Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Bu makale, yenilikçi bir ağız tıkaç kullanarak farelerde bir pulpitis modeli oluşturmak için kolaylaştırılmış bir protokol ve ardından müteakip histolojik analiz sunmaktadır.
Doğal diş kaybının yaygın bir nedeni olan pulpitis, iltihaplı diş pulpasında nekroza ve biyoaktivite kaybına yol açar. Pulpitisin altında yatan mekanizmaların çözülmesi ve etkili tedavisi, endodontik araştırmaların devam eden bir odak noktasıdır. Bu nedenle, diş pulpasındaki enflamatuar süreci anlamak, pulpanın korunmasını iyileştirmek için hayati önem taşır. Diğer in vitro deneylerle karşılaştırıldığında, bir murin pulpitis modeli, pulpitisin patolojik ilerlemesini gözlemlemek için daha otantik ve genetik olarak çeşitli bir bağlam sunar. Bununla birlikte, maliyet etkinliği ve erişilebilirliğine rağmen farelerin kullanılması, küçük boyutları, zayıf koordinasyonları ve düşük toleransları nedeniyle ağız içi ve diş prosedürlerini karmaşıklaştıran zorluklar doğurmaktadır. Bu protokol, fare pulpasını ortaya çıkarmak için yeni bir ağız tıkaç tasarımı ve uygulaması sunarak daha verimli ağız içi prosedürleri kolaylaştırır. Ağız tıkacı, çoğu diş hekimi tarafından kolayca bulunabilen bir diş kemerinden oluşur ve ilk kez yapılan prosedürler için bile cerrahi hazırlığı önemli ölçüde hızlandırabilir. Morfoloji ve hücre ekspresyonundaki değişiklikleri tanımlamak için mikro-BT, hematoksilen-eozin (HE) boyaması ve immünofloresan boyama kullanıldı. Bu makalenin amacı, araştırmacıların bu yeni ağız tıkaç kullanarak bir pulpa iltihabı modeli oluşturmak için daha tekrarlanabilir ve daha az talepkar bir prosedür oluşturmalarına yardımcı olmaktır.
Dişin ayrılmaz bir parçası olan diş pulpası, besin temini, dentin oluşumu, duyusal fonksiyon ve savunma reaksiyonları gibi birçok temel fonksiyondan sorumludur1. Bununla birlikte, sert doku ile çevrili diş pulpası, derin çürükler, pulpitis, travma veya sonraki tedavilerden kaynaklanan yaralanmalara ve hasarlara karşı hassastır 2,3. Fonksiyonel diş pulpasının olmaması diş kırılganlığı riskini artırır4. Ayrıca, genç kalıcı dişlerde pulpa canlılığının kaybı diş olgunlaşmasını olumsuz etkileyebilir ve mevcut protez teknikleri, sağlıklı pulpanın sunduğu nöral geri bil....
Bu çalışmadaki deneysel prosedürler, Sichuan Üniversitesi Batı Çin Stomatoloji Okulu etik komitesi tarafından onaylanmıştır (WCHSIRB-D-2021-125). Yetişkin C57BL / 6 fareleri, Gempharmatech Deney Hayvanları Şirketi, Chengdu, Çin'den elde edildi. Maksiller birinci azı dişinin tüm tacı doğumdan 21 gün sonra patlar. Ameliyat için fareler normal canlılık ile 21 günden daha eski olmalıdır11. Burada, modelleme için 6 ila 8 haftalık fareler kullanıldı. Şekil 1 , kullanılan protokolü gösteren bir akış diyagramıdır.
1. Ameliyat öncesi hazırlık (....
Yukarıda tarif edilen işlem 3, 6-8 haftalık C57BL/6 farelerin sağ maksiller birinci azı dişlerine uygulanırken, sol maksiller birinci azı dişleri kontrol olarak korundu. Boş kontrolden elde edilen histoloji ve immünofloresan sonuçları, 12 saat pulpitis ve 24 saat pulpitis örnekleri gösterim için kullanıldı.
Goldman ve ark.15'ten alınan BT analizi protokolünü takiben, pulpa maruziyeti Şekil 4 A-C'de mik.......
Dişlerin içindeki tek yumuşak doku olan diş pulpası, dişin biyoaktivitesinin korunmasında çok önemli bir rol oynar, ancak oldukça hassas kalır. Bu hayati pulpanın korunması, son endodontik tedavilerde tercih edilen ilk yaklaşım haline gelmiştir ve dental pulpanın enflamatuar mekanizmalarının kapsamlı bir şekilde anlaşılmasını gerektirmiştir16. İnflamatuar mikroçevrenin uzay-zamansal dalgalanması ve pulpitiste yerleşik hücre tipleri arasındaki etkileşimler, in v.......
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmezler.
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı U21A20368 (LY), 82101000 (HW) ve 82100982 (FL) ve Sichuan Bilim ve Teknoloji Programı 2023NSFSC1499 (HW) tarafından sağlanan hibelerle finanse edilmiştir. Tüm orijinal veriler ve görüntüler bu belgeye dahil edilmiştir.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Animal | |||
C57/B6J mice | Gempharmatech Experimental Animals Company | C57/B6J | For the establishment of pulp exposure |
Equipment | |||
1 mL syringe | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB1-074(IV) | Apply in drug injection. |
8# C+ file | Readysteel | 0010047 | Apply in exposing the roof of pulp chamber. |
Anesthesia Mix solution | 10% ketamine hydrochloride+ 5% xylazine + 85% sterile isotonic saline. | ||
DAPI Staining Solution | Beyotime | C1005 | Apply in immunofluorescence staining for counter-staining of nucleus. |
Dental high-speed dental handpiece | Jing yuan electronic commerce technology | WJ-422 | Apply in pulp exposure. |
Heavy wire cutter | Jirui Medical Instrument Co., Ltd. | none | Apply inarc cutting. |
Hematoxylin and Eosin Stain kit | Biosharp | BL700B | For the histological analysis of the slides. |
IL-6 antibody | Novus | NBP2-89149 | Apply in immunofluorescence staining to detect the inflammation of the dental pulp. |
Ketamine(Ketamine hydrochloride) | Vet One, Boise, Idaho, USA | C3N VT1 | 100mg/kg, IP. Apply in nesthetization. |
Medical tap | 3M | 1530 | Apply in mice immobilization. |
Orthodontic arch wire | Shanghai Wei Rong Medical Apparatus Co. LTD. | K417 | Diameter of 8µm |
Round dental burr (0.6 mm) | Shofu global | 072208 | Apply in removing enamel and shallow layer of dentin. |
Young loop bending plier | Jirui Medical Instrument Co., Ltd. | none | Apply in arc bending. |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır