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要約

研究における豚の使用は近年増加しています。それにもかかわらず、ブタは困難な気道解剖学的構造を特徴としています。内視鏡ガイド下気管内挿管を行う方法を実証することにより、本プロトコルは、実験動物の安全性をさらに高め、動物の苦痛や不必要な死を回避することを目的としています。

要約

気管内挿管は、安全な気道または高い換気圧を必要とするさまざまな介入のためのブタモデルにおけるトランスレーショナル研究の基本的な要件であることがよくあります。気管内挿管は困難なスキルであり、最適な条件下で高い成功率を達成するためには、気管内挿管の成功回数を最小限に抑える必要がありますが、これは非麻酔学の研究者にとっては達成できないことがよくあります。特定のブタ気道解剖学的構造のために、困難な気道が通常想定され得る。安全な気道を確立することが不可能であると、実験動物の怪我、有害事象、または死亡につながる可能性があります。前向き無作為化制御評価アプローチを使用すると、光ファイバー支援気管内挿管には時間がかかりますが、臨床的に関連する酸素飽和度の低下を引き起こすことなく、従来の挿管よりも初回通過成功率が高いことが示されています。このモデルは、内視鏡ガイド気管内挿管の標準化されたレジメンを提示し、特に直接喉頭鏡 検査による 気管内挿管の技術に不慣れな研究者に安全な気道を提供します。この手順は、動物の苦しみと不必要な動物の損失を最小限に抑えることが期待されています。

概要

気管内挿管は、気道の確保または高い換気圧(心肺蘇生法中の換気1や急性呼吸窮迫症候群2など)を必要とするさまざまな介入、または声門上気道装置による内部圧迫によって脳血流が損なわれないことを必要とするさまざまな介入のためのブタモデルにおけるトランスレーショナル研究の基本的な要件であることがよくあります3これは、ブタ4,5で予想される困難な気道の文脈で代替として時折伝播されます。

ブタの肺生理機能はヒトと同様の特徴を示していますが6、ブタの口腔気管解剖学的構造の特定の違いにより、気道の確保が著しく困難な場合があります7。ブタの鼻は非常に大きな舌を有する狭い開口部を有し、喉頭は非常に可動性であり、そして喉頭蓋は比較的大きく、軟口蓋まで伸びる自由端を有する。尾側では、喉頭は気管と鈍角を形成します。披裂軟骨は大きい 8.気道の最も狭い部分は声門下レベル9であり、子供の気道解剖学的構造に匹敵します10。ブタの喉頭は非常に可動性であるため、気管内チューブの端が声帯を通過するリスクがありますが、喉頭は最大数センチメートルしか尾側に変位せず、正しい挿管と間違われる可能性があります8,11。さらに、食道挿管は、ブタの気道管理を扱う際の一般的なリスクです12。

実験または早期死亡率に対応する悪影響を伴う困難または不可能な気管内挿管の割合は体系的に記録されていませんが、いくつかの症例報告が発表されています13,14。ヒトにおいて、予想外に困難な従来の挿管15の状況において可撓性挿管内視鏡を使用する可能性がある。さまざまな誤った挿管がこの措置に先行することがよくあります。これらの反復挿管の試みは、ヒトにおける有害事象と関連している16、17、特に気道合併症18。このようなイベントは、最も単純なケースでは実験の交絡変数を表すため、試験動物では有害です。最悪の場合、それらは動物の不必要な損失につながる可能性があります。

本研究では、ヒトにおいて予想される困難な気道管理のガイドラインに基づいてモデルを開発しました15、19、20、21、22、23、24。以前、同様の技術が人間の研究で光ファイバー挿管を学習するために説明されています25,26。このレポートで提示されたプロトコルは、標準化された適応が容易な挿管モデルを提供することを目的としており、気道以外の専門家がブタの気管内挿管を成功裏に安全に実行できるようにします。

プロトコル

このプロトコルの実験は、州および施設の動物管理委員会(ドイツ、コブレンツ、ラインラントプファルツ、承認番号G20-1-135)によって承認されました。実験はARRIVEガイドラインに従って実施した。全体として、平均体重30 kg±2 kg、12〜16週齢の麻酔をかけた雄豚10頭(Sus scrofa domestic a)が本研究に使用されました。

