超音波画像によるマウスにおける肺腫瘍の進行の検出

このプロトコルの重要性は、腫瘍開始から腫瘍進行まで、このマウスモデルで自発的に発症した肺腫瘍のリアルタイム検出性にあります。この技術の利点は、非侵襲的であり、基本的なスキルのみを必要とし、私たちは直接薬物の効果と関心の治療を監視することができます。肺腫瘍の進行は、対象遺伝子の有無において評価することもできる。

この分析を使用すると、新しい治療戦略をクリニックに拡張できる可能性があります。レンチウイルス挿管後7週間と18週間、超音波ゲルと温度モニターの加熱ポンプをオンにし、摂氏33度のインキュベーターを設置します。3Dモーターを統合レールシステムに設置し、モータおよびトランスデューサ取り付けシステムが所定の位置に固定されていることを確認します。

40ヘルツ周波数トランスデューサを3Dモータに接続し、超音波ソフトウェアで新しい研究を開きます。新しいスタディ ウィンドウで、スタディ名を入力します。系列名ウィンドウで、系列名およびその他の関連情報を入力します。

クリックした後、トランスデューサタイプを選択します。プログラムは B モードに変わります。動物のプラットホームの上の便利な位置に暖房ランプを置き、麻酔付き実験用マウスのペダル反射への応答の欠如を確認する。

動物のプラットホームにマウスを置いてキュービタス腹側に入れ、動物の目に軟膏を塗布します。テープでプラットフォームにしっかりと手足を固定し、動物の胸に温めた超音波ゲルの薄い層を適用します。高さコントロールノブを使用して、マウス胸部の表面に触れるまで集録プローブを下げ、マウスの心臓がほぼ中央に合うようプローブを配置します。

その後、マイクロノブを使用して、横方向の両方の四肢から胸全体の画像を取得します。理想的には、マウスあたり500フレームを収集します。すべての画像がキャプチャされたら、マウスの胸からゲルをきれいにし、動物を温まるインキュベーターに入れてください。

超音波画像の2D分析のために、超音波ソフトウェアで取得したフレームを開き、手動で腫瘍のフレームをスキャンします。小さな腫瘍を起用する場合は、獲得した500フレームの全長に対して、10フレームごとに定期的にビーラインの数を数えます。大きな腫瘍の2D測定では、線形ツールを使用して、存在する腫瘍の幅と長さを測定し、次に式を使用して腫瘍の体積を計算します。

気管内感染から7週間後、超音波画像診断が行われ、注射後の実験マウスモデルで生じる様々なタイプの前駆体病変を可視化する。これらの同定された前駆体病変は、眼で数えられ、肺の表面上の小さな腫瘍を表すことができる。これらのデータの散布プロットにより、実験マウス内の腫瘍を定量化し、動物ごとの相対的な腫瘍数を推定することを可能にする。

感染後18週で、大きな腫瘍は、超音波ソフトウェア内で測定することができる複数表面を中断する深い裂け目として現れる。その後、統計的分析のために相対的な腫瘍量を定量化することができます。感染後20週で採取した肺切片にヘマトキシリンおよびエオシン染色は、大きな腫瘍の形成ならびに腺腫および腺癌の形成を確認する。

動的な肺腫瘍と、静的な偽陽性を混同しないことが重要である。この方法では体積の腫瘍数の修飾は相対的であるため、シャートリ染色などの追加の方法を用いることを提案する。このモデルは、マウスの肺癌の発達に対する遺伝的収差または治療戦略の影響を直接評価することを可能にする。