Questo protocollo fornisce un modello murino di estrazione molare mandibolare che viene raramente introdotto negli studi di rigenerazione ossea disponibili. Lo sviluppo di un modello di estrazione molare mandibolare murina è necessario come mandibola che sia più comparabile e coerente tra i diversi gruppi di intervento. Le implicazioni di questa tecnica non si estendono verso la terapia di alcuna malattia.
Tuttavia, può aiutare la guarigione clinica e la rigenerazione dell'osso mascellare a lungo termine, aiutando a rivedere i meccanismi alla base di questo processo. Questa tecnica è stata sviluppata per aiutare gli studi, rivelando i meccanismi di guarigione e rigenerazione disponibili. Purtroppo, questo metodo non può essere applicato ad altri sistemi.
Iniziare ad eliminare la resistenza distale del topo anestetizzato tenendo medialmente il molare con una pinzetta. Quindi forzare un ago di gauge 23 nell'osso alveolare buccale della radice distale e rendere un intervallo. Quindi, passare a un ago da 25 gauge per continuare l'espansione dell'intervallo.
Avanzare delicatamente verso l'area periapicale mentre ruota lentamente l'ago in avanti e languidamente per spingere la radice fuori dalla fossa alveolare. Per eliminare la resistenza mesiale, inserire un ago di gauge 23 nella forcella della radice e sollevare il molare di occlusalmente. Dopo aver tenuto saldamente il molare, prendere un altro ago di gauge 23 e forzarlo nella membrana parodontale mesiale linguale per creare un intervallo.
Quindi utilizzare un ago calibro 25 e ruotare lentamente in avanti e buccalmente. Se alcuni ostacoli sottostanti impediscono la lussazione del molare, utilizzare un ago di calibro 26 per penetrare nell'apice della radice e ripetere le operazioni. Durante l'estrazione finale, estrarre il dente assicurandosi che la corona si alzi al di sopra del piano occlusale e che si possano vedere chiaramente due radici intatte.
Dopo aver estratto con successo il primo molare mandibolare, applicare cotone asciutto per fermare l'emorragia, riposizionare la lingua, somministrare l'analgesia e mettere il topo su una piastra riscaldante a temperatura costante fino a quando non si riprende dall'anestesia. L'alveolo del dente si è immediatamente riempito con l'estrazione post coagulo. Il processo di guarigione della presa è stato osservato per una settimana.
Si formarono alcune ossa trabecolari simili a spugne ma il coagulo rimase. Nel processo di guarigione, la presa è stata riempita con ossa di spugna dopo due settimane che indicano il completamento della rigenerazione. Un regolatore principale nelle differenziazioni degli osteoblasti Sp7 è stato ampiamente espresso nelle cellule del midollo osseo nel margine che è il fronte osseo che forma.
Sotto lo stato di omeostasi le ossa trabecolari erano consistenti e confluenti con blocchi di cellule del midollo osseo cosparsi come isole. A una settimana dall'intervento, numerose cellule esprimenti Sp7 hanno riempito la cavità di estrazione con osso trabecolare appena formato cosparso intorno. A quattro settimane dopo l'intervento, la condizione si è invertita e si è trasformata in gran parte in fusione con l'osso trabecolare.
L'attività delle cellule che esprimono Sp7 è diminuita ad un livello che si avvicina allo stato di omeostasi. Il può anche essere eseguito per dimostrare il processo di rigenerazione neonatale. Questa tecnica può aiutare i ricercatori a svelare i meccanismi sottostanti del processo di guarigione e rigenerazione disponibile fornendo un nuovo modello murino.
