歯髄炎研究のための新規マウスギャグを用いたマウスパルプ曝露モデルの確立

要約

この記事では、革新的なマウスギャグを使用してマウスの歯髄炎モデルを確立するための合理化されたプロトコルと、その後の組織学的分析について説明します。

要約

歯髄炎は、自然な歯の喪失の一般的な原因であり、炎症を起こした歯髄の壊死と生理活性の喪失につながります。歯髄炎の根底にあるメカニズムとその効率的な治療を解明することは、歯内療法研究の継続的な焦点です。したがって、歯髄内の炎症過程を理解することは、歯髄の保存を改善するために不可欠です。他の in vitro 実験と比較して、マウス歯髄炎モデルは、歯髄炎の病理学的進行を観察するための、より本物で遺伝的に多様な状況を提供します。しかし、マウスの使用は、費用対効果が高く、アクセスしやすいにもかかわらず、サイズが小さく、協調性が低く、耐性が低いため困難を伴い、口腔内および歯科治療を複雑にします。このプロトコルは、マウスの髄を露出させるためのマウスギャグの新しい設計と適用を導入し、より効率的な口腔内処置を促進します。マウスギャグは、ほとんどの歯科医がすぐに利用できる歯列弓で構成されており、初めての手術でも手術の準備を大幅に迅速化できます。マイクロCT、ヘマトキシリン-エオシン(HE)染色、および免疫蛍光染色を使用して、形態と細胞発現の変化を特定しました。この記事の目的は、研究者がこの新しい口ギャグを使用して歯髄炎症モデルを作成するための、より再現性が高く、要求の少ない手順を確立するのを支援することです。

概要

歯の不可欠な部分である歯髄は、栄養供給、象牙質形成、感覚機能、防御反応など、複数の重要な機能を担っています¹。それにもかかわらず、硬組織に囲まれた歯髄は、深部虫歯、歯髄炎、外傷、またはその後の治療による損傷や損傷を受けやすい^です2,3。機能的な歯髄がないと、歯の脆弱性のリスクが高まります⁴。さらに、若い永久歯の歯髄の活力の喪失は歯の成熟に悪影響を与える可能性があり、現在の義歯技術は健康な歯髄によって提供される神経フィードバックを回復できません⁴。このような状況により、研究者は、単なる除去だけでなく、炎症を起こした歯髄を管理するための代替ソリューションを模索するようになりました。

2007年、Murrayらは再生歯内療法における組織工学の応用を開始し、それによって歯髄の保存と再生⁵への関心が高まりました。しかし、炎症を起こした歯髄組織は、細胞がIL-6などの炎症性因子を放出し、炎症細胞を動員し、細胞の壊死、歯髄の活力の喪失、および機能回復の合併症を引き起こすため、課題となります^6,7

プロトコル

この研究の実験手順は、四川大学西中国口腔病学院の倫理委員会(WCHSIRB-D-2021-125)によって承認されました。成体C57BL/6マウスは、Gempharmatech Experimental Animals Company(中国・成都)から入手しました。上顎第一大臼歯の冠全体は、生後21日で噴出します。手術を受けるマウスは、生後21日以上で、活力は正常である^{べきである 11}.ここでは、6週齢から8週齢のマウスをモデリングに用いました。 図1 は、使用されるプロトコルを示すフロー図です。

1. 術前準備(図2)

1. 次の器具を入手してください:立体顕微鏡、固定プレート、医療用テープ、口ギャグ、直径0.6mmの低侵襲歯科用バリ、歯科用高速歯科用ハンドピース、8#C +ファイル、加熱パッド、1mLシリンジ、滅菌綿球、目の鉗子。
2. 次の薬を入手してください:麻酔ミックス、獣医軟膏。

2.口ギャグの準備

1. 麻酔ミックス溶液 (10% ケタミン塩酸塩 + 5%....

ディスカッション

歯髄は、歯の中の孤立した軟組織として、歯の生理活性を維持する上で重要な役割を果たしていますが、依然として非常に敏感です。この重要な歯髄の保存は、最近の歯内療法において好ましい初期アプローチとなっており、歯髄の炎症メカニズムを包括的に理解する必要があります¹⁶。炎症性微小環境の時空間変動と歯髄炎の常在細胞型間の相互作用は、 in vitro 研?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Animal
C57/B6J mice	Gempharmatech Experimental Animals Company	C57/B6J	For the establishment of pulp exposure
Equipment
1 mL syringe	Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD.	SB1-074(IV)	Apply in drug injection.
8# C+ file	Readysteel	0010047	Apply in exposing the roof of pulp chamber.
Anesthesia Mix solution			10% ketamine hydrochloride+ 5% xylazine + 85% sterile isotonic saline.
DAPI Staining Solution	Beyotime	C1005	Apply in immunofluorescence staining for counter-staining of nucleus.
Dental high-speed dental handpiece	Jing yuan electronic commerce technology	WJ-422	Apply in pulp exposure.
Heavy wire cutter	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	none	Apply inarc cutting.
Hematoxylin and Eosin Stain kit	Biosharp	BL700B	For the histological analysis of the slides.
IL-6 antibody	Novus	NBP2-89149	Apply in immunofluorescence staining to detect the inflammation of the dental pulp.
Ketamine(Ketamine hydrochloride)	Vet One, Boise, Idaho, USA	C3N VT1	100mg/kg, IP. Apply in nesthetization.
Medical tap	3M	1530	Apply in mice immobilization.
Orthodontic arch wire	Shanghai Wei Rong Medical Apparatus Co. LTD.	K417	Diameter of 8µm
Round dental burr (0.6 mm)	Shofu global	072208	Apply in removing enamel and shallow layer of dentin.
Young loop bending plier	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	none	Apply in arc bending.