Создание модели воздействия пульпы мыши с новым кляпом для исследования пульпита

Резюме

В данной статье представлен оптимизированный протокол установления модели пульпита у мышей с использованием инновационного ротового кляпа с последующим гистологическим анализом.

Аннотация

Пульпит, распространенная причина естественной потери зубов, приводит к некрозу и потере биологической активности в воспаленной пульпе зуба. Разгадка механизмов, лежащих в основе пульпита, и его эффективное лечение находятся в центре внимания эндодонтических исследований. Таким образом, понимание воспалительного процесса в пульпе зуба жизненно важно для улучшения сохранности пульпы. По сравнению с другими экспериментами in vitro , модель пульпита у мышей предлагает более достоверный и генетически разнообразный контекст для наблюдения за патологическим прогрессированием пульпита. Тем не менее, использование мышей, несмотря на их экономическую эффективность и доступность, создает трудности из-за их небольшого размера, плохой координации и низкой переносимости, что усложняет внутриротовые и стоматологические процедуры. Этот протокол представляет собой новую конструкцию и применение кляпа для обнажения пульпы мыши, способствуя более эффективным внутриротовым процедурам. Кляп, состоящий из зубной дуги, легко доступной для большинства стоматологов, может значительно ускорить хирургическую подготовку даже к первым процедурам. Для выявления изменений морфологии и экспрессии клеток использовали микрокомпьютерную томографию, окрашивание гематоксилин-эозином (ПЭ) и иммунофлуоресцентное окрашивание. Цель данной статьи – помочь исследователям разработать более воспроизводимую и менее сложную процедуру создания модели воспаления пульпы с использованием этого нового кляпа.

Введение

Пульпа зуба, неотъемлемая часть зуба, отвечает за множество важных функций, таких как снабжение питательными веществами, образование дентина, сенсорная функция и защитные реакции¹. Тем не менее, пульпа зуба, окруженная твердыми тканями, подвержена повреждениям и повреждениям в результате глубокого кариеса, пульпита, травмы или последующих методов лечения ^2,3. Отсутствие функциональной пульпы зуба увеличивает риск хрупкости зубов⁴. Кроме того, потеря жизнеспособности пульпы в молодых постоянных зубах может негативно сказаться на созревании зубов, а современные мет....

протокол

Экспериментальные процедуры в этом исследовании были одобрены этическим комитетом Западно-Китайской школы стоматологии Сычуаньского университета (WCHSIRB-D-2021-125). Взрослые мыши C57BL/6 были получены от компании Gempharmatech Experimental Animals Company, Чэнду, Китай. Вся коронка первого моляра верхней челюсти прорезывается через 21 день после рождения. Мыши для операции должны быть старше 21 дня при нормальной жизнеспособности¹¹. Здесь для моделирования использовались мыши в возрасте от 6 до 8 недель. На рисунке 1 показана блок-схема, показывающая используемый протокол.

1. Пре....

Результаты

Описанная выше процедура была выполнена на первом моляре правой верхней челюсти у 3 мышей C57BL/6 в возрасте 6-8 недель, при этом первые моляры левой верхней челюсти были сохранены в качестве контроля. Для демонстрации были использованы результаты гистологии и иммунофлюоресценции холостог.......

Обсуждение

Являясь единственной мягкой тканью в зубах, пульпа зуба выполняет решающую роль в поддержании биологической активности зуба, но при этом остается высокочувствительной. Сохранение этой жизненно важной пульпы стало предпочтительным начальным подходом в современных эндодонтических ме.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Animal
C57/B6J mice	Gempharmatech Experimental Animals Company	C57/B6J	For the establishment of pulp exposure
Equipment
1 mL syringe	Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD.	SB1-074(IV)	Apply in drug injection.
8# C+ file	Readysteel	0010047	Apply in exposing the roof of pulp chamber.
Anesthesia Mix solution			10% ketamine hydrochloride+ 5% xylazine + 85% sterile isotonic saline.
DAPI Staining Solution	Beyotime	C1005	Apply in immunofluorescence staining for counter-staining of nucleus.
Dental high-speed dental handpiece	Jing yuan electronic commerce technology	WJ-422	Apply in pulp exposure.
Heavy wire cutter	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	none	Apply inarc cutting.
Hematoxylin and Eosin Stain kit	Biosharp	BL700B	For the histological analysis of the slides.
IL-6 antibody	Novus	NBP2-89149	Apply in immunofluorescence staining to detect the inflammation of the dental pulp.
Ketamine(Ketamine hydrochloride)	Vet One, Boise, Idaho, USA	C3N VT1	100mg/kg, IP. Apply in nesthetization.
Medical tap	3M	1530	Apply in mice immobilization.
Orthodontic arch wire	Shanghai Wei Rong Medical Apparatus Co. LTD.	K417	Diameter of 8µm
Round dental burr (0.6 mm)	Shofu global	072208	Apply in removing enamel and shallow layer of dentin.
Young loop bending plier	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	none	Apply in arc bending.