1.動物の準備

  1. ストレスを最小限に抑えるために、動物が通常の環境を維持します。誤嚥のリスクを下げるために、予定された実験の6時間前に食物を差し控えますが、水へのアクセスを許可します。
  2. ミダゾラム(0.5 mg / kg)とアザペロン(2-3 mg / kg)の併用注射( 材料表を参照)でブタを鎮静させ、筋肉内注射用の針(20 G)で臀筋または首に注射します。.鎮静が始まるまで(15〜20分)、動物を邪魔しないでください。
    注:国の規制によっては、鎮静剤の投与が精査の対象となる場合があり、訓練を受けた獣医師の監督が必要な場合と不要な場合があります。実験を計画する前に、地方自治体に相談してください。
  3. 鎮静動物を厩舎から実験室に輸送します。輸送時間は適切な鎮静時間(ここでは30〜60分)を超えてはなりません。外気温に応じて毛布で体を覆うなど、動物が低体温(38°C未満)にならないように十分な保温を確保してください。
  4. 耳または尾にクリップされたセンサー( 材料の表を参照)を使用して、末梢酸素飽和度(SpO2)を監視します。
  5. 末梢静脈カニューレ(22 G)を耳の静脈に挿入する前に、消毒剤(アルコール性)で皮膚を消毒します。その領域にスプレーし、一度拭いてからもう一度スプレーし、消毒剤を乾燥させます。耳カニューレをバンドエイドで固定します(材料の表を参照)。

2.麻酔と機械的換気

  1. 4μg/ kgのフェンタニルの静脈内注射を通じて鎮痛を投与します。.3 mg / kgのプロポフォールを静脈内注射して麻酔を誘発します( 材料の表を参照)。
    注:ボーラスの適用により、薬物はすぐに活性コンパートメントに溢れ込み、深部麻酔の迅速な開始を提供します。
  2. 豚を仰臥位の担架に置き、包帯で固定します。アトラクリウム0.5 mg / kgの静脈内注射を通じて筋弛緩剤を適用します( 材料の表を参照)。.
  3. 犬の換気マスク(材料の表を参照)または同様のモデルを介して、非侵襲的換気を即座に開始します。マスクをしっかりとフィットさせるには、残りの指で顎を突き刺しながら、テナールの隆起と両手の親指をマスクの上に置きます。
    注:換気パラメータ:FiO 2(吸気圧分率)= 100%、ピーク吸気圧= <20 cmH 2 0、呼吸数=18-20呼吸/分、PEEP(呼気終末陽圧)= 5 cmH2 0。
  4. 0.1〜0.2 mg / kg / hのフェンタニルと8〜12 mg / kg / hのプロポフォールの連続注入により麻酔を維持します。.5 mL / kg / hのバランスの取れた電解質溶液( 材料の表を参照)を継続的に注入し始めます。常に適切な麻酔深度を維持します。
    注:このための代理パラメータは、動きの欠如、挿管後の自身の呼吸努力の欠如、および心拍数の突然の増加の欠如です。可能であれば、麻酔の深さが不十分な兆候として運動反応を可能にするために、恒久的な筋肉の弛緩を避けてください。

