse embryos.</a> Genesis. 35, 164-168 (2003).</li><li>Kalaskar, V. K., Lauderdale, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Embryonic+Development+in+a+Serum-free+Whole+Embryo+Culture+System.">Mouse Embryonic Development in a Serum-free Whole Embryo Culture System.</a> J Vis Exp. (85), e50308 (2014).</li></ol>

No conflicts of interest are declared.

Risultati riproducibili in esperimenti WEC dipendono l&#39;uso di siero di ratto IC alta qualità e accurata tecnica embrione dissezione 3. Non accorciare il periodo di digiuno prima del prelievo del sangue, perché il digiuno è necessario standardizzare le concentrazioni di glucosio nel sangue. Ratti femmina non devono essere utilizzati per la preparazione di siero perché i livelli ormonali cambiano in femmine secondo il ciclo estrale, e tali cambiamenti di ormoni estradiolo non sono adatti per colture emb...

Una varietà di modelli animali sono utilizzati in biologia dello sviluppo per studiare meccanismi di sviluppo a livello molecolare e cellulare. Ad esempio, anfibi e aviarie sono stati ampiamente usati come animali modello classico che sono adatti per la manipolazione diretta di embrioni perché questi embrioni si sviluppano al di fuori della madre. In contrasto con questi animali, embrioni mammiferi crescono nell&#39;utero della madre, e la crescita in fasi successive è strettamente dipendente dalla funzione dell&#39;utero. Pertanto, è tipicamente difficile da manipolare direttamente embrioni di mammifero come quelli di topo e nel ratto nelle fasi iniziali. Nel 1960, Denis New istituito un mammifero intera coltura degli embrioni (WEC), tecnica che utilizza apparecchiature WEC con un apporto di ossigeno continuo e controllo di calore 1. In WEC, topo e ratto embrioni possono crescere ex vivo (cioè, al di fuori dell&#39;utero). Anche se la tecnica del WEC è stato spesso utilizzato in teratologia con l&#39;aggiunta di vari chemicAl composti nel terreno di coltura, questa tecnica è stata utilizzata anche in diversi studi di biologia dello sviluppo per esaminare unici meccanismi di sviluppo nei mammiferi 2-4. Ad esempio, WEC è combinata con altre tecniche, quali l&#39;etichettatura delle cellule, in wild-type e mutanti embrioni utilizzando colorante fluorescente 5, il trapianto di cellule 6, e l&#39;introduzione del gene via lipofezione 7 ed elettroporazione 8-13. Recentemente, in manipolazione utero è stato utilizzato per analizzare i processi di sviluppo in embrioni di roditori in fasi successive ed è stato combinato con tecniche di elettroporazione 14-16. Tuttavia, queste tecniche non sono adatti per la manipolazione di postimpianto e midgestation embrioni causa di difficoltà a raggiungere iniezione locale accurata della soluzione di DNA in embrioni nelle fasi iniziali. Sebbene il trapianto di cellule eco-guidata e l&#39;iniezione di vettori virali in embrioni precoci (cioè, Sono stati segnalati E8.5-E-9.5 nel topo) in utero precedentemente 17,18, ottime capacità sono necessarie per eseguire questi esperimenti con un alto tasso di successo. Pertanto, WEC con alta accessibilità ex vivo ha dei vantaggi rispetto alla manipolazione di topo e ratto embrioni. Subito centrifugati (IC) siero di ratto preparati da ratti maschi è spesso usato per le medie WEC. Quando gli embrioni sono coltivate nella fase post-impianto (cioè, prima del E8.0 nel topo o E10.0 nel ratto), una miscela di terreno sintetico e siero di ratto IC viene spesso usata come mezzo per WEC 19. Tuttavia, per gli embrioni di cultura a metà della gestazione (cioè., E8.0-12.5 in embrioni di topo o E10.0-E14.5 in embrioni di ratto), siero al 100% dovrebbe essere utilizzato come mezzo perché nessun media alternativi attualmente disponibili consentono embrioni a crescere normalmente in vitro per più di 2 giorni. La preparazione del siero di ratto di alta qualità èun passo fondamentale per il raggiungimento riproducibilità negli esperimenti WEC. Rispetto a centrifugazione differite, IC ha il vantaggio di ridurre emolisi quando il siero viene raccolto comprimendo il coagulo di fibrina perché la maggior parte dei globuli rossi sono stati già separato dal coagulo di fibrina. Come siero di ratto emolitica non riesce a sostenere la crescita normale di ratto e di topo embrioni, preparazione del siero utilizzando immediata centrifugazione è preferibile preparato utilizzando centrifugazione ritardato. Il nostro protocollo contiene due passaggi aggiuntivi rispetto ad altri protocolli 18-20 (es., Conservare il sangue raccolto in ghiaccio prima della prima centrifugazione e mantenere i campioni di sangue raccolti per 2 ore a 4 ° C dopo la prima centrifugazione). Il primo passo può ritardare la formazione del coagulo di sangue, e quest&#39;ultimo passo promuove la solidificazione del coagulo di fibrina per facile spremitura. Pertanto, il nostro protocollo può essere utilizzato da principianti. Tuttavia, la riproduzione di raccolta del sangue e sieroestrazione con precisione semplicemente facendo riferimento ai libri di protocollo è estremamente difficile 19-21. In questo articolo video, dimostriamo il nostro protocollo standard per la preparazione di siero ottimale ratto IC, che comprende la raccolta di sangue dall&#39;aorta addominale di ratti maschi e estrazione del siero mediante centrifugazione.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="892">
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:156px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:401px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>B506</td>
			<td>For anesthesia of rats.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Large scissors</td>
			<td>Napox</td>
			<td>B-7H</td>
			<td>Stelized scissors for cutting the skin and muscle of rats.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Curved forceps</td>
			<td>Napox</td>
			<td>A-3-2</td>
			<td>Stelized forceps for picking up the skin of rats and squeezing the fibrin clot.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sprague-Dawley (SD) rat</td>
			<td>Charles Rivers Laboratories</td>
			<td></td>
			<td>Retired male rats from colony in the lab or purchased retired male rats.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Syringe (20 ml)</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SS-29ESZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Needle (21G x 5/8&#34;)</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>NN-2116R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sterile test (spitz) tube (10 ml)</td>
			<td>ASIAKIZAI</td>
			<td style="width:119px;">1101C000B-10</td>
			<td>For collection of boold</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sterile disposable pipette</td>
			<td>Eiken Chemical</td>
			<td>CD2000 No.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sterilie disposable tube (15 ml)&#160;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>2196</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture

