Il cateterismo intratecale è stato ampiamente applicato negli esperimenti sugli animali, in particolare quelli sul dolore neuropatico. Tuttavia, i metodi tradizionali presentano ancora diverse limitazioni. Sebbene alcuni ricercatori abbiano tentato di migliorare i metodi tradizionali, i metodi disponibili devono ancora essere modificati.
In questo articolo, introduciamo un metodo modificato per il cateterismo intratecale nei ratti che rappresenta un approccio semplice, conveniente e affidabile per la somministrazione intratecale ripetitiva di farmaci. Preparare un tubo PE10 lungo 15 centimetri. Inserire un filo di acciaio inossidabile lungo 20 centimetri con due estremità lucidate nel tubo PE10 come supporto e segnare il tubo a due centimetri da un'estremità.
Taglia la punta affilata di un ago da 22 G e sigilla l'estremità distale con un paio di pinze. Tagliare un catetere epidurale in frammenti di un centimetro. Quindi inserire questi frammenti nell'ago 22G sharptipfree e sigillare l'estremità distale con un paio di pinze diritte riscaldate.
Questo apparecchio era chiamato tappo di tenuta del tubo. Preparare una fascia antiallergica da 0,3 centimetri per 0,5 centimetri con un paio di forbici. Preparare gli strumenti per il cateterismo intratecale, che sono stati sterilizzati prima dell'intervento chirurgico.
Includeva pinze dentate, forbici, un apparecchio per la sacca, un manico per bisturi e lame numero 10. Sterilizzare il tubo PE10 e il filo guida con etanolo per circa due ore. Anestetizzare i ratti con il 3% di isoflurano alla velocità di flusso di tre litri al minuto.
Metti un topo sul tavolo operatorio e la zampa posteriore è stata tagliata con un paio di pinze. L'assenza di movimento del polo posteriore in risposta alla stimolazione ha confermato il successo dell'anestesia. L'analgesia è stata somministrata mediante iniezione intramuscolare di un milligrammo per chilogrammo di meloxicam prima del cateterismo intratecale.
Rimuove i peli sulla regione della colonna lombare della schiena e sull'area tra due orecchie con un rasoio. Posizionare una provetta da centrifuga sotto l'addome del ratto in corrispondenza della giunzione dell'anca. Sterilizzare i siti chirurgici con soluzione di povidoneiodio e soluzione di etanolo tre volte.
Coprire il ratto con una medicazione asettica ed esporre i siti chirurgici. E poi lavare con soluzione fisiologica normale prima dell'intervento chirurgico. Determinare la posizione dello spazio intervertebrale tra L5 e L6, localizzando il processo spinale di L6 nel punto medio tra le creste iliache bilaterali sinistra e destra.
Fissare la pelle con il pollice sinistro e l'indice dell'operatore e poi praticare un'incisione della linea mediana lunga tre o quattro centimetri appena sopra il processo spinoso tra L4 e S1. Separare senza mezzi termini i tessuti sottocutanei con un paio di forbici. Localizzare nuovamente lo spazio intervertebrale tra L5 e L6. Bloccare e sollevare il processo dorsale L5 con un paio di pinze dentate per espandere lo spazio intervertebrale.
Quindi separa senza mezzi termini i muscoli intorno al corpo vertebrale con un paio di forbici nella parte superiore del processo dorsale L6 era completamente esposto. Quando il processo dorsale L5 viene sollevato con un paio di pinze dentate e lo spazio intervertebrale viene espanso da un altro paio di pinze, pulire lo spazio intervertebrale da L5 a sei con un batuffolo di cotone fino a quando l'area a V invertita non è completamente esposta. Perforare la colonna vertebrale con un ago da 23G nell'area a V rovesciata, appena sotto la parte superiore del processo dorsale L6.
Inserire con cautela il tubo PE10 contenente filo di acciaio inossidabile in un canale spinale nel punto di puntura inclinato di 30 gradi verso la coda. L'angolo di inserimento è stato regolato fino a quando il tubo PE10 non è stato inserito con successo senza alcuna resistenza. Quando l'area contrassegnata del tubo PE10 raggiunge il muscolo posteriore, il cateterismo viene interrotto.