3.気管内挿管

  1. アシスタントを頭の左側に立たせます。アシスタントの左手で口を開け、舌を外側につまんで左に湿布します。アシスタントに、右人差し指で右上唇を押し下げて、口の開口部を改善するように依頼します。
  2. 直接喉頭鏡検査を行います。これを行うには、喉頭鏡( 材料の表を参照)を口の右側に挿入し、舌を左に押しながら前方に押します。喉頭鏡の先端を喉頭蓋弁に収まるまで進めます。
    注:喉頭蓋は通常、軟口蓋に付着することによって声門を覆い隠します。
  3. チューブガイドワイヤー( 材料の表を参照)で喉頭蓋を慎重に脇に押し、軟口蓋に沿って右の梨状くぼみから左に穏やかですくい取ります。
  4. 喉頭鏡のハンドルをアシスタントに渡して、現在の位置に固定します。
  5. 次に、気管内チューブがすでに取り付けられ、ビデオモニターに接続されている柔軟な挿管内視鏡を取ります。内視鏡を経口的に挿入し、声門が視覚化されるまで舌の付け根の上に進めます。
    注意: カメラの曇りを防ぐために、防曇剤( 材料の表を参照)を事前に塗布することをお勧めします。
  6. 声靭帯の間の内視鏡を気管に進めます。軟骨リングと膜性を視覚的に識別することにより、気管の解剖学的構造を確認します。内視鏡がカリナの上に載るまで進めます。腫れや出血を避けるために、内視鏡の先端で敏感な粘膜に触れないようにしてください。
  7. 内視鏡の位置を維持しながら、カメラ画像で見えるようになるまで気管内チューブを進めます。
    注:気管内チューブが声門面を通って前進できない場合は、披裂軟骨に引っかかっている可能性があります。この場合、気管内チューブを1cm引き出し、90°回転させてから、再びゆっくりと前進させる必要があります。必要に応じて、この操作を繰り返すことができます。柔軟な挿管内視鏡と気管内チューブの同様の口径は、この問題が発生するリスクを最小限に抑えることができます。この操作にもかかわらず気管内チューブを進めることができない場合、ブタの喉頭の最も狭い部分である声門下狭窄を通過できない可能性があります。この場合、より小さな気管内チューブサイズを選択する必要があります。サイズ6.5cmまたは7.0cmのIDの通常の市販の気管内チューブは、解剖学的異常がない限り、声門を通過できるはずです。気管内チューブのサイズ要件は、子豚のサイズと品種によって異なります。
  8. 気管内チューブの位置を維持しながら、柔軟な挿管内視鏡を引き出します。
  9. 10 mLシリンジを使用して、10 mLの空気でカフを膨らませます。カフマネージャーでカフ圧力を制御します(目標値:30 cmH2O、 材料表を参照)。
  10. カプノグラフィ24による二酸化炭素の定期的かつ定期的な呼気と聴診15による両面換気により、気管内チューブの正しい配置と適切な換気を確認します。
  11. チューブを人工呼吸器に接続した後、機械的換気を開始します(PEEP = 5 cmH 2 O、呼吸数=可変で、潮汐末CO 2<6 kPa、通常30〜50分-1、FiO 2 = 0.4、I:E(吸気と呼気の比率)= 1:2、一回換気量= 6-8 mL / kg)。
  12. モニタリングを拡大するか(例えば、動脈内血圧測定値の確立、中心静脈または肺動脈カテーテル27の設置)、または介入を継続する。
    注:さらなる実験の問題に応じて、バイタルパラメータと介入オプションの限界値を定義し、それに応じてモニタリングを確立します 研究プロトコルで。

結果

気管内挿管は、前向き無作為化対照研究設定で、10頭の雄豚(12〜16週齢、体重30 kg±3 kg)で実施されました。.ブタは2つのグループに無作為化されました:1つは従来の喉頭鏡下で挿管され(CIグループ)、もう1つのグループはプロトコルに記載されているように柔軟な挿管内視鏡 を介して 挿管支援されました(FIEグループ)。グループの割り当ては、封印された封筒を引っ張ることによって行?...

ディスカッション

これまでの研究では、ブタモデル2,27,32,33の翻訳上の利点に関する具体的な詳細をすでに説明しています。一般に、動物のストレスレベルと不必要な痛みを減らすことは、あらゆる研究プロトコルの不可欠な部分であるべきであり、確実に再現可能なデータを生成するために最も重要です。したが...