Mammalian whole embryo culture (WEC) is a widely used technique for examining pharmacological toxicity in developing mouse and rat embryos and for investigating the mechanisms of developmental processes. Immediately centrifuged (IC) rat serum is commonly used for WEC and is essential for the growth and development of cultured mouse and rat embryos ex vivo. For the culture of midgestation embryos (i.e., E8.0-12.5 for the mouse, and E10.0-14.5 for the rat), 100% rat serum is the best media for supporting the growth of the embryo ex vivo. To prepare rat serum suitable for WEC, the collected blood should be centrifuged immediately to separate the blood cells from the plasma fraction. After centrifugation, the fibrin clot forms in the upper layer; this clot should be squeezed gently using a pair of sterile forceps and subsequently centrifuged to completely separate the blood cells from the serum. In this video article, we demonstrate our standard protocol for the preparation of optimal IC rat serum, including blood collection from the abdominal aorta of male rats and extraction of the serum by centrifugation.

La Figura 1 mostra i risultati rappresentativi delle procedure descritte per la separazione delle cellule del sangue e siero. Abbiamo tipicamente ottiene 15 ml di sangue da un ratto maschio, in pensione (Figura 1A). Per centrifugazione, il sangue raccolto può essere separato in uno strato superiore contenente siero e il coagulo di fibrina, che è indicato con una freccia, e uno strato inferiore contenente i globuli (Figura 1C). È importante sottolineare che i campioni...

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Preparation of Rat Serum Suitable for Mammalian Whole Embryo Culture

Mammalian whole embryo culture (WEC) is widely used in teratology and developmental biology. Immediately centrifuged rat serum is commonly provided as a medium for both mouse and rat WEC. In this video, we demonstrate our standard protocol for the preparation of high-quality rat serum suitable for mammalian WEC.

Preparazione di Rat Siero Adatto per mammiferi tutta la cultura Embrione

Mammalian whole embryo culture (WEC) is a widely used technique for examining pharmacological toxicity in developing mouse and rat embryos and for ...

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Biology

13.7K Views.  Jichi Medical University. Mammalian whole embryo culture (WEC) is widely used in teratology and developmental biology. Immediately centrifuged rat serum is commonly provided as a medium for both mouse and rat WEC. In this video, we demonstrate our standard protocol for the preparation of high-quality rat serum suitable for mammalian WEC.