Rimuove lentamente il filo inossidabile dal tubo PE10, quindi collega il tubo PE10 a una siringa, attraverso la quale vengono iniettati 20 microlitri di soluzione fisiologica. Dopo la rimozione della siringa, la soluzione fisiologica potrebbe essere fluita continuamente fuori dal tubo PE10, indicando che il tubo PE10 è stato inserito con successo nello spazio subaracnoideo. Una volta confermato che il PE10 two non è ostruito, sutura i muscoli su un lato del corpo vertebrale con una sutura a quattro zeri e fare un nodo.
Quindi legare la sutura attorno al tubo PE10 e fare un altro nodo. Non tagliare la sutura e suturare i muscoli dall'altro lato. Legare nuovamente la sutura attorno al tubo PE10.
Fai un terzo nodo e taglia la sutura. Fai un'incisione lunga 0,5 centimetri a un centimetro appena sotto il punto medio tra le orecchie. Separare senza mezzi termini i tessuti sottocutanei con un paio di forbici.
E inserire il tubo di metallo attraverso l'incisione verso la coda. Fino a quando la punta non è visibile nell'incisione lombare. Inserire l'estremità distale del tubo PE10 nel tubo della sonda fino a quando la sonda PE10 non esce dall'altra estremità della sonda della sonda della sonda della trasmissione.
Quindi ritira delicatamente il gavage. Quando si conferma che il tubo PE10 non è ostruito, sutura i muscoli rimanenti attorno all'incisione lombare con una sutura a quattro zeri. Lega la sutura attorno al tubo PE10 e fa un altro nodo.
Fissare nuovamente il tubo PE10. Suturare la pelle, evitando danni al tubo PE10, quindi suturare la pelle del collo con una sutura a quattro zero. Legare la sutura attorno al tubo PE10 e fare un nodo per fissare il tubo PE10.
Una volta che il tubo PE10 è stato nuovamente confermato non ostruito, sigillare l'estremità extracorporea del tubo PE10 con un tappo di chiusura. Il tubo PE10 è stato asciugato con un pezzo di tessuto e una fascia antiallergica è stata legata più volte attorno al tubo PE10 per prevenire la retrazione del tubo PE10 durante il movimento del ratto. Dopo l'intervento chirurgico, rimetti il ratto nella sua gabbia e monitoralo attentamente durante il recupero dall'anestesia fino a quando non riprende conoscenza.
Dopo che il ratto è completamente sveglio, rimuovere il tappo di chiusura e iniettare 20 microlitri di lidocaina al 2% nel tubo PE10 alla velocità di 0,2 microlitri al secondo tramite siringa di Hamilton, seguita dall'iniezione di 10 microlitri di soluzione fisiologica normale. Sigillare il tubo PE10 con un tappo di chiusura. Metti un topo sul tavolo e osserva attentamente.
La paralisi degli arti inferiori dopo l'iniezione intratecale di lidocaina, indica il successo del cateterismo. La paralisi degli arti posteriori dura solitamente circa 30 minuti. Monitorare attentamente il ratto durante il periodo di recupero fino al completo recupero della funzione degli arti.
La paraplegia completa di entrambi gli arti inferiori dei ratti dopo l'ingiunzione intratecale di lidocaina ha indicato un cateterismo riuscito. Confronto del tasso di successo del cateterismo tra i nostri metodi modificati e il metodo precedentemente riportato. Il tasso di successo del cateterismo intratecale per il nostro metodo modificato è stato del 95%, che era maggiore del tasso dell'88% raggiunto con il metodo riportato da Hou et al.
Confronto della velocità del catetere a lunga permanenza tra il nostro metodo modificato e il metodo precedentemente riportato. Il tasso di catetere a lunga permanenza nei giorni due, cinque e sette dopo il cateterismo intratecale è stato rispettivamente del 94%81% e del 65%, in uno studio di Storkson et al. Il tasso di catetere a lunga permanenza a due, cinque e sette giorni dopo il cateterismo intratecale è stato rispettivamente del 95%, 90% e 85% per il nostro metodo.
In conclusione, il metodo modificato per il cateterismo intratecale può servire come strumento utile per l'intratecale ripetitivo e la somministrazione di farmaci e rappresenta un modo semplice, conveniente e affidabile per accorciare la durata degli esperimenti.