開示事項

柔軟な挿管内視鏡とその付属品は、研究目的でのみメーカーから無条件に提供されています。著者らは、これ以上の金銭的またはその他の利益相反を宣言しません。

謝辞

著者は、ダグマー・ディルボンスキーの優れた技術サポートに感謝したいと思います。

資料

NameCompanyCatalog NumberComments
Ambu aScope RegularAmbu GmbH, Medizinprodukte, Bad Nauheim, GermanyDisposable fiber optic outer diameter 5 mm
Ambu aView MonitorAmbu GmbH, Medizinprodukte, Bad Nauheim, Germanymonitor
Atracurium Hikma 50 mg/5mLHikma Pharma GmbH, Martinsriedatracurium
Azaperone (Stresnil) 40mg/mLLilly Deutschland GmbH, Bad Homburg, Germanyazaperone
BD Discardit II Spritze 2, 5, 10, 20 mLBecton Dickinson S.A. Carretera, Mequinenza Fraga, Spainsyringe
BD Luer ConnectaBecton Dickinson Infusion Therapy, AB Helsingborg, Schweden3-way-stopcock
BD Microlance 3 20 GBecton Dickinson S.A. Carretera, Mequinenza Fraga, Spaincannula
Curafix i.v. classicsLohmann & Rauscher International GmbH & Co. KG, Rengsdorf, GermanyCannula retention dressing
Engström CarestationGE Heathcare, Madison USAventilator
Fentanyl-Janssen 0.05 mg/mLJanssen-Cilag GmbH, Neussfentanyl
Führungsstab, Durchmesser 4.3Rüschendotracheal tube introducer
IBM SPSS Statistics for Windows, Version 20IBM SPSS Statistics for Windows, Version 20.0. Armonk, NY: IBM Corp.)Statistical software
Incetomat-line 150 cmFresenius, Kabi Deutschland, GmbHperfusor line
Intrafix PrimelineB. Braun Melsungen AG, Melsungen, GermanyInfusion line
JOZA Einmal Nitril UntersuchungshandschuheJOZA, München, Germanydisposable gloves
Laryngoscope, 45.48.50, KL 2000MediconLaryngoscope handle
Littmann Classic III Stethoscope3M Deutschland GmbH, Neuss, Germanystethoscope
Luer LockB.Braun Melsungen AG, Germany
Maimed VlieskompresseMaimed GmbH, Neuenkirchen, GermanyFleece compress to fix the tongue
Masimo LNCS Adtx SpO2 sensorMasimo Corporation Irvine, Ca 92618 USAsaturation clip for the tail
Masimo LNCS TC-I SpO2 ear clip sensorMasimo Corporation Irvine, Ca 92618 USASaturation clip for the ear
Masimo Radical 7Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USAperiphereal oxygen saturation
Midazolam 15 mg/3 mLHameln Pharma GmbH, Hameln, Germanymidazolam
Midmark Canine Mask Small Plastic with Diaphragm FRSCM-0005Midmark Corp., Dayton, Ohio, USAdog ventilation mask
Octeniderm farblosSchülke & Mayr GmbH, Nordenstedt, GermanyAlcoholic disinfectant
Original Perfusor syringe 50 mLB.Braun Melsungen AG, Germanyperfusor syringe
Perfusor FM BraunB.Braun Melsungen AG, Germanysyringe pump
Propofol 2% 20 mg/mL (50 mL flasks)Fresenius, Kabi Deutschland, GmbHpropofol
RÜSCH Führungsstab für Endotrachealtubus (ID 5.6 mm)Teleflex Medical Sdn. Bhd, MalaysiaPVC coated tube guiding wire
Rüschelit Super Safety Clear >ID 6/6.5 /7.0 mmTeleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysiaendotracheal tube
Stainless Macintosh Größe 4Welch Allyn69604blade for laryngoscope
SterofundinB.Braun Melsungen AG, Melsungen, GermanyBalanced electrolyte solution
Ultrastop Antibeschlagmittel bottle with dropper 25 mLSigmapharm Arzneimittel GmbH, Wien, AustriaAntifog agent
Vasofix Safety 22 G-16 GB.Braun Melsungen AG, Germanyvenous catheter
VBM Cuff ManometerVBM Medizintechnik GmbH, Sulz a.N., Germanycuff pressure gauge
ZeletteLohmann & Rauscher International GmbH & Co. KG, Rengsdorf, GermanyTissue swab